楊鵬 羅雪蘭 顏淵鴛 李丹 趙燕姣 楊瑞霞 歐和生

(1廣西國際壯醫(yī)醫(yī)院，廣西 南寧 530001；2廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院)

動脈粥樣硬化(AS)是一種血管管壁內(nèi)膜的慢性炎性病變，其發(fā)生發(fā)展受多種因素的影響，其中，血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)損傷是AS發(fā)生發(fā)展的始動環(huán)節(jié)〔1〕。自噬是細(xì)胞在生長、分化與發(fā)育過程中實(shí)現(xiàn)代謝需求的關(guān)鍵過程，該過程主要通過細(xì)胞將受損細(xì)胞器與變性蛋白運(yùn)輸至溶酶體進(jìn)行消化降解〔2，3〕。資料表明，VEC自噬廣泛存在AS的過程中，自噬不足或自噬過度可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，從而啟動并加速AS的形成〔4〕。

微小RNA(miRNA)是一類非編碼的單鏈小RNA，它通過特異性識別靶基因mRNA的3′非轉(zhuǎn)錄區(qū)，介導(dǎo)靶基因mRNA的降解或翻譯抑制，從而下調(diào)靶基因的表達(dá)，并參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡、自噬和AS病理生理等多種生物學(xué)過程〔5～7〕。miR-24屬于miR-23～27～24 家族，有研究顯示在家族性高膽固醇血癥的病人體內(nèi)，miR-24的表達(dá)量顯著增加〔8〕，提示miR-24與AS的聯(lián)系密切，但具體機(jī)制尚未明了。VEC自噬對AS具有重要的病理治療意義。生理狀態(tài)下VEC通過活化自噬促進(jìn)溶酶體降解氧化低密度脂蛋白膽固醇(ox-LDL)抵御其誘導(dǎo)的損傷，當(dāng)ox-LDL蓄積超過細(xì)胞代謝能力時，VEC受損誘發(fā)AS，此時通過增加VEC自噬的途徑可降低AS 的發(fā)生〔9〕。新近研究證明，某些miRNAs對VEC自噬具有明顯的調(diào)控作用，而miR-24與VEC自噬活性之間的關(guān)系則鮮有報道。ox-LDL是一種有效的AS促進(jìn)因子，目前被廣泛用于誘導(dǎo)血管炎癥、損傷及AS的發(fā)生發(fā)展。本研究通過ox-LDL誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)自噬，探討miR-24對HUVECs自噬的調(diào)控作用及ox-LDL對HUVECs中miR-24表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討miR-24通過調(diào)控自噬在AS中發(fā)揮的作用。

1 材料與方法

1.1細(xì)胞株、儀器及試劑 HUVECs購自武漢Procell公司。透射電子顯微鏡(日本HITACHI公司)；超凈工作臺(新加坡藝思高科技有限公司)；低速離心機(jī)(上海菲恰爾分析儀器有限公司)；倒置顯微鏡(日本Olympus公司)；CO2飽和濕度培養(yǎng)箱(美國Thermo Forma公司)；酶聯(lián)免疫檢測儀Model-