＊崔智夢 曾衛(wèi)娣 吳紹艷 劉靜 祝媛媛*

（1.湖北大學(xué)知行學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院 湖北 430011 2.新疆大學(xué) 化學(xué)學(xué)院 新疆 830046）

植物中的天然成分添加到化妝品中，因其功效好、副作用小且無過敏現(xiàn)象，這一類美容化妝品越來越受到廣大消費者的青睞。玉竹是百合科多年生草本植物，原產(chǎn)中國西南地區(qū)，野生分布很廣[1]。其中含有豐富的蛋白質(zhì)、黏液質(zhì)、山茶酚和維生素類物質(zhì)，將這些成分添加到化妝品中，可以起到抗氧化、滋潤皮膚、淡化膚色的功效[2]。因此在研制復(fù)配柔膚水的時候選擇了玉竹，將玉竹活性成分提取物與甘草和六勝肽混合，添加到美容乳制品中。為了得到六勝肽、玉竹提取物和甘草復(fù)配的最佳比例，對三者復(fù)配物進行了保濕性能和抗氧化性能的測試。這些測試數(shù)據(jù)也為護膚產(chǎn)品的研發(fā)提供了寶貴的數(shù)據(jù)。

1.儀器與試劑

(1)儀器

PE900原子吸收光譜儀，杭州瑞析科技；UV2050紫外—可見分光光度計，大連依利特分析儀器。

(2)試劑

苯乙醇、丙二醇、硫酸二乙醇、過氧化氫、氟哌啶醇、氟哌啶醇、硝酸鉀、硝酸鹽、檸檬酸。以上均為分析純，從諾伯蘭氏公司購買試劑；從珠海和順興日化購買土豆泥、淀粉、糖、香精、玉竹、麥芽、蛋白胨、六勝肽、牛肉膏等。

2.實驗部分

(1)柔膚水的配制

取玉竹、甘草8.00g，進行稱重，在90℃的水中加熱一小時，并過濾，然后在量瓶中稀釋至濃度為1.00g/l。照文獻[5]配制500.00ml成品柔膚水，配方見表1。

表1 柔膚水的配方

(2)柔膚水體外抗氧化性能的檢測

測定柔膚水對羥基自由基（·OH-）的清除能力：將1mL無水乙醇溶液和0.75mmol/l鄰菲啰啉倒入試劑杯中，并加入2ml 0.2mmol/l磷酸鹽緩沖液（pH=7.40），1ml 0.75mmol/l硫酸鐵銨溶液，1ml 0.01%質(zhì)量分數(shù)的過氧化氫，1ml蒸餾水，在40℃水浴1h，在536nm處測量對光的吸收能力，記錄為A，用1ml蒸餾水代替損壞管中1m l0.01%的過氧化氫。操作方法同上。損壞管的吸收率記錄為A。用1ml樣品溶液更換試管內(nèi)損壞試管中的1ml蒸餾水。工作方法同上。它是用A標記的樣品的吸收。當用蒸餾水測量消光度時，設(shè)置為零[3-5]。根據(jù)以下公式計算羥基自由基的接收率：。

取4.5ml 0.05mmol/l Tris-HCl緩沖液，在20℃水中加熱0.5h，加入1ml樣品溶液和0.4ml 25mmol/l苯三醇溶液，在25℃水浴中反應(yīng)5min，加1ml 8mmol/l鹽酸，在420nm處加入消光劑測量并記錄為A，用相同體積的蒸餾水和上述其他蒸餾水更換樣品溶液?？瞻讓φ战M的吸光度記為A[5]。計算超氧陰離子自由基的捕獲率如下：。

表2和表3表明，當玉竹和香木提取物質(zhì)量分數(shù)增加的時候，護膚水對超氧自由基和自由基的吸收率先增加后降低。當玉竹的濃度為0.15g/l、香木濃度為0.075g/l時，洗液對自由基的截留率為92.87%，對超氧物的截獲率為72.88%。因此，玉竹的濃度為0.15g/l，甘草的濃度為0.075g/l，此時的配比最佳。

