周俊虎，康春生

（天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院 天津神經(jīng)病學(xué)研究所，天津 300052）

膠質(zhì)瘤是最常見的顱內(nèi)原發(fā)性腫瘤，約占腦部腫瘤的70%以上，而膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是最常見且惡性程度最高的膠質(zhì)瘤，發(fā)病率約為3.2/100 000，術(shù)后中位生存期1 ～ 2年[1]。近年來針對(duì)膠質(zhì)瘤的治療雖取得較大進(jìn)展，但膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的預(yù)后仍較差，亟需依據(jù)其分子特征進(jìn)行分子亞型分類，為分子靶向治療提供新方向。越來越多的研究表明，表觀遺傳調(diào)控因子的改變是膠質(zhì)瘤發(fā)生的重要驅(qū)動(dòng)因素，并且表觀遺傳調(diào)控因子的改變也常用于特定膠質(zhì)瘤亞型的分子分型[2-3]。表觀遺傳學(xué)最早提出是用來描述在細(xì)胞中產(chǎn)生不依賴于DNA序列改變的可遺傳變化，其調(diào)控主要包括DNA甲基化、組蛋白修飾、非編碼RNA和染色體重塑等，由于表觀遺傳學(xué)變化是可逆的，其可通過小分子化學(xué)藥物調(diào)控，因此靶向表觀遺傳調(diào)控因子的小分子抑制劑在膠質(zhì)瘤的治療中具有廣泛的應(yīng)用前景。本研究主要對(duì)靶向表觀遺傳調(diào)控因子的小分子抑制劑在膠質(zhì)瘤治療中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 膠質(zhì)瘤中DNA甲基化修飾的表觀遺傳藥物

DNA甲基化是最早被發(fā)現(xiàn)且研究得最深入的表觀遺傳修飾，也是細(xì)胞增殖過程中最可靠的表觀遺傳信息傳遞方式之一[4]。DNA甲基化改變也是最常見的腫瘤表觀遺傳學(xué)改變，尤其是胞嘧啶-磷酸-鳥嘌呤（CpG）位點(diǎn)第5位胞嘧啶的甲基化，即5-甲基胞嘧啶。參與DNA甲基化與去甲基化的酶類有多種，研究的較為深入的有DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferase，DNMT）1、DNMT3A、DNMT3B，以及DNA去甲基化酶類DNA雙加氧酶TET（ten-eleven translocation）蛋白家族Tet1、Tet2、Tet3[5-6]。大量研究表明，膠質(zhì)瘤細(xì)胞的DNA甲基化模式不同于正常細(xì)胞，且膠質(zhì)瘤細(xì)胞相關(guān)基因的甲基化狀態(tài)也是膠質(zhì)瘤臨床診斷的標(biāo)志物[7-8]，研究的最為清楚的是O6-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移 酶 6（O6-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT）啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)，MGMT基因啟動(dòng)子甲基化患者在接受聯(lián)合替莫唑胺（temozolomide，TMZ）和放療的中位生存期為21.7個(gè)月，而僅接受放療的患者中位生存期為15.3個(gè)月，在MGMT基因啟動(dòng)子未甲基化的情況下，治療組之間的存活率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明MGMT基因啟動(dòng)子甲基化后應(yīng)用TMZ藥物聯(lián)合放療將提高患者生存期，MGMT基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)可作為膠質(zhì)瘤臨床診斷和預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物[9-10]，因此，靶向DNA甲基化修飾相關(guān)酶類的小分子抑制劑成為膠質(zhì)瘤治療研究的熱點(diǎn)。

