紀(jì)欣童 于 磊 詹亞光*

（1. 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150040；2. 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院東北鹽堿植被恢復(fù)與重建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱 150040）

油菜素內(nèi)酯（BRs）是一種植物特有的類固醇激素，在植物生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程以及對(duì)多種生物和非生物脅迫方面具有關(guān)鍵的作用［1］。24-表油菜素內(nèi)酯（24-epibrassinolide，EBR）在穩(wěn)定低溫脅迫下高山離子芥懸浮細(xì)胞膜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能方面發(fā)揮積極作用，從而保證細(xì)胞生理代謝的正常進(jìn)行，以提高其抗寒能力［2］。BRASSINAZOLE RESISTANTANT1（BZR1）是調(diào)節(jié)BR 信號(hào)通路中的重要元件之一。BZR1與下游BR 調(diào)控因子的啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合并抑制BR 生物合成基因的表達(dá)以降低BR 水平，進(jìn)而影響植物的生長(zhǎng)［3～6］。因此，BZR1參與的負(fù)反饋調(diào)節(jié)是保持BR 作用平衡的關(guān)鍵機(jī)制。除介導(dǎo)BR 信號(hào)，BZR1在植物響應(yīng)內(nèi)部和外部刺激的過(guò)程中對(duì)于維持植物的正常生長(zhǎng)和發(fā)育尤為重要［7］。擬南芥BZR1 結(jié)合ABA 誘導(dǎo)型轉(zhuǎn)錄因子ABA INSENSITIVE 5（ABI5）的啟動(dòng)子上幾個(gè)G-box 順式元件抑制ABI5表達(dá)降低植物對(duì)ABA 的敏感性，說(shuō)明BZR1基因能夠介導(dǎo)BR與ABA 之間的信號(hào)傳導(dǎo)來(lái)促進(jìn)植物響應(yīng)生物和非生物脅迫［8］。在水稻中，BR 信號(hào)中BZR1直接促進(jìn)OsmiR396d 的積累，OsmiR396d 通過(guò)調(diào)節(jié)不同靶基因的表達(dá)來(lái)控制BR 反應(yīng)和GA 的生物合成，進(jìn)而影響水稻的各種發(fā)育過(guò)程，提高水稻的產(chǎn)量［9］。擬南芥光受體光敏色素B（phyB）可直接與BZR1 的DNA 結(jié)合域相互作用，影響B(tài)ZR1 在靶基因染色質(zhì)上的累積進(jìn)而影響B(tài)R 信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)［10］。Guo 等［11］發(fā) 現(xiàn) 在 香 蕉 果 實(shí) 成 熟 過(guò) 程 中MaBZR1 充當(dāng)乙烯生物合成基因的轉(zhuǎn)錄阻遏物，延長(zhǎng)香蕉果實(shí)成熟的時(shí)間，提高香蕉果實(shí)的品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)。BZR1 通過(guò)依賴RBOH1 的活性氧（ROS）信號(hào)調(diào)節(jié)番茄的耐熱性［12］。Saha 等［13］研究了BZR家族轉(zhuǎn)錄因子在鹽脅迫、干旱和ABA 處理后下的表達(dá)模式，檢測(cè)了它們?cè)诓煌鞴僦械慕M織特異性表達(dá)情況，結(jié)果表明BZR家族轉(zhuǎn)錄因子在抵抗各種脅迫中發(fā)揮多重作用。Lü 等［14］研究結(jié)果表明，在鹽脅迫下BpBZR1在白樺中的過(guò)表達(dá)導(dǎo) 致H2O2和MDA 的 積 累 降 低，SOD 和POD 活 性升高，保持較高的光合強(qiáng)度和較低的葉綠素降解速率，說(shuō)明BpBZR1基因的過(guò)表達(dá)提高了白樺對(duì)鹽脅迫的耐受性。結(jié)合小泛素相關(guān)修飾物（small ubiquitin-like modifier，SUMO）是將環(huán)境信號(hào)轉(zhuǎn)化為細(xì)胞信號(hào)的重要機(jī)制，在鹽脅迫下，擬南芥植株BZR1 在細(xì)胞質(zhì)中去SUMO 化，促進(jìn)BZR1 靶向SUMO 蛋白酶ULP1a 的積累，從而抑制植株生長(zhǎng)，而B(niǎo)R 處理可以促進(jìn)ULP1a 降解，SUMO 化BZR1 積累并促進(jìn)植株生長(zhǎng)，增強(qiáng)植株響應(yīng)鹽脅迫的能力［15］。但在木本植物中對(duì)于BZR1的研究報(bào)道較少。

