姜 丹，王麗娟，丁 毅，黃 竹，唐日益，解桂香，徐 淼，張淑枝

（1.沈陽豐美生物技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽 110179；2.沈陽禾豐反芻動物飼料有限公司，遼寧 沈陽 110164）

隨著飼料科學(xué)和飼料工藝的發(fā)展， 尤其是在飼料禁抗、養(yǎng)殖減抗的行業(yè)大背景下，作為飼料添加劑的酶制劑，不僅受到業(yè)界的高度關(guān)注，而且應(yīng)用越來越廣泛［1］。 飼料原料是非常復(fù)雜的有機混合物， 各種不同的養(yǎng)分以復(fù)雜的化學(xué)方式結(jié)合在一起，不同酶譜的復(fù)合酶，作用效果如何，需要更多動物試驗的驗證［2］。 目前添加到飼料日糧中的復(fù)合酶制劑是由幾種單一的酶制劑為主的復(fù)合酶，可以利用各種單一酶制劑的協(xié)同作用，用于補充動物內(nèi)源酶的不足，提高養(yǎng)分消化率，消除飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子，改變腸壁結(jié)構(gòu)，降低腸道食糜的黏度，從而提高養(yǎng)分的吸收能力，同時可以提高動物的機體代謝，增強動物的免疫力［3］。 而不同酶譜組成復(fù)合酶作用效果有所差異。 該試驗選用幾種不同酶譜的復(fù)合酶，進(jìn)行肉雞的飼養(yǎng)試驗，測定生長性能指標(biāo)、血液生化指標(biāo)及腸道菌群數(shù)量，對復(fù)合酶在肉雞上的作用進(jìn)行評估， 為選擇最佳酶譜復(fù)合酶應(yīng)用到肉雞的生產(chǎn)實踐提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗肉雞與飼養(yǎng)管理 試驗采用單因子完全隨機設(shè)計，將480 只28 日齡白羽肉雞隨機分為4 組（對照組和試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每組12 個重復(fù)，每個重復(fù)10 只（公、母各占1/2）。 對照組飼喂玉米—豆粕型日糧，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ試驗組在相同營養(yǎng)水平的日糧中添加不同酶譜組合的復(fù)合酶，添加量均為200 g/t 配合飼料。試驗肉雞的飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗期15 d，試驗地點為遼寧某肉雞籠養(yǎng)小區(qū)， 采用多層籠飼養(yǎng)于同一雞舍內(nèi)，自由采食和飲水， 免疫程序和欄舍消毒按常規(guī)進(jìn)行。

1.1.2 復(fù)合酶制劑的組成 試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ所用復(fù)合酶1、2、3 酶譜的組成如表2 所示，3 種不同酶譜的復(fù)合酶均由沈陽豐美生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 測定指標(biāo)與方法

1.2.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)的測定 平均日采食量（ADFI，g/d）=耗 料 重/試 驗 天 數(shù)； 平 均 日 增 重（ADG，g/d）=（結(jié)測體重-始測體重）/試驗天數(shù)；料肉比（F/G）=平均日采食量/平均日增重；歐洲指數(shù)=成活率×體重 （kg）/（料肉比×出欄天數(shù)）×10 000。

1.2.2 肉雞血清生化指標(biāo)的測定 42 日齡時從每組隨機選取15 只試驗雞，共60 只，采血，3 000r/min，離心10 min，吸取上清液分裝于離心管中，置于液氮中保存待測。采集的血清，用于測定血清中總蛋白、白蛋白、總膽固醇和尿素氮的含量。

表1 肉雞飼料配方及營養(yǎng)水平 單位：%

表2 試驗組復(fù)合酶1、2、3 酶譜組成 單位：U/g

1.2.3 肉雞腸道菌群測定 取42 日齡對照組和試驗組肉雞的糞便， 進(jìn)行大腸桿菌和乳酸桿菌含量的測定。

2 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 9.1（2003）軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，多重比較選擇的方法是LSD，以P<0.01（差異極顯著）、P<0.05（差異顯著）作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)果與討論

