董景玉

新生兒宮內(nèi)感染是兒科常見病、多發(fā)病，其致病原包括細(xì)菌、病毒、螺旋體等［1］。新生兒宮內(nèi)感染是由病原微生物侵犯導(dǎo)致羊水、胎膜、胎盤感染所致，研究表明，宮內(nèi)細(xì)菌感染會(huì)導(dǎo)致胎兒腦白質(zhì)受損，而致新生兒腦白質(zhì)軟化，情況嚴(yán)重者甚至將發(fā)生死亡［2］。早期診斷對(duì)于促使臨床及早干預(yù)，降低新生兒的死亡率具有重要的價(jià)值，然而在新生兒宮內(nèi)細(xì)菌感染的診斷中，仍缺乏有效的檢測(cè)手段［3］。臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液，由于臍帶血檢測(cè)具有安全無創(chuàng)、方便的特點(diǎn)，故其在早期判斷新生兒是否存在宮內(nèi)感染的價(jià)值引發(fā)熱議［4］。目前，主要用于新生兒宮內(nèi)細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)主要有白細(xì)胞介素?6（Interleukin，IL6）以及腫瘤壞死因子?α（Tumor necrosis factorα，TNF?α）［5］。此外，研究顯示降鈣素原（procalcitonin，PCT）在機(jī)體出現(xiàn)感染后可明顯上升，因此亦可作為早期細(xì)菌感染的敏感性指標(biāo)之一［6］。本研究就臍帶血PCT、TNF?α 聯(lián)合IL?6 檢測(cè)對(duì)新生兒宮內(nèi)細(xì)菌感染的診斷價(jià)值進(jìn)行研究，旨在為新生兒宮內(nèi)細(xì)菌感染的診斷提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至12月在本院接診的有宮內(nèi)細(xì)菌感染高危因素的新生兒，最后納入符合要求的新生兒共98 例，并按照新生兒感染的結(jié)局將其分為兩組，其中感染組45 例，無感染組53 例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）見表1。

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between 2 groups［n（%），（±s）］

組別感染組無感染組t/χ2值P 值n 性別男30 33 0.205 0.650女45 53 15 20分娩方式順產(chǎn)29 32 0.171 0.679剖宮產(chǎn)16 21妊娠時(shí)間27～37 周15 10 2.680 0.102 38～42 周30 43體重（kg）3.21±0.51 3.15±0.53 0.568 0.571母親年齡（歲）31.20±1.74 31.15±1.71 0.143 0.887

納入標(biāo)準(zhǔn)：①有新生兒宮內(nèi)感染高危因素之一［7］：胎膜早破18小時(shí)；羊水Ⅲ度糞污染或者有臭味；胎兒宮內(nèi)窘迫；新生兒在出生時(shí)有過窒息情況發(fā)生；母親在妊娠晚期出現(xiàn)發(fā)熱或者血CRP、WBC等升高。②孕婦及家屬知情同意，并簽署知情同意書；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有重大內(nèi)科疾病史的孕婦分娩的新生兒；②合并有生殖道畸形的孕婦娩出的新生兒。

1.2 研究方法

收集所有研究對(duì)象臨床資料，比較感染組和無感染組臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 表達(dá)水平差異，分別對(duì)比PCT、TNF?α、IL?6 單獨(dú)及聯(lián)合用于診斷宮內(nèi)細(xì)菌感染的臨床診斷性能（靈敏度、特異性及準(zhǔn)確度）；采用ROC 曲線分析PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)水平對(duì)宮內(nèi)細(xì)菌感染的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］：血培養(yǎng)為陽性，臨床表現(xiàn)為皮膚發(fā)灰、呼吸暫停、呼吸＞60 次/min、呼吸功能不全、血壓降低、嗜睡、心動(dòng)過緩或過速、肌張力減低，出生2 d 內(nèi)CRP＞10 mg/L。

1.4 檢測(cè)方法

在新生兒娩出后的10 min 內(nèi)，收集兩組的臍帶血，離心（3 500 r/min，5 min，離心半徑8 cm）后取分離血清。分離出血清后置于羅氏E411 全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀中檢測(cè)PCT 水平。通過酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme Linked Immune Sorbent Assay，ELISA）測(cè)定兩組的臍帶血TNF?α、IL?6 濃度，北京貝瑞恩科技有限公司提供試劑并進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)ELISA試劑盒說明書步驟操作。臍帶血PCT≥0.5 ng/mL計(jì)為陽性結(jié)果，IL?6＞23 ng/L計(jì)為陽性結(jié)果，TNF?α＞4.3 ng/mL 計(jì)為陽性；三個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)判斷陽性結(jié)果時(shí)其中一個(gè)出現(xiàn)陽性結(jié)果則計(jì)為陽性［9?10］。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用（）描述，行t檢驗(yàn)；采用ROC 曲線分析PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)水平對(duì)宮內(nèi)細(xì)菌感染的預(yù)測(cè)價(jià)值。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 水平

無感染組PCT、TNF?α、IL?6 水平均低于感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 水平比較（±s）Table 2 Comparison of PCT，TNF?α and IL?6 levels in cord blood between 2 groups（±s）

表2 兩組臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 水平比較（±s）Table 2 Comparison of PCT，TNF?α and IL?6 levels in cord blood between 2 groups（±s）

組別感染組無感染組t 值P 值n 45 53--PCT（ng/mL）2.94±1.03 0.41±0.15 17.679＜0.001 TNF?α（ng/mL）5.97±2.11 2.73±1.05 9.842＜0.001 IL?6（ng/L）32.43±11.51 17.41±7.02 7.925＜0.001