水曲柳（Fraxinus mandshuricaRupr.）木犀科（Oleaceae）白蠟樹(shù)屬（Fraxinus），是我國(guó)東北特有的白蠟樹(shù)屬樹(shù)種之一，被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)的漸危種［16］。水曲柳在林業(yè)生產(chǎn)上具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［17～18］。然而，水曲柳容易受到一系列生物和非生物脅迫的影響，包括土壤含鹽量較高、寒冷時(shí)間長(zhǎng)等因素。因此，研究關(guān)于水曲柳的生長(zhǎng)及抗逆性的基因具有極其重要的意義。

本研究克隆得到水曲柳B(niǎo)ZR1基因，并且命名為FmBZR1基因，進(jìn)行生物信息學(xué)分析，并初步探究其在非生物脅迫及激素誘導(dǎo)下的表達(dá)模式。為深入了解FmBZR1基因在BR 信號(hào)通路的分子機(jī)理，挖掘和運(yùn)用BR 對(duì)水曲柳的潛在作用提供理論依據(jù)。對(duì)提高水曲柳的品質(zhì)以及水曲柳組培苗的擴(kuò)繁具有極其重要的作用。揭示FmBZR1在非生物脅迫和激素信號(hào)下的表達(dá)特征。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)所用的水曲柳種子取自東北林業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)林場(chǎng)，將種子萌發(fā)所形成的水曲柳幼苗置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)基質(zhì)為V（營(yíng)養(yǎng)土）∶V（蛭石）=3∶1，并調(diào)整培養(yǎng)箱維持溫度23±2℃以及濕度為60%～80%，日照16 h，保證植物正常生長(zhǎng)。水曲柳幼苗培養(yǎng)至15 d 時(shí)，取長(zhǎng)勢(shì)相近的植株分別用低溫（4℃）、NaCl（200 mmol·L-1）、ABA（脫落酸，100 μmol·L-1）、IAA（吲 哚 乙 酸，100 μmol·L-1）和GA3（赤霉素，100 μmol·L-1）處理。鹽脅迫使用澆灌法，對(duì)照組澆水處理；激素誘導(dǎo)使用葉面噴施方式，以0 h 未處理作為對(duì)照［19］。在正常條件下繼續(xù)培養(yǎng)，分別于處理后1、3、6、12、24、48 h 取水曲柳幼根、莖、葉等組織作為樣品，各3 次重復(fù)。-80℃冰箱保存。

1.2 主要試劑

pMD18-T 載體、反轉(zhuǎn)錄試劑盒均購(gòu)自TaKaRa（大連寶生物工程有限公司）。引物合成及基因測(cè)序由上海生工生物有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1FmBZR1基因的擴(kuò)增

以水曲柳葉片為實(shí)驗(yàn)材料，CTAB 法提取材料的總RNA。使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將提取的RNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA。利用本研究團(tuán)隊(duì)之前獲取的水曲柳轉(zhuǎn)錄組，通過(guò)primer 5.0 軟件設(shè)計(jì)引物，并送生物公司合成，引物序列如表1所示?；厥占兓禺愋詳U(kuò)增產(chǎn)物，pMD18-T 載體連接純化產(chǎn)物，轉(zhuǎn)化克隆進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞，送生物公司測(cè)序。