目前，靶向DNA甲基化修飾相關(guān)酶類的小分子抑制劑大多仍處于體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究階段，進(jìn)入臨床研究的DNA甲基化修飾相關(guān)酶類的小分子抑制劑主要為DNMT抑制劑（見表1）。靶向DNMT1的小分子抑制劑可特異地降低DNA甲基化并激活抑癌基因，目前研究的比較清楚的靶向DNMT1的小分子抑制劑有阿扎胞苷和地西他濱，它們都屬于DNMT抑制劑，是一種胞苷核苷類似物，可與正在復(fù)制的DNA鏈結(jié)合，從而共價(jià)捕獲DNMT并使其降解[11]。阿扎胞苷和地西他濱在骨髓增生異常綜合征、髓母細(xì)胞瘤和急性髓系白血病的治療中已取得良好的效果[12-13]。臨床前研究也顯示，阿扎胞苷和地西他濱在異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）突變的膠質(zhì)瘤中均具有抑瘤效果[14-15]。雖然阿扎胞苷和地西他濱已被美國食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)用于治療多種血液系統(tǒng)腫瘤，但這些年針對(duì)膠質(zhì)瘤患者治療的臨床試驗(yàn)并未成功，可能與此類抑制劑的半衰期短及藥物遞送的時(shí)間長(zhǎng)、劑量大有關(guān)[16]。因此，優(yōu)化DNMT抑制劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)是關(guān)鍵，地西他濱的前體化合物SGI-110便具有不易被分解和去甲基能力強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，已在急性髓系白血病的Ⅲ期臨床試驗(yàn)中取得較好效果[17]。近年來的研究也顯示，DNMT抑制劑和組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases，HDACs）抑制劑的聯(lián)合用藥可增強(qiáng)DNMT抑制劑降低DNA甲基化和激活基因表達(dá)的效應(yīng)[13,18]。近年來已開展多項(xiàng)DNMT抑制劑和其他藥物或療法聯(lián)合應(yīng)用的臨床研究，目前均處在臨床研究階段，其結(jié)果均尚未可知，但由于DNMT抑制劑可普遍性地降低膠質(zhì)瘤細(xì)胞的甲基化水平，其對(duì)于治療的意義仍存在爭(zhēng)議，如其可能會(huì)導(dǎo)致膠質(zhì)瘤原癌基因的激活和（或）MGMT基因去甲基化導(dǎo)致對(duì)烷基化合物的抵抗。

表1 膠質(zhì)瘤DNA甲基化修飾表觀遺傳藥物臨床試驗(yàn)研究進(jìn)展（截至2021年9月3日）Table 1 Development progress of epigenetic drugs in DNA methylation for the treatment of glioma （as of September 3, 2021）

2 膠質(zhì)瘤中組蛋白修飾的表觀遺傳藥物

組蛋白是真核生物染色質(zhì)的核心蛋白成分，其八聚體與DNA纏繞形成核小體。組蛋白的可逆性翻譯后修飾是表觀遺傳學(xué)研究的重點(diǎn)[19]。組蛋白翻譯后修飾可作為分子開關(guān)來調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄活性，H3組蛋白N末端特定氨基酸殘基的翻譯后修飾包括乙?；?、甲基化、磷酸化、泛素化和類泛素蛋白修飾分子（small ubiquitin-like modifier，SUMO）化等，而在膠質(zhì)瘤中這些組蛋白翻譯后修飾常表現(xiàn)為異常狀態(tài)[2,20]，這主要與翻譯后修飾相關(guān)酶類活性和組蛋白氨基酸殘基修飾位點(diǎn)的突變有關(guān)[21]。因此，可利用翻譯后修飾相關(guān)酶類的抑制劑來改變酶活性以達(dá)到逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤組蛋白翻譯后修飾水平的變化。

2.1 組蛋白乙?；{(diào)控因子抑制劑

組蛋白的賴氨酸位點(diǎn)乙?；沟肈NA與組蛋白的結(jié)合作用力降低、染色質(zhì)空間變得開放，從而利于基因轉(zhuǎn)錄。組蛋白乙?；揎椫饕芙M蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（histone acetyltransferases，HATs）家族和組蛋白去乙?；福╤istone deacetylases，HDACs）家族調(diào)控，組蛋白乙?；罂商禺愋阅技褰Y(jié)構(gòu)域和超末端結(jié)構(gòu)域（bromodomain and extra terminal domain，BET）家族蛋白。BET家族蛋白包含溴區(qū)結(jié)構(gòu)域（bromodomain，BRD）2、BRD3、BRD4和BRDT，可特異性識(shí)別組蛋白的乙?；嚢彼幔龠M(jìn)其溴結(jié)構(gòu)域與乙?；娜旧|(zhì)結(jié)合，從而使轉(zhuǎn)錄起始相關(guān)因子募集到基因的啟動(dòng)子區(qū)，進(jìn)而激活原癌基因轉(zhuǎn)錄[22]。相反，HDACs則介導(dǎo)組蛋白的去乙酰化，使得染色質(zhì)緊縮、基因表達(dá)沉默。大量的研究已證實(shí)，HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC5和HDAC9在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)異常[23-24]，并且H3組蛋白的乙?；皆诟呒?jí)別膠質(zhì)瘤中顯著增加[23,25]。靶向組蛋白乙?；{(diào)控因子的抑制劑研究的較為清楚的是BET抑制劑和HDAC抑制劑。目前，處于治療膠質(zhì)瘤臨床階段的BET抑制劑和HDAC抑制劑見表2。