2.2 兩組臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 陽性率

無感染組PCT、TNF?α、IL?6 陽性率均低于感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

2.3 PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)水平對(duì)宮內(nèi)細(xì)菌感染的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 曲線顯示，PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)曲線下面積AUC 分別為0.807、0.701、0.817、0.908，各指標(biāo)曲線下面積以聯(lián)合檢測(cè)最大。見表4、圖1。

表3 兩組臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 陽性率比較［n（%）］Table 3 Comparison of the positive rates of PCT，TNF?α and IL?6 in cord blood between 2 groups［n（%）］

表4 PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)水平對(duì)宮內(nèi)細(xì)菌感染的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 Predictive value of PCT，tnf?α，IL?6 single and combined detection levels on intrauterine bacterial infection

圖1 臍帶血PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)水平對(duì)宮內(nèi)細(xì)菌感染的預(yù)測(cè)價(jià)值ROC 曲線圖Figure 1 ROC curve analysis of the predictive value of single and combined detection levels of PCT，TNF?α and IL?6 in cord blood for intrauterine bacterial infection

3 討論

細(xì)菌感染是新生兒宮內(nèi)感染的常見類型，主要途徑為陰道上行感染，可引起早產(chǎn)、肺炎、肺出血、呼吸窘迫綜合征、敗血癥等［11］。該癥病情進(jìn)展迅速，嚴(yán)重者預(yù)后不良，故早期診斷新生兒宮內(nèi)感染，不僅可以減少臨床上抗生素的濫用，還能及時(shí)緩解新生兒病情，是決定治療預(yù)后的關(guān)鍵［12］。隨著醫(yī)療診斷技術(shù)的發(fā)展，新生兒宮內(nèi)感染診斷手段趨于成熟，目前羊水或臍血細(xì)菌培養(yǎng)為本癥診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但由于羊水采集及羊水中細(xì)胞因子的濃度判斷的困難，且很多細(xì)胞因子半衰期短，檢測(cè)過程和程序較為復(fù)雜，也不易作為臨床常用的早期判斷指標(biāo)。故本研究對(duì)有宮內(nèi)細(xì)菌感染高危因素的新生兒臍帶血中炎癥反應(yīng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，以期早期發(fā)現(xiàn)胎兒在宮內(nèi)感染情況，減少病死率和疾病的發(fā)生率，提高其生存質(zhì)量［13］。

PCT 是一種糖蛋白，主要由甲狀腺C 細(xì)胞分泌。PCT 在正常機(jī)體內(nèi)含量極低，當(dāng)機(jī)體感染時(shí)，其在IL?6 等細(xì)胞因子刺激下，可在肺、腎、肝臟及肌肉等多種器官實(shí)質(zhì)細(xì)胞中大量釋放，參與炎癥反應(yīng)［14］。本研究結(jié)果與上述研究一致，提示PCT在新生兒宮內(nèi)細(xì)菌感染患兒血清中高表達(dá)。

白細(xì)胞介素（Interleukin，IL）是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子，與血細(xì)胞生長因子同屬于細(xì)胞因子IL?6 是IL 家族重要成員，主要由單核巨噬細(xì)胞、Th2 細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞產(chǎn)生。本研究顯示，感染相關(guān)的臍帶血中IL?6 均有顯著增高，這與Alemkere 等［15］研究一致，這也證實(shí)了臍帶血中IL?6 的升高比臍帶血細(xì)菌培養(yǎng)更能預(yù)示宮內(nèi)感染的發(fā)生這一結(jié)論。

TNF?α 是一種產(chǎn)生的具有廣泛生物學(xué)活性的多肽調(diào)節(jié)因子，由單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、B 細(xì)胞、CD4+T 細(xì)胞等產(chǎn)生，可被多種刺激物誘導(dǎo)發(fā)生。既往研究顯示，TNF?α 作用與其在組織中的濃度有關(guān)，低水平時(shí)在組織修復(fù)、炎癥應(yīng)答中起作用，對(duì)機(jī)體有利；而當(dāng)TNF?α 大量釋放可以引起組織免疫損傷［16］。本研究結(jié)果提示TNF?α 的升高是判定胎兒在宮內(nèi)發(fā)生炎癥反應(yīng)有顯著意義的細(xì)胞因子。

為進(jìn)一步分析PCT、TNF?α、IL?6 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)水平對(duì)宮內(nèi)細(xì)菌感染的預(yù)測(cè)價(jià)值，本研究利用ROC 曲線進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，PCT+TNF?α+IL?6 的曲線下面積、敏感性、特異性最高，與Wilson 等［17］研究基本一致，說明三者聯(lián)合檢測(cè)較單一指標(biāo)檢測(cè)診斷價(jià)值更高。

綜上所述，臍帶血PCT、TNF?α 及IL?6 檢測(cè)表達(dá)在發(fā)生宮內(nèi)細(xì)菌感染的新生兒中顯著升高，聯(lián)合三者檢測(cè)可作為預(yù)測(cè)宮內(nèi)細(xì)菌感染發(fā)生的有效手段，臨床上應(yīng)檢測(cè)其水平并及時(shí)進(jìn)行干預(yù)，進(jìn)而提高診出率。但本研究樣本量較少，同時(shí)圍生期干擾因素較多，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量證實(shí)PCT、TNF?α 聯(lián)合IL?6 對(duì)新生兒宮內(nèi)細(xì)菌感染早期診斷價(jià)值。