曠 娜 周 蔚 張 相 鄭華斌 唐啟源

(湖南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院，長沙 410128)

稻米的蒸煮食味品質(zhì)是決定其市場接受度和價格的重要因素[1]。蒸煮品質(zhì)通常用直鏈淀粉含量、膠稠度和糊化溫度(常以堿消值代替)等指標來衡量。淀粉占米粒干重的90%左右，其結(jié)構(gòu)和特性直接影響稻米的蒸煮食味品質(zhì)[2]。淀粉顆粒內(nèi)部是由結(jié)晶層與無定形層交替而形成的層狀結(jié)構(gòu)，在糊化升溫過程中，晶體結(jié)構(gòu)將被熔解，無定型區(qū)域的結(jié)構(gòu)較松散，容易被破壞，而結(jié)晶區(qū)由于其晶體結(jié)構(gòu)較緊密而使其糊化所需晶體熔解能較大，糊化溫度也較高[3,4]。研究表明結(jié)晶度與糊化溫度呈顯著正相關，與直鏈淀粉含量呈顯著負相關[3,5]。另一方面，淀粉的晶體特性、晶體結(jié)構(gòu)對淀粉糊化的回生性有影響[6,7]。此外，稻米淀粉RVA 譜特征值(特別是崩解值、消減值、回復值等)與稻米蒸煮品質(zhì)及食味品質(zhì)有密切關系[8]。

再生稻是頭季水稻收割后，利用稻樁重新發(fā)苗、長穗，再收一季的一種兩收水稻種植模式。與頭季相比，再生季水稻的生長環(huán)境有利于米質(zhì)的形成[1,9]。Alizadeh等[10]報道再生季稻米外觀品質(zhì)、食味品質(zhì)明顯優(yōu)于頭季。相關研究指出再生稻頭季和再生季稻米的直鏈淀粉含量存在顯著差異[11,12]。

不同品種的稻米品質(zhì)、淀粉的形態(tài)特征、糊化特性和晶體特性已有相關研究，然而再生季稻米蒸煮食味品質(zhì)、米粉的糊化特性及晶體結(jié)構(gòu)之間的相互關系卻鮮見報道。本實驗研究不同品種再生季稻米蒸煮食味品質(zhì)和淀粉及其特性的關系，以期進一步揭示再生稻再生季稻米品質(zhì)的形成基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

4個高產(chǎn)雜交秈稻：隆兩優(yōu)1307、和兩優(yōu)1號、隆兩優(yōu)1308、創(chuàng)兩優(yōu)豐占及4個優(yōu)質(zhì)雜交秈稻：晶兩優(yōu)1468、畾優(yōu)1068、鑫隆優(yōu)3號、泰優(yōu)390。各品種直鏈淀粉含量處于15.2%～17.4%之間，均屬于低直鏈淀粉含量品種[13]。種植地點為湖南農(nóng)業(yè)大學衡陽實驗基地，各品種均收取再生季成熟籽粒。

1.2 方法

1.2.1 蒸煮食味品質(zhì)測定

收取待測品種再生季成熟籽粒，風曬至水分約為14%。按NY/T 83—2017《米質(zhì)測定方法》測定[14]。直鏈淀粉含量測定采用碘藍比色法，制作直鏈淀粉標準曲線，然后根據(jù)吸光度和標準曲線確定待測樣品的含量。膠稠度測定用米膠延伸法，即測定米膠在冷卻時的粘稠度。糊化溫度測定采用堿消值法，即以整粒精米在堿溶液中的崩解度為主進行分級。

1.2.2 淀粉提取

取適量精米4 ℃下超純水浸泡過夜，充分研磨，4層紗布過濾，所得溶液分別過200目，400目篩，濾液3 000 g離心20 min，棄上清液，加4倍體積0.4%的NaOH溶液，室溫下振蕩4 h(THZ-320臺式恒溫振蕩器)。3 000 g離心20 min，棄上清液，加超純水充分懸浮后，3 000 g離心20 min，棄上清，重復一次，加超純水懸浮，用1 mol/L的鹽酸溶液調(diào)pH到7，3 000 g離心20 min，棄上清，過400 目篩，取濾液3 000 g離心20 min，棄上清，懸浮離心重復，直至上清液清澈，無水乙醇懸浮，離心洗滌兩次，得到沉淀40 ℃干燥48小時，研磨，過100目篩，淀粉備用。

1.2.3 糊化特性分析

用RVA-Super 4快速黏度分析儀測定大米淀粉的糊化特性。淀粉樣品(3.00 g，13%含水量)與25 g蒸餾水在鋁罐中混合。采用程序升溫降溫循環(huán)，50 ℃保溫1 min，4.8 min升溫至95 ℃，95 ℃保溫2.5 min。然后，將樣品在3.8 min內(nèi)冷卻至50 ℃，并在該溫度下保持1.4 min。螺旋槳的轉(zhuǎn)速在前10 s為960 r/min，然后保持160 r/min直到實驗結(jié)束。記錄峰值黏度、最低黏度、最終黏度及其崩解值、消減值、糊化溫度和峰值時間。