表1 FmBZR1基因序列克隆及熒光定量引物序列Table 1 Primers sequences for cloning FmBZR1 gene and fluorescent quantification

1.3.2FmBZR1基因的生物信息學(xué)分析

用DNAMAN 軟件分析得到的FmBZR1基因的核苷酸序列，并推測(cè)其氨基酸序列。FmBZR1蛋白的理化性質(zhì)、親水/疏水性、信號(hào)肽的預(yù)測(cè)及分析以及跨膜結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)和分析分別通過(guò)Protparam在線分析軟件（http：//web.expasy.org/protparam/）、ProtScale 在 線 分 析 軟 件（http：//web.expasy.org/protscale/）、SignalP 在線分析工具（http：//www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/）、在線工具TMPred（http：//www.ch.embnet.org/software/TMPRED_form.html）進(jìn)行分析。應(yīng)用亞細(xì)胞定位在線分析工具Wolf psort（http：//www.genscript.com/wolf-psort.html）對(duì)Fm-BZR1蛋白進(jìn)行分析。FmBZR1蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)應(yīng)用GOR4 軟 件（https：//npsa-prabi.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl？page=npsa_gor4.html）分析。Fm-BZR1 蛋白的保守結(jié)構(gòu)域利用NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)Conserved Domain Seach Service（CD Search，https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/cdd/wrpsb.cgi）在線軟件分析。FmBZR1 蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)通過(guò)Swiss Model 在線軟件（https：//swissmodel.expasy.org/interactive）預(yù)測(cè)。FmBZR1 氨基酸序列應(yīng)用NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)Blast 進(jìn)行同源序列比對(duì)，以及搜索不同物種中的同源基因和蛋白。先將氨基酸序列利用ClusalX 進(jìn)行多序列比對(duì)的分析，然后通過(guò)MEGA5.0軟件Neighbor-Joining算法，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)。

1.3.3 水曲柳B(niǎo)ZR1基因在非生物脅迫和激素信號(hào)下的表達(dá)分析

水曲柳實(shí)生苗分別在低溫（4℃）條件下和Na-Cl溶液澆灌條件下進(jìn)行脅迫處理，分別噴施ABA、IAA、GA3三種激素進(jìn)行誘導(dǎo)，處理時(shí)間為1、3、6、12、24、48 h；對(duì)照組不做任何處理，時(shí)間梯度同上。將水曲柳幼根、莖、葉等組織提取得到的總RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，以此為模板進(jìn)行熒光定量分析Fm-BZR1基因的表達(dá)量。內(nèi)參基因?yàn)樗⒐艿鞍谆颚?Tubulin（Tu）［20］，引物見(jiàn)表1。PCR 反應(yīng)體系如下：17.6 μL Master Mix，2 μL cDNA 模板，正反向引物各0.2 μL，用ddH2O 補(bǔ)足至20 μL。擴(kuò)增反應(yīng)利用Applied Biosystems7500 熒光定量PCR 儀進(jìn)行，反應(yīng)程序如下：95℃，30 s、95℃，5 s、60℃，34 s（共40 個(gè)循環(huán)）、95℃，15s、60℃，1 min、95℃，15 s。每份樣品進(jìn)行3 次重復(fù)。目標(biāo)基因表達(dá)水平運(yùn)用相對(duì)定量的2-ΔΔCt法計(jì)算［21］。

2 結(jié)果與分析

2.1 FmBZR1基因全長(zhǎng)的鑒定

用FmBZR1基因的特異性引物和之前實(shí)驗(yàn)得到的cDNA 模板進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。電泳結(jié)果顯示，可擴(kuò)增出大小在1 000 bp 左右并符合預(yù)期的特異性片段（見(jiàn)圖1）。DNAMAN 軟件預(yù)測(cè)水曲柳Fm-BZR1基因片段大小為984 bp，氨基酸序列長(zhǎng)度推測(cè)為327個(gè)氨基酸（見(jiàn)圖2）。