表2 膠質(zhì)瘤組蛋白修飾的表觀遺傳藥物臨床試驗(yàn)研究進(jìn)展（截至2021年9月3日）Table 2 Development progress of epigenetic drugs in histone modification for the treatment of glioma （as of September 3, 2021）

續(xù)表2

BET抑制劑可競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合溴結(jié)構(gòu)域，阻礙BET家族成員蛋白激活已乙?；娜旧|(zhì)，從而抑制原癌基因轉(zhuǎn)錄[26]。BET抑制劑JQ1、I-BET762和OTX015等在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤原位荷瘤模型中具有抑瘤作用。研究表明，BET抑制劑JQ1可抑制具有H3K27（組蛋白H3賴氨酸27位點(diǎn)）甲基化突變的膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖，降低H3K27的乙酰化水平，并可抑制移植腫瘤體積增大和延長(zhǎng)膠質(zhì)瘤動(dòng)物的生存期[27]。IDH突變的原發(fā)性膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)BET抑制劑JQ1和GS-626510極為敏感，其藥物劑量是TMZ的約1/1 000，但一項(xiàng)針對(duì)BET抑制劑OTX015在復(fù)發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者治療效果的Ⅱ期臨床試驗(yàn)顯示，其缺乏有效性而試驗(yàn)被終止（見表2）[28-31]。Zhang等[32]研究發(fā)現(xiàn)，BET抑制劑JQ1和果蠅Zeste基因增強(qiáng)子同源物 2（enhancer of Zeste homolog2，EZH2）抑制劑EPZ6438的聯(lián)合用藥在體內(nèi)外均有協(xié)同抑瘤作用，且聯(lián)合用藥相對(duì)單獨(dú)用藥效果更佳[32]，提示未來臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)中可考慮多種表觀遺傳藥物的聯(lián)合使用。

HDAC抑制劑治療腫瘤的基本原理是通過調(diào)節(jié)組蛋白的乙?；孓D(zhuǎn)相關(guān)基因的表達(dá)，以達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)其凋亡的目的。研究表明，HDAC抑制劑可阻止膠質(zhì)瘤原癌基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期和凋亡，也可通過降解熱休克蛋白來抑制膠質(zhì)瘤血管生成以降低膠質(zhì)瘤惡性進(jìn)展[33-34]。近年來，HDAC抑制劑新藥研發(fā)層出不窮，其單獨(dú)使用或聯(lián)合其他藥物的Ⅰ期、Ⅱ期或Ⅲ期臨床試驗(yàn)已在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤治療中取得臨床應(yīng)用（見表2），如伏立諾他（vorinostat，SAHA）、帕比司他（panobinostat）和恩替諾特（entinostat）等[35-36]。近期開發(fā)的藥物伏立諾他的一項(xiàng)Ⅰ期臨床試驗(yàn)表明，其和TMZ的聯(lián)合用藥在治療復(fù)發(fā)難治性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中取得了一定療效[37]。伏立諾他治療復(fù)發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤也已進(jìn)入Ⅱ期臨床試驗(yàn)，在伏立諾他治療后，H2B、H3和H4組蛋白的乙?；斤@著增加，且伏立諾他調(diào)控基因的表達(dá)也顯著改變[38]。然而，在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤治療中伏立諾他和蛋白酶抑制劑硼替佐米（bortezomib）的聯(lián)合用藥以及聯(lián)合放化療的Ⅰ期和Ⅱ期臨床試驗(yàn)并未取得預(yù)期結(jié)果[39-40]。HDAC抑制劑帕比司他被證實(shí)可通過增加H3K27乙?；揭砸种颇z質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖水平和移植腫瘤體積，并延長(zhǎng)小鼠生存期[41-42]，但一項(xiàng)帕比司他在間變型膠質(zhì)瘤和復(fù)發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的Ⅱ期臨床試驗(yàn)卻表明，帕比司他聯(lián)合貝伐單抗卻并未取得理想的治療效果[43]。近年來已開展多項(xiàng)HDAC抑制劑聯(lián)合其他藥物或療法的臨床研究，目前均尚未有結(jié)果。