1.2.4 淀粉結(jié)晶度測定

用XRD-6100 X射線衍射儀測定淀粉在40 kV和30 mA-Cu-Kα輻射下的結(jié)晶度。掃描范圍為5°～40°(2θ)，掃描速度為2°/min。結(jié)晶度測量為每個樣品的尖銳峰面積與X射線光譜總面積的比值。

1.2.5 淀粉結(jié)構(gòu)有序性的測定

使用Spectrum65傅立葉變換紅外光譜儀測定。在800～4 000 cm-1波長范圍內(nèi)，以2 cm-1的分辨率，平均16次掃描。將1 mg樣品(淀粉粉末過100目篩)與150 mg KBr混合。用OMINC 8.2對1 200～800 cm-1區(qū)域的光譜進行了反褶積，半寬為19 cm-1，分辨率增強因子為1.9。從基線校正和反褶積后的光譜中獲得1 047 cm-1和1 022 cm-1處的吸光度值。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

相關數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2013整理，采用Origin繪圖，Statistix 8.0數(shù)據(jù)分析軟件進行顯著性分析(P<0.05)，采用LSD法進行多重比較。每個樣品平行至少測2次，數(shù)值為平均值±標準誤差。

2 結(jié)果與分析

2.1 再生季稻米蒸煮食味品質(zhì)比較

各實驗品種再生季直鏈淀粉均高于頭季稻含量(數(shù)據(jù)未列出)，這與吳延壽等[11]的結(jié)果一致。可能是因為頭季和再生季稻籽粒發(fā)育期間的氣候條件存在較大差異引起的。直鏈淀粉含量與蒸煮后米飯的粘性、硬度、吸水性等均有密切的相關性。Bao等[15]研究表明直鏈淀粉含量與淀粉凝膠的硬度成正比，直鏈淀粉含量越高，淀粉的吸水率越低，從而淀粉凝膠的硬度越大 。根據(jù)NY/T 593—2013食用稻品種品質(zhì)規(guī)定秈稻品種蒸煮食味品質(zhì)一級的稻米直鏈淀粉質(zhì)量分數(shù)在13%～18%范圍內(nèi)。

膠稠度按米膠長度可分為硬膠(≤40 mm)，中等(41～60 mm)，軟膠(≥61 mm)，本研究實驗品種均屬于軟膠(表1)。米粉的膠稠度測定反映了已糊化的淀粉粒冷卻后再復原的趨向，是直鏈淀粉與支鏈淀粉兩類分子綜合作用的體現(xiàn)[16]。劉國華等[12]報道再生季稻米膠稠度的變化因品種不同而存在差異。不同品種間稻米膠稠度對溫度的響應不同。金正勛等[17]研究報道膠稠度與味道值呈正比。

糊化溫度是指稻米淀粉顆粒在水中加熱開始發(fā)生不可逆膨脹，失去其雙折射性和結(jié)晶性的臨界溫度，通常以堿消值來衡量。堿消值越小，糊化溫度越高，稻米蒸煮時吸水越多，溫度高，時間長。和兩優(yōu)1號、晶兩優(yōu)1468、畾優(yōu)1068的堿消值≥6(表1)，具有較低的糊化溫度。

表1 不同品種再生季稻米的蒸煮食味品質(zhì)與淀粉相對結(jié)晶度、紅外特征峰比值

表2 不同品種再生季稻米RVA譜特征參數(shù)

2.2 糊化特性分析

由表2可知，隆兩優(yōu)1307、晶兩優(yōu)1468的峰值黏度顯著高于其他品種。峰值黏度反映了淀粉膨脹的程度和結(jié)合水的能力，關系到谷物的最終食用品質(zhì)[18]。較高的峰值黏度又與較高的崩解值對應(隆兩優(yōu)1307、晶兩優(yōu)1468的崩解值顯著高于其他品種)。這表明隆兩優(yōu)1307、晶兩優(yōu)1468再生季稻米淀粉粒通過氫鍵與水結(jié)合的能力較強，且糊化后穩(wěn)定性較強。各品種最低黏度差異變化范圍不大。隆兩優(yōu)1307、和兩優(yōu)1號、隆兩優(yōu)1308、晶兩優(yōu)1468、鑫隆優(yōu)3號、泰優(yōu)390的崩解值大于1 200 cP，消減值低于300 cP。崩解值反映淀粉熱糊的穩(wěn)定性，消減值反映了淀粉冷糊的穩(wěn)定性和老化趨勢[19]。畾優(yōu)1068的峰值時間與糊化溫度均高于其他品種，隆兩優(yōu)1308的糊化溫度總體表現(xiàn)最低。舒慶堯等[20]報道蒸煮食味品質(zhì)好的稻米一般峰值黏度大、崩解值大、最終膠黏度小、消減值小和起始糊化溫度低。研究表明食味較好的水稻品種崩解值大于100 RVU(即1 200 cP)，消減值小于25 RVU(等于300 cP)[21]。從RVA譜分析，創(chuàng)兩優(yōu)豐占、畾優(yōu)1068的食味品質(zhì)要低于其他供試品種。Tangsrianugul等[19]研究發(fā)現(xiàn)直鏈淀粉含量與峰值黏度、崩解值呈顯著負相關，與消減值、最終黏度黏度、峰值時間顯著正相關，本研究并未呈現(xiàn)此規(guī)律，可能因為本實驗中各品種的直鏈淀粉含量接近或再生季灌漿期間氣候條件影響淀粉合成過程中相關酶類的活性，乃至其前體或基因的表達。