表2 柔膚水不同配比對羥基自由基的清除率(D/%)

表3 柔膚水不同配比對對超氧陰離子自由基的清除率(P/%)

(3)保濕性檢測

將玉竹和甘草提取物、六勝肽、甘油混合，模擬皮膚的吸收效果，取9個大小相同的醫(yī)用膠帶，將各樣品均勻涂布在膠帶，準確稱量膠帶質(zhì)量，蒸餾水為對照，置于干燥器內(nèi)，硅膠為干燥劑，抽真空后開始計時，24h后測量計算保濕率[5]。

把蒸餾水作參比，當玉竹甘草最佳濃度混合提取10ml、甘油5ml和六勝肽分子為0.2g共同混合時，保濕率達89.21%，其保濕效果最佳。

(4)重金屬含量檢測

在吸附劑采集樣本后，我們用0l、20l、40l、60l、80l、100l的濃度模擬鉛標準溶液利用熱能輻射來吸收283nm共鳴線進而畫出標準曲線注入樣本，其吸收度與灌鉛的含量成正比（根據(jù)標準尺寸，吸收量與鉛含量相匹配）重復(fù)進行實驗過程，測量金屬含量試驗稱，酸性廢水中PH值為0.082mg/kg，汞含量為0.027mg/kg。

根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理總局批準頒布《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015年版）[6]規(guī)定，化妝品中鉛含量限量為10mg/kg、汞含量限量為1mg/kg，本柔膚水均符合國家標準。

(5)微生物檢測

分別準備兩種培養(yǎng)基，分別為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、土豆蔗糖天然培養(yǎng)基，將其分到100ml的三角瓶，用棉塞和報紙線將瓶口緊緊包住，在121℃環(huán)境下進行發(fā)酵，約25分鐘滅菌。分取200ul注于培養(yǎng)皿，待其自然凝固，均勻涂在培養(yǎng)皿上并做標記。其中，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基被用于細菌的培養(yǎng)和檢測，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基被用于霉菌的培養(yǎng)和檢測。接種后，將牛肉提取物蛋白放在37℃的恒溫環(huán)境里，放置12-35小時，將土豆蛋白提取物放在28℃的恒溫環(huán)境里，放置24-48小時。實驗結(jié)果表明，所有的培養(yǎng)皿都是無菌的，樣品上沒有細菌污染。

(6)穩(wěn)定性檢測

將樣品放入離心管，以2000r/min及3000r/min離心20分鐘。觀察樣本是否被分層。同時進行低溫實驗。樣品10ml塑料制造的試管中，在溫度-30℃、0℃和常溫放置24小時，觀察樣品的狀態(tài)。離心實驗的結(jié)果表明，在2000r/min和3000r/min時層間沒有剝離?？购栽囼灥慕Y(jié)果表明,在溫度-30℃、0℃，常溫下放置24小時后也外觀沒有變化。

(7)刺激性檢測

隨機選擇50個皮膚不同的測試者，取適量的護膚乳液放在手和臉部，觀察5個小時后是否發(fā)紅、腫脹或過敏。5個小時后，各受試者的手背和面部出現(xiàn)紅腫，無過敏反應(yīng)。

3.結(jié)論

本實驗成功研制了含有玉竹甘草有效成分的天然成分柔膚水，經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化且保濕活性高。研究復(fù)配柔膚水對羥基自由基和超氧陰離子自由基的吸收速率，以評價它們的抗氧化性能。結(jié)果表明，羥基自由基的捕獲率為92.87%，超氧物的自由基捕獲率為72.88%?？寡趸阅芊矫?。保濕實驗表明，玉竹的濃度為0.15g/l，甘草提取物的濃度為0.075g/l和一種濃度為10g/l的六肽復(fù)合護膚水具有抗氧化和保濕作用，其性能更好，儲水量可達89.21%。最后對產(chǎn)品的重金屬含量、穩(wěn)定性和刺激性進行了測試。實驗各項指標均符合軟皮液質(zhì)量標準和化妝品行業(yè)標準。