2.2 組蛋白甲基化調(diào)控因子抑制劑

H3組蛋白不同的賴氨酸和精氨酸位點(diǎn)甲基化作用不同，常見的H3K4和H3K36甲基化與染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄激活有關(guān)，H3K9和H3K27甲基化則與染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄抑制有關(guān)。組蛋白甲基化修飾主要受組蛋白甲 基 轉(zhuǎn) 移 酶（histone methyltransferases，HMTs）如EZH2、G9a、MLL1和MLL2以及去甲基化酶KDM6亞家族調(diào)控，并且蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5（PRMT5）基因也可用于膠質(zhì)瘤的診斷，其表達(dá)情況與膠質(zhì)瘤的預(yù)后密切相關(guān)[44]。近年來研究表明，抑制HMT功能可抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡，甲基轉(zhuǎn)移酶EZH2在膠質(zhì)瘤中異常高表達(dá)，與膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和侵襲等密切相關(guān)，G9a也參與膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展，PRMT5抑制劑可敲低PRMT5基因，上述甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑均具有抑瘤效果[45-46]，提示靶向組蛋白甲基化調(diào)控因子的抑制劑在膠質(zhì)瘤治療中具有較大的應(yīng)用價(jià)值。

EZH2抑制劑可通過特異性抑制多梳抑制復(fù)合物 2（polycomb repressive complex 2，PRC2）成分EZH2，抑制H3K27的甲基化，促進(jìn)抑癌基因的轉(zhuǎn)錄，從而抑制膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展。3-deazaneplanocin A（DZNep）是首個(gè)被報(bào)道的EZH2抑制劑，但由于DZNep在血漿半衰期短，對(duì)組蛋白甲基化無特異性抑制及在動(dòng)物模型中毒性偏大的缺點(diǎn)[47]，還需進(jìn)一步優(yōu)化研究。EZH2為PRC2復(fù)合體的核心催化酶。筆者課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA（HOX transcript antisense RNA，HOTAIR）-PRC2抑制劑AC1Q3QWB能夠干擾EZH2作用，其與低劑量DZNep的聯(lián)合應(yīng)用可增強(qiáng)DZNep的抑瘤作用，為進(jìn)一步優(yōu)化DZNep聯(lián)合用藥方案提供了依據(jù)[48]。另外，為了提高藥物抗腫瘤活性和降低毒性，利用高通量生化法可篩選出基于保守集域結(jié)構(gòu)的S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosyl methionine，SAM）-競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑EPZ6438和GSK343，有特異性高和藥物毒性低的特點(diǎn)[49]。這些EZH2抑制劑具有不同藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，大多處在臨床前研究階段。針對(duì)EZH2抑制劑tazemetostat（EPZ6438）的研究結(jié)果并不一致。一項(xiàng)研究表明在兒童膠質(zhì)瘤細(xì)胞中tazemetostat的活性較低[50]，而在其他研究中tazemetostat和GSK343可抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖，降低H3K27的甲基化水平[51-52]。2017年已開展2項(xiàng)針對(duì)tazemetostat（EPZ6438）抑制劑對(duì)膠質(zhì)瘤治療的臨床研究，目前均處在臨床研究階段，其作用效果仍尚未可知。