3.1 結(jié)果

3.1.1 不同酶譜的復(fù)合酶對肉雞生產(chǎn)性能的影響各組試驗肉雞的體重、采食量、料肉比和歐洲指數(shù)如表3 所示。與對照組的結(jié)果比較，試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的日增重分別提高了1.29%、2.19%和1.09%，與對照組差異極顯著（P<0.01）；試驗組Ⅱ的日增重與試驗組Ⅰ、Ⅲ差異顯著（P<0.05）。 各組試驗肉雞的日采食量差異不顯著 （P>0.05）。 試驗組Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ的料肉比與對照組相比， 分別降低了1.01%、2.20%和0.83%，與對照組差異極顯著（P<0.01）；試驗組Ⅱ的料肉比與試驗組Ⅰ、Ⅲ差異極顯著（P<0.01）。 與對照組相比，試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的歐洲指數(shù)分別提高了3.65%、6.32%和4.69%，與對照組差異極顯著（P<0.01）。

3.1.2 不同酶譜的復(fù)合酶對肉雞血清生化指標(biāo)的影響 各組42 日齡試驗肉雞的血清生化指標(biāo)如表4 所示。 與對照組的試驗結(jié)果比較，試驗組Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ肉雞的總蛋白、 白蛋白的含量分別提高了10.08%～11.41%和12.00%～12.93%，試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與對照組差異極顯著（P<0.01），試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ差異不顯著（P>0.05）；試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的總膽固醇的含量分別提高了16.67% 、20.19% 和14.42%，試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與對照組差異極顯著（P<0.01）；試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的尿素氮含量分別降低了3.41%、4.55%和6.82%，試驗組Ⅰ、Ⅱ與對照組差異不顯著（P>0.05），試驗組Ⅲ與對照組差異顯著（P<0.05）。

3.1.3 不同酶譜的復(fù)合酶對肉雞腸道微生物菌群的影響 各組試驗肉雞的腸道微生物菌群的指標(biāo)見表5。 統(tǒng)計42 日齡肉雞的試驗測定結(jié)果，與對照組的試驗結(jié)果比較，試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的大腸桿菌的數(shù)量含量分別降低了17.87%、26.43%、21.67%，與對照組差異極顯著（P<0.01）；試驗組Ⅰ與試驗組Ⅱ差異極顯著（P<0.01），試驗組Ⅲ與試驗組Ⅰ、Ⅱ差異顯著（P<0.05）。 試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的乳酸桿菌的數(shù)量分別提高了13.99%、26.10%和24.06%，與對照組差異極顯著（P<0.01），試驗組Ⅱ、Ⅲ差異不顯著（P>0.05），試驗組Ⅰ與試驗組Ⅱ、Ⅲ相比差異極顯著（P<0.01）。

表3 不同酶譜對肉雞生產(chǎn)性能的測定

表4 不同酶譜對肉雞血清生化指標(biāo)的測定

3.2 討論

3.2.1 不同酶譜的復(fù)合酶對肉雞生產(chǎn)性能的影響酶制劑可以降解飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高飼料的利用率，同時可以補充內(nèi)源酶的不足，提高動物對飼料的消化利用率，進(jìn)而提高動物的生產(chǎn)性能［4］。 杜德偉等［5］研究證明，在飼料中直接添加飼用復(fù)合酶能改善肉雞的生產(chǎn)性能，總體增重提高6%，平均日增重提高0.65%， 料肉比降低0.13， 采食量降低。Dymkov 等［6］研究表明，肉雞飼喂了添加復(fù)合酶的日糧之后， 存活率提高了3.7%， 活體重增加了112.7 g，平均日增重提高了2.7 g，日采食量減少了0.41 g，料肉比減少了0.12。 該試驗結(jié)果與前述的研究結(jié)果一致，在試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的日糧中分別添加了不同酶譜的復(fù)合酶，日增重、日采食量均有不同程度的提高； 料肉比呈下降的趨勢。 試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的日增重最高提高2.19%，采食量有所提高，但無顯著差異；料肉比最多降低2.20%，歐洲指數(shù)顯著提高，與對照組都有極顯著的差異（P<0.01）。 該試驗證明復(fù)合酶制劑可以顯著提高肉雞的體重以及降低料肉比，提高歐洲指數(shù)；從生產(chǎn)性能的相關(guān)指標(biāo)來看， 復(fù)合酶2 比其余2 種復(fù)合酶的效果更佳。