2.2 FmBZR1蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的分析

利用Protparam 軟件分析FmBZR1蛋白質(zhì)理化性質(zhì)。FmBZR1 蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為35 092.31；不穩(wěn)定系數(shù)是71.93；理論等電點(diǎn)（PI）為8.46；總平均親水性為-0.512，說(shuō)明該蛋白為親水性蛋白。利用SignalP 工具的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)FmBZR1 蛋白，結(jié)果表明該蛋白可能不存在信號(hào)肽。利用TMPred 分析FmBZR1 蛋白進(jìn)行跨膜結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，F(xiàn)mBZR1 蛋白中由內(nèi)到外（i→o）4～24 位具有強(qiáng)烈的跨膜螺旋結(jié)構(gòu)，說(shuō)明該蛋白有由內(nèi)到外的跨膜能力（見(jiàn)圖3）。利用在線工具Wolf Psort 對(duì)Fm-BZR1 蛋白進(jìn)行亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)，結(jié)果顯示，該蛋白在分泌系統(tǒng)囊泡得分為48，在質(zhì)膜得分為36，在細(xì)胞骨架得分為16，說(shuō)明該蛋白主要存在于細(xì)胞質(zhì)中。

2.3 FmBZR1蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的分析

利用NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)Conserved Domain Search Service（CD Search）在線分析軟件，根據(jù)其催化殘基、輔酶結(jié)合位點(diǎn)、底物結(jié)合位點(diǎn)、抑制劑結(jié)合位點(diǎn)、四聚體接口對(duì)水曲柳FmBZR1、FmBZR2 蛋白的保守結(jié)構(gòu)域進(jìn)行預(yù)測(cè)（見(jiàn)圖4）。參考二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)的結(jié)構(gòu)域，運(yùn)用Swiss-Model 在線分析工具對(duì)FmBZR1蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)同源建模分析，并對(duì)建模結(jié)果采用分析軟件Swiss-Pdb Viewer 進(jìn)行處理。FmBZR1 蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)同源建模結(jié)果表明其氨基酸序列與模板蛋白序列（麥芽糖周質(zhì)結(jié)合蛋白BZR1 蛋白）相似度達(dá)到87.34%，與二級(jí)結(jié)構(gòu)特定結(jié)構(gòu)域吻合（見(jiàn)圖5），且為螺旋—環(huán)—螺旋結(jié)構(gòu)（見(jiàn)圖6）。

2.4 FmBZR1氨基酸比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建

將NCBI 比對(duì)的氨基酸序列利用ClustalX 進(jìn)行比對(duì)結(jié)果分析，結(jié)果表明，F(xiàn)mBZR1 蛋白 序列與11 個(gè)其他物種的BZR1 蛋白序列的相 似性較高（見(jiàn)圖7）。再運(yùn)用MEGA5.0 軟件中的N-J算法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)（見(jiàn)圖8），結(jié)果表明，F(xiàn)m-BZR1 蛋白與11 個(gè)物種的11 條蛋白序列相似性都比較高，大致分為兩大類。其中，F(xiàn)mBZR1 蛋白與樟子松（Olea europaeavar.sylvestris）、芝麻（Sesamum indicum）、丹參（Salvia splendens）、茄子（Solanum lycopersicum）、煙 草（Nicotiana sylvestris）、辣椒（Capsicum annuum）的BZR1 蛋白親緣關(guān)系比較近。