3 膠質(zhì)瘤中非編碼RNA的表觀遺傳藥物

非 編 碼 RNA（non-coding RNA，ncRNA） 是一類參與基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控和作為調(diào)節(jié)性RNA的非編碼蛋白R(shí)NA，包括微小RNAs（microRNAs，miRNAs）、 長(zhǎng) 鏈 非 編 碼 RNAs（long non-coding RNAs，lncRNAs）、PIWI相 互 作 用 RNAs（piwiinteracting RNAs，piRNAs） 和 環(huán) 狀 RNAs（circular RNAs，cirRNAs）等[53]。大量研究表明，ncRNAs在膠質(zhì)瘤中表達(dá)異常，進(jìn)而影響相關(guān)基因表達(dá)[54-56]，靶向ncRNAs成為膠質(zhì)瘤治療研究的熱點(diǎn)。目前，靶向ncRNAs的小分子藥物仍處于臨床前研究階段，進(jìn)入臨床研究的ncRNAs的小分子藥物還尚未有報(bào)道。本部分綜述了目前處于臨床前研究階段ncRNAs的小分子藥物在膠質(zhì)瘤治療中的研發(fā)進(jìn)展（見表3）。

表3 膠質(zhì)瘤非編碼RNA表觀遺傳藥物的臨床前研究進(jìn)展（體內(nèi)研究）Table 3 Development progress of non-coding RNAs in the treatment of glioma （in vivo）

續(xù)表3

3.1 微小RNA寡核苷酸和抑制劑

miRNA是一類長(zhǎng)約17 ～ 25個(gè)核苷酸的小分子非編碼RNA，可與60%以上哺乳動(dòng)物的信使RNA特異性結(jié)合，在眾多的生物過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用[69]。大量研究表明，miRNA在膠質(zhì)瘤中表達(dá)異常，參與膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的多個(gè)過程，已有包 括 miR-181d[70]、miR-566[56]、miR-221/222[71]、miR-21[60]、miR-29[72]等大量的miRNAs被發(fā)現(xiàn)可用于膠質(zhì)瘤的診斷或預(yù)后評(píng)判。基于miRNA的腫瘤治療策略主要為補(bǔ)充抑瘤性miRNA和抑制促瘤性miRNA，其主要通過特異性靶向miRNA調(diào)控的多個(gè)基因網(wǎng)絡(luò)和生物合成過程的特定步驟而實(shí)現(xiàn)，具有特異性強(qiáng)、毒性小等特點(diǎn)。在淋巴瘤、多形性骨髓瘤、肺癌等部分腫瘤中基于miRNA的治療策略已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段[73]。然而，膠質(zhì)瘤中基于miRNA的治療策略尚未有臨床研究，可見有部分臨床前研究（見表3）。

基于miRNA治療的主要目的是通過相應(yīng)治療方法使細(xì)胞內(nèi)miRNA水平接近正常組織細(xì)胞內(nèi)的水平，其治療方法大致有3種：化學(xué)修飾的寡核苷酸、載體介導(dǎo)的miRNA表達(dá)和小分子藥物。利用miRNA在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的抑瘤和促瘤特性，合成化學(xué)修飾的miRNA 模擬物和反義寡核苷酸，通過模擬和競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合成熟miRNA來達(dá)到補(bǔ)充和抑制miRNA水平的目的。研究表明，反義寡核苷酸可下調(diào)miRNA表達(dá)水平，抑制膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展，并提高了TMZ和尼妥珠單克隆抗體的膠質(zhì)瘤治療敏感性[74]。載體介導(dǎo)的miRNA表達(dá)也是通過病毒或納米載體介導(dǎo)方式，補(bǔ)充或抑制miRNA的表達(dá)水平，抑制膠質(zhì)瘤的發(fā)生和發(fā)展[75-76]。近年來，小分子化合物在治療惡性腫瘤方面取得了巨大的成功，小分子化合物通過干擾miRNA的生物合成以達(dá)到其潛在的治療價(jià)值。筆者課題組應(yīng)用計(jì)算機(jī)模擬輔助藥物模擬出Dicer酶對(duì)miR-21前體發(fā)夾結(jié)構(gòu)的切割部位，通過高通量篩選小分子數(shù)據(jù)庫，獲得了一種具有藥用潛能的miR-21小分子抑制劑AC1MMYR2；AC1MMYR2可通過上調(diào)miR-21功能靶點(diǎn)PTEN、PDCD4和RECK的表達(dá)，從而抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖侵襲能力，誘導(dǎo)其凋亡；AC1MMYR2在小鼠原位腫瘤模型中也可抑制腫瘤的發(fā)生和侵襲，并顯示出對(duì)宿主器官（包括肝臟和腎臟）可耐受的細(xì)胞毒性[60]。目前，雖然基于miRNA的治療策略在其他疾病如肝癌[77-78]、間皮細(xì)胞瘤[79]等中已進(jìn)入臨床試驗(yàn)，但對(duì)于膠質(zhì)瘤的miRNA治療策略仍處于臨床前的實(shí)驗(yàn)研究階段。