3.2.2 不同酶譜的復(fù)合酶對肉雞血清生化指標(biāo)的影響 血清中總蛋白的水平提高證明在肉雞飼料中添加復(fù)合酶可以提高蛋白質(zhì)的利用率。 在肉雞生長的后期， 復(fù)合酶制劑能夠顯著降低血清中總膽固醇的含量［7］。龔俊勇等［8］研究證明酶制劑能夠降低肉雞血清中總膽固醇的含量。 尿酸是禽類蛋白質(zhì)分解代謝的主要終產(chǎn)物， 其含量的高低能夠反映禽類蛋白質(zhì)分解代謝的情況。 該次研究的結(jié)果與上述研究結(jié)果一致， 復(fù)合酶制劑可以使肉雞血液中總蛋白和白蛋白的含量極顯著（P<0.01）提高，說明添加復(fù)合酶制劑之后，可以提高肉雞飼料中的蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率， 增加了肉雞體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積［4］。

3.2.3 不同酶譜的復(fù)合酶對肉雞腸道微生物菌群的影響 動物腸道內(nèi)存在龐大的微生物體系，有助于腸道消化吸收營養(yǎng)物質(zhì)和提高消化率。 微生物發(fā)酵產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物在動物的腸道內(nèi)被吸收利用， 同時微生物可以利用腸道內(nèi)源性氮合成自身的菌體蛋白，為動物提供微生物蛋白質(zhì)，所以動物腸道正常的微生物菌群對動物的健康成長也起著很重要的作用［9］。 湯海鷗等［10］研究表明，復(fù)合酶制劑提高了肉雞空腸乳酸桿菌的數(shù)量， 提高了17.5%，能夠降低大腸桿菌的數(shù)量。 周小娟等［11］研究表明， 日糧中添加了復(fù)合酶可顯著降低盲腸的大腸桿菌濃度，顯著提高了乳桿菌濃度，并且降低了盲腸pH 值。 該試驗的結(jié)果與上述研究結(jié)果一致， 試驗組可顯著降低肉雞腸道內(nèi)大腸桿菌的數(shù)量，增加乳酸桿菌的活菌數(shù)量。因為動物腸道中的有益菌和病原菌存在競爭關(guān)系，在動物腸道內(nèi)，乳酸菌可以與一些病原菌競爭地利用動物腸道內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)， 并且競爭腸道上皮黏膜內(nèi)共同的黏附位點，同時乳酸菌還可以通過本身分泌的產(chǎn)物（例如有機酸類）降低腸道pH 值，這樣也可以抑制一些病原菌的生長［7］。 未被充分消化的飼料在進(jìn)入小腸后段時， 也會成為厭氧有害微生物增殖發(fā)酵的培養(yǎng)基，發(fā)酵產(chǎn)生的毒素可能會抑制畜禽生長，在這種情況下， 添加以非淀粉多糖酶為主的復(fù)合酶，一些小分子多糖片段的黏度就會降低，食糜黏度也會降低，進(jìn)而提高飼料養(yǎng)分的消化利用率［12］。

4 結(jié)論

在肉雞飼料中添加復(fù)合酶制劑可以顯著提高肉雞后期的生產(chǎn)性能、 優(yōu)化血清生化指標(biāo)以及維持腸道健康， 同時復(fù)合酶中的酶譜組成不同也顯著影響這些指標(biāo)。 影響動物對飼料原料的消化和吸收能力的因素是多方面的，既與動物的品種、生長階段等有關(guān)系，還與飼料的成分、生產(chǎn)工藝等有關(guān)， 可以根據(jù)不同畜禽的消化生理特點和飼料的成分，配制出不同的畜禽專用復(fù)合酶制劑［13］，也可根據(jù)不同的飼料類型配制出不同的專用復(fù)合酶。使用專用的復(fù)合酶制劑可以同時降解多種飼料底物 （例如飼料中有很多種抗?fàn)I養(yǎng)因子和多種養(yǎng)分），不同種類的酶還具有協(xié)同作用，可以最大限度地提高飼料的營養(yǎng)價值。

表5 不同酶譜對肉雞腸道微生物菌群的測定 單位：lg CFU/g