2.5 FmBZR1在非生物脅迫下的表達(dá)模式

水曲柳FmBZR1基因的表達(dá)量隨著非生物脅迫處理的時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生顯著變化（見(jiàn)圖9）。在低溫（4℃）處理后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量隨著處理時(shí)間的變化，呈現(xiàn)先上調(diào)后下調(diào)再上調(diào)的變化趨勢(shì)。在處理6 h 后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量達(dá)到上調(diào)表達(dá)峰值，最大的基因表達(dá)量為對(duì)照組的1.98 倍。在NaCl 處理后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量出現(xiàn)先下調(diào)后上調(diào)再下調(diào)又上調(diào)的表達(dá)趨勢(shì)，整體呈現(xiàn)為先下調(diào)后上調(diào)的趨勢(shì)。在處理24 h 后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量達(dá)到上調(diào)表達(dá)峰值，最大的基因的表達(dá)量是對(duì)照組的10.13 倍。結(jié)果表明，F(xiàn)mBZR1基因明顯響應(yīng)了低溫（4℃）和NaCl 這兩種非生物脅迫，其中，F(xiàn)mBZR1基因?qū)aCl 的響應(yīng)更加強(qiáng)烈。

2.6 FmBZR1在激素信號(hào)下的表達(dá)模式

水曲柳FmBZR1基因的表達(dá)量隨著不同激素信號(hào)處理的時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生顯著變化（見(jiàn)圖10）。在ABA 處理后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量呈現(xiàn)先上調(diào)后下調(diào)的趨勢(shì)，在處理3 h 后達(dá)到下調(diào)表達(dá)峰值，最低表達(dá)量為對(duì)照組的0.52 倍；在處理12 h 后達(dá)到上調(diào)表達(dá)峰值，最高表達(dá)量為對(duì)照組的4.26倍。在IAA處理后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量呈現(xiàn)先下降又上升最后趨于平穩(wěn)的趨勢(shì)，在處理3 h 后達(dá)到最低表達(dá)量，為對(duì)照組的0.41 倍；在處理48 h 后達(dá)到上升表達(dá)峰值，最大表達(dá)量為對(duì)照組的1.44倍。在GA3處理后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量在不同時(shí)長(zhǎng)有顯著差異，在處理3 h后，基因表達(dá)量最低，為對(duì)照組的0.50 倍；在處理24 h 后，基因表達(dá)量顯著升高，為對(duì)照組的6.23 倍。結(jié)果表明，F(xiàn)mBZR1基因響應(yīng)了ABA、IAA、GA3信號(hào)的刺激。

3 討論

BZR1是BR 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，BZR1的N 端有一個(gè)bHLH 結(jié)構(gòu)域，可特異性結(jié)合到靶基因啟動(dòng)子區(qū)的BRRE 元件，對(duì)不同的靶基因的表達(dá)起到抑制或激活作用進(jìn)而影響B(tài)R 信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)而影響植物的抗逆性［22］。本研究通過(guò)生物信息學(xué)分析，確定FmBZR1 也有bHLH 結(jié)構(gòu)，可以與下游基因啟動(dòng)子元件結(jié)合從而發(fā)生作用。當(dāng)然，探究BZR1具體如何對(duì)下游基因產(chǎn)生的影響還需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

BZR1可直接與WRKY54轉(zhuǎn)錄因子互作，也可以促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子CBF（C-repeat binding factor）、WRKY6以及ABA 受體PYL6等編碼基因的表達(dá)，表現(xiàn)出正調(diào)控?cái)M南芥耐寒性［23］。寒冷和土壤含鹽量一直都是限制植物生長(zhǎng)的重要因素。水曲柳幼苗在寒冷環(huán)境下極易受凍害，生長(zhǎng)受到抑制，因此研究低溫對(duì)基因表達(dá)的影響極為重要。本研究在低溫（4℃）處理后發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)mBZR1基因表達(dá)量整體呈現(xiàn)先上調(diào)后下調(diào)再上調(diào)的趨勢(shì)，在處理6 h 后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量達(dá)到上調(diào)表達(dá)峰值，推測(cè)FmBZR1基因參與水曲柳抗寒脅迫中發(fā)揮重要作用。