3.2 長(zhǎng)鏈非編碼RNA過表達(dá)和抑制劑

lncRNA是一類長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸的RNA分子，通過與特定蛋白質(zhì)和RNA結(jié)合來調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄活性，參與細(xì)胞內(nèi)多種生物學(xué)過程的調(diào)控，可在染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平參與基因的表達(dá)調(diào)控，從而調(diào)控腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。已有研究表明，HOTAIR、HERC2P2和Lnc-TALC等多個(gè)lncRNA在膠質(zhì)瘤中表達(dá)異常，提示其在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用[54,80-81]。

目前，HOTAIR是在膠質(zhì)瘤中研究得最為深入的lncRNA之一，其在膠質(zhì)瘤中表達(dá)異常增加且與患者預(yù)后關(guān)系密切[54]。膠質(zhì)瘤患者的血清HOTAIR表達(dá)水平增加，提示膠質(zhì)瘤級(jí)別較高和患者預(yù)后不良[82]。研究表明，HOTAIR可與PRC2成員EZH2結(jié)合并募集PRC2 復(fù)合物入核，使組蛋白H3K27三甲基化，抑制相關(guān)基因的表達(dá)[54]，這也為靶向HOTAIR或阻斷HOTAIR對(duì)PRC2復(fù)合物募集功能的小分子化合物研發(fā)和應(yīng)用奠定了研究基礎(chǔ)。筆者課題組通過對(duì)靶向HOTAIR小分子抑制劑的篩選發(fā)現(xiàn)，AC1NOD4Q可靶向HOTAIR 5'功能結(jié)構(gòu)域，并有效抑制HOTAIR-PRC2復(fù)合物的形成，進(jìn)而抑制PRC2復(fù)合物入核和H3K27三甲基化的修飾[83]。后續(xù)又篩查出可特異性阻斷HOTAIR-PRC2結(jié)合的小分子抑制劑AC1Q3QWB，其可特異性抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞HOTAIR對(duì)PRC2的募集入核，并在膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型中確定AC1Q3QWB在低劑量下可顯著增強(qiáng)EZH2抑制劑的抑瘤效果[48]。最新的一項(xiàng)研究表明，HOTAIR調(diào)控元件的缺失可增加膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ的敏感性，并改變多個(gè)基因轉(zhuǎn)錄水平，提示其在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ耐藥中發(fā)揮重要作用[84]。另一項(xiàng)研究也表明，SNHG12異常高表達(dá)與接受TMZ治療的膠質(zhì)瘤患者生存期差密切相關(guān)，SNHG12在TMZ耐藥細(xì)胞和組織中表達(dá)上調(diào)，過表達(dá)SNHG12可增加對(duì)TMZ的耐藥，敲低SNHG12則恢復(fù)了對(duì)TMZ的敏感性[64]。

4 結(jié)語與展望

近年來研究表明，表觀遺傳修飾改變與膠質(zhì)瘤的增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲和預(yù)后關(guān)系密切，多種表觀遺傳修飾相互作用，從而參與膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展。靶向表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)因子的小分子抑制劑在很多臨床前研究及部分臨床試驗(yàn)階段具有良好的治療效果，但針對(duì)膠質(zhì)瘤治療的表觀遺傳藥物大多處于臨床前研究階段，需要進(jìn)一步驗(yàn)證這些表觀遺傳學(xué)小分子抑制劑在膠質(zhì)瘤臨床治療中的可行性及可行方法。目前，由于單藥臨床應(yīng)用的局限性和膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性，表觀遺傳藥物在膠質(zhì)瘤臨床治療中的應(yīng)用仍然有限，表觀遺傳藥物與其他藥物或其他治療方法聯(lián)合使用可能是未來治療膠質(zhì)瘤的方向。