王丹暉，楊又兵*，雷 瑩，馬彥博，王丁丁，婁 然

（1.河南科技大學動物科技學院，河南 洛陽 471023；2.河南省動物福利與健康養(yǎng)殖國際聯(lián)合實驗室，河南 洛陽 471023）

天然植物活性多糖具有廣闊的應(yīng)用前景[1]。甘草是一種常用中藥材，甘草多糖具有免疫調(diào)節(jié)[2-3]、提高生長性能[4]、抗腫瘤[5]、抗病毒[6]、抗氧化[7]等功效，且無細胞毒作用[8]，可作為飼料添加劑。黃文清[9]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂甘草顆粒可提高烏骨雞的平均日增重和平均日采食量。衣蕾等[10]研究發(fā)現(xiàn)，添加甘草多糖組的羅曼雞平均體重顯著高于空白對照組。

本試驗研究甘草多糖對愛拔益加肉雞生長性能、體尺以及IGF-1基因相對表達量的影響，旨在為甘草多糖在肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

甘草多糖購自洛陽藍斯利科技有限公司。

PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser反轉(zhuǎn)錄試劑包、RNAiso Plus、氯仿、無水乙醇、異丙醇、DEPC 水、TB Green Premix Ex Taq Ⅱ試劑包，均購自賽沃生物科技有限公司。

1.2 試驗設(shè)計

選用1 日齡的健康愛拔益加肉雞240 只，購自洛陽市偃師市佃莊鎮(zhèn)種雞場，隨機分為4 組，每組6 個重復，每個重復10只雞。組1為對照組，肉雞飼喂基礎(chǔ)日糧；組2、組3和組4 分別在基礎(chǔ)日糧中添加300、600 和900 mg/kg 的甘草多糖。試驗期為42 d。

每日人工飼喂3次（9：00、15：00、20：00）。溫度設(shè)定為32～35 ℃，第1 周 起 每2 d 下 降1 ℃；第3 周 起 溫 度24～26 ℃，濕度控制60%～70%。

試驗日糧為顆粒料，購自洛陽六和飼料有限責任公司?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平Tab.1 Composition and nutrient levels of the basal diet

1.3 引物設(shè)計

根據(jù)NCBI 庫中收錄的IGF1 mRNA 序列設(shè)計基因特異性引物，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成引物，引物信息見表2。

表2 引物序列信息Tab.2 Primer sequence information

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能

分別稱肉雞的試驗初重、試驗末重，計算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.4.2 體尺指標

第6 周齡末每個重復隨機抽取5 只雞，分別測定雞體斜長、龍骨長、胸寬、脛長。

1.4.3IGF-1基因相對表達量

采用TRIzol法提取愛拔益加肉雞胸肌組織的RNA，使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將提取的RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。

PCR 反應(yīng)體系20 μL：cDNA 1 μL、TB Green Premix Ex TaqⅡ(2×) 10 μL、IGF1上下游引物（10 μmol/L）各0.7 μL、RNase-free ddH2O 7.6 μL。

PCR 擴增條件為95 ℃預變性30 s；95 ℃變性5 s，60 ℃退火30 s，循環(huán)40次；95 ℃延伸10 s，擴增結(jié)束后分析熔解曲線。

采用2-△△Ct 法計算IGF-1基因相對表達量，使用Prism 8.0軟件制圖。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel進行整理，采用SPSS 26.0軟件進行單因素方差分析。結(jié)果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同添加水平的甘草多糖對肉雞生長性能的影響（見表3）

由表3 可知，與對照組相比，各試驗組末重和ADG 均顯著提高（P＜0.05），各試驗組的F/G 顯著降低（P＜0.05）。組4的ADFI顯著低于對照組（P＞0.05）。

表3 不同添加水平的甘草多糖對肉雞生長性能的影響Tab.3 Effect of different levels of Glycyrrhiza polysaccharide on growth performance of broilers

2.2 不同添加水平的甘草多糖對肉雞體尺的影響（見表4）

表4 不同添加水平的甘草多糖對肉雞體尺的影響Tab.4 Effectofdifferentlevels of Glycyrrhiza polysaccharideon body sizeof broilers

由表4可知，與對照組相比，組3、組4的胸寬顯著升高（P＜0.05）；各試驗組的體斜長均顯著升高（P＜0.05），隨著添加量增加有上升趨勢，但組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 不同添加水平的甘草多糖對肉雞IGF-1 基因相對表達量的影響（見圖1）

圖1 不同添加水平的甘草多糖對肉雞IGF-1基因相對表達量的影響Fig.1 Effect of different levels of Glycyrrhiza polysaccharide on IGF-1 gene relative expression of broilers

由圖1 可知，組3、組4 肉雞IGF-1基因的相對表達量均極顯著高于對照組（P＜0.01）。

3 討論

3.1 不同添加水平的甘草多糖對肉雞生長性能的影響

植物多糖可提高動物的生長性能，改善健康狀況[1]。本試驗中，與對照組相比，各試驗組肉雞ADG均顯著提高（P＜0.05），組3 肉雞的F/G 顯著降低（P＜0.05）。研究表明，枸杞多糖和大蒜多糖可顯著提高肉雞的平均日增重（P＜0.05），日采食量顯著降低（P＜0.05）[11-12]。日糧中添加不同濃度的甘草多糖顯著提高22～42日齡時肉雞的平均日增重[13]。飼喂甘草多糖可降低平均日采食量，提高小鼠的平均日增重[14]。衣蕾等[10]研究發(fā)現(xiàn)，肌肉注射4 g/L甘草多糖能夠有效提高蛋雞的生長性能。董永軍等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂不同濃度的甘草多糖可提高肉仔雞體重。

3.2 不同添加水平的甘草多糖對肉雞體尺的影響

體尺性狀是衡量動物機體是否健康的指標[16]。本試驗中，飼喂添加甘草多糖的試驗組肉雞與對照組的脛長、胸骨長均無顯著差異（P＞0.05），但隨著添加甘草多糖濃度增加，肉雞的脛長、胸骨長均有提高。與對照組相比，各試驗組胸寬均有增加，其中甘草多糖添加量為600、900 mg/kg的試驗組均顯著升高（P＜0.05）；各試驗組的體斜長均顯著高于對照組（P＜0.05），且隨著添加量增加有上升趨勢，但組間差異不顯著（P＞0.05）。曹向陽[17]研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加松針粉可顯著提高固始公雞的脛圍（P＜0.05）。代航等[18]研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加稻殼粉對雛火雞的各項體尺指標均無顯著差異（P＞0.05），表明不同動物對不同日糧添加劑的耐受力不同。

3.3 不同添加水平的甘草多糖對肉雞IGF-1 基因相對表達量的影響

IGF-1 是一種生物活性肽物質(zhì)[19]，能夠影響動物機體生長發(fā)育以及營養(yǎng)物質(zhì)的代謝活性[20]。動物IGF-1的合成與日糧的營養(yǎng)水平密切相關(guān)[21]。萬秋蓓等[22]研究表明，動物的生長發(fā)育水平與IGF-l相關(guān)度極高。呂建敏等[23]研究表明，IGF-1基因的相對表達量與日糧粗蛋白水平密切相關(guān)。本試驗中，各水平甘草多糖添加組肉雞IGF-1基因的相對表達量均有所提高，組3 和組4 肉雞IGF-1基因的相對表達量均極顯著高于對照組（P＜0.01）。由此可見，日糧中添加甘草多糖對可提高肉雞生長相關(guān)基因IGF-1的相對表達量。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，日糧中添加甘草多糖可以改善肉雞生長性能、體尺以及IGF-1基因的相對表達量。