通過(guò)對(duì)OsBZR1的過(guò)表達(dá)株系進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)BR 可顯著誘導(dǎo)OsBZR1 去磷酸化，鹽脅迫可以調(diào)控OsBZR1 蛋白的積累水平和磷酸化狀態(tài)，BR 正調(diào)控水稻的耐鹽性，鹽脅迫通過(guò)抑制BR 合成來(lái)限制水稻的生長(zhǎng)［24］。水曲柳作為東北地區(qū)“三大硬闊”樹(shù)種之一，研究其基因?qū)果}脅迫的作用尤為關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)在NaCl處理后發(fā)現(xiàn)FmBZR1基因的表達(dá)量整體呈現(xiàn)為先下調(diào)后上調(diào)的趨勢(shì)。在處理24 h 后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量達(dá)到上調(diào)表達(dá)峰值，最大的基因的表達(dá)量是對(duì)照組的10.13 倍，說(shuō)明FmBZR1參與響應(yīng)鹽脅迫。

已有多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，幾種激素可以誘導(dǎo)BZR1基因表達(dá)。玉米ZmBES1/BZR1基因參與了玉米ABA 信號(hào)傳導(dǎo)途徑，且在不同器官和發(fā)育階段以及對(duì)ABA 信號(hào)的響應(yīng)表現(xiàn)出很大的差異［25］。當(dāng)存在GA 時(shí)，DELLAs 降解而激活BZR1-PIF4-ARF6 模塊表達(dá)以促進(jìn)植物生長(zhǎng)［26］。MdBZR1 和MdBZR1-2like 可 以 與MdGA20ox2和MdGA3ox1的啟動(dòng)子結(jié)合并增強(qiáng)它們?cè)谔O果中的表達(dá)從而加強(qiáng)GA 的生物合成，提高蘋果的耐鹽性［27］。本研究對(duì)FmBZR1在激素信號(hào)誘導(dǎo)下的表達(dá)模式進(jìn)行了分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在ABA 處理后，處理3 h 后達(dá)到下調(diào)表達(dá)峰值，最低表達(dá)量為對(duì)照組的0.52 倍；處理12 h 后達(dá)到上調(diào)表達(dá)峰值，最高表達(dá)量為對(duì)照組的4.26 倍。在IAA 處理后，處理3 h 后達(dá)到最低表達(dá)量，為對(duì)照組的0.41 倍；處理48 h 后達(dá)到上升表達(dá)峰值，最大表達(dá)量為對(duì)照組的1.44倍。在GA3處理后，F(xiàn)mBZR1基因的表達(dá)量在不同時(shí)長(zhǎng)有顯著差異，在處理24 h 后，基因表達(dá)量顯著升高，為對(duì)照組的6.23 倍。目前很多研究表明，BRs 整合了多種激素和環(huán)境信號(hào)的輸入最終影響B(tài)R 調(diào)節(jié)基因的激活或抑制。BZR1家族成員為信號(hào)級(jí)聯(lián)的組成部分，參與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。然而，水曲柳Fm-BZR1轉(zhuǎn)錄因子的分子機(jī)制及其參與的BR 信號(hào)通路仍需進(jìn)一步研究。

本研究通過(guò)基因克隆得到了FmBZR1基因，片段大小為984 bp，編碼327個(gè)氨基酸。對(duì)水曲柳FmBZR1基因進(jìn)行初步的生物信息學(xué)預(yù)測(cè)以及不同激素誘導(dǎo)下的表達(dá)模式的分析，結(jié)合水曲柳自身材料生長(zhǎng)發(fā)育的特殊性進(jìn)行綜合驗(yàn)證，為進(jìn)一步深入研究FmBZR1基因的功能以及BR 對(duì)于水曲柳的作用奠定了基礎(chǔ)。后期工作要繼續(xù)對(duì)水曲柳過(guò)表達(dá)植株、突變體植株或雜交種植株進(jìn)行不同方面的研究，以探究FmBZR1基因所參與的信號(hào)通路對(duì)水曲柳生長(zhǎng)發(fā)育的影響，進(jìn)而為水曲柳的高效育種等提供理論支持與指導(dǎo)。