總而言之，和兩優(yōu)1號、晶兩優(yōu)1468直鏈淀粉含量適中，膠稠度長，糊化溫度低，且糊化時峰值黏度大、崩解值大、最終膠黏度小、消減值小、起始糊化溫度低，蒸煮食味品質(zhì)較好。

2.3 淀粉晶體結(jié)構(gòu)特性

淀粉作為稻米的主要組成成分，其晶體結(jié)構(gòu)與蒸煮食味品質(zhì)密切相關。由XRD衍射圖譜(圖1)可知，各品種稻米的衍射主峰分別為15°、17°、18°和23°，其中17°和18°衍射峰是相連的雙峰。本研究中供試品種的淀粉均呈現(xiàn)典型的A-型結(jié)晶結(jié)構(gòu)。隆兩優(yōu)1307、泰優(yōu)390、創(chuàng)兩優(yōu)豐占的相對結(jié)晶度高于其他品種，和兩優(yōu)1號的相對結(jié)晶度顯著低于其他品種(表1)。相關性分析表明相對結(jié)晶度與直鏈淀粉含量、堿消值呈顯著負相關，與膠稠度呈顯著正相關(圖2)，這與Cheetham等[22]的研究結(jié)果一致。支鏈淀粉是導致淀粉結(jié)晶度增加的原因之一，而直鏈淀粉會削弱晶體結(jié)構(gòu)，降低結(jié)晶度[22]。韓文芳等[3]報道大米淀粉顆粒中結(jié)晶區(qū)的比例越高，則淀粉晶體結(jié)構(gòu)越致密，破壞其晶體結(jié)構(gòu)所需能量越大，導致其糊化溫度升高。

圖1 淀粉X-射線衍射圖譜與傅立葉紅外特征譜 (以和兩優(yōu)1號、晶兩優(yōu)1468、泰優(yōu)390為例)

FT-IR光譜中，淀粉在995 cm-1的吸光度與淀粉分子間氫鍵的結(jié)構(gòu)有關，1 047 cm-1和1 022 cm-1的吸光度是淀粉結(jié)晶區(qū)和無定形區(qū)的結(jié)構(gòu)特征[23]。1 047/1 022 cm-1峰強度比值被看作是淀粉粒有序結(jié)構(gòu)的指標，其值反映淀粉分子的有序程度，比值越大，有序度越高。晶兩優(yōu)1468的FT-IR特征譜1 047/1 022 cm-1比值略高于其他品種(表1)，說明其淀粉內(nèi)部分子間的交聯(lián)程度較高。淀粉分子中的有序結(jié)構(gòu)與直鏈淀粉和支鏈淀粉所形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)有關[24]。相關性分析表明1 047/1 022 cm-1值與最低黏度、峰值時間顯著負相關(圖2)，表明淀粉晶體結(jié)構(gòu)對糊化特性存在影響。

注：a 直鏈淀粉含量與淀粉相對結(jié)晶度的關系；b 膠稠度與淀粉相對結(jié)晶度的關系；c 堿消值與淀粉相對結(jié)晶度的關系；d 峰值時間與1 047/1 022 cm-1比值的關系；e 最低黏度與1 047/1 022 cm-1比值的關系。R為相對結(jié)晶度；AC為直鏈淀粉含量；ASV為堿消值；GC為膠稠度；PT為峰值時間； TV為最低黏度；Ratio為 1 047/1 022 cm-1比值。 *為在P<0.05水平上顯著相關。

由此可見，再生季稻米中直鏈淀粉含量及淀粉粒的晶體結(jié)構(gòu)會對糊化特性和膠稠度等產(chǎn)生影響。

3 結(jié)論

不同品種再生季稻米間的蒸煮食味品質(zhì)、糊化特性和淀粉粒晶體特性存在顯著差異。實驗所供品種的淀粉均呈A-型結(jié)晶結(jié)構(gòu)。和兩優(yōu)1號的結(jié)晶度最低，晶兩優(yōu)1468的淀粉內(nèi)部有序程度最高，RVA譜特征值表明其具均有較好的食味品質(zhì)，且蒸煮食味品質(zhì)達部標二級。相關性分析表明淀粉晶體結(jié)構(gòu)與糊化特性、蒸煮食味品質(zhì)關系密切。結(jié)果表明，再生季稻米的蒸煮食味品質(zhì)因品種不同而存在差異，直鏈淀粉含量的改變會影響淀粉的晶體結(jié)構(gòu)，引起淀粉糊化特性的變化，導致稻米蒸煮食味品質(zhì)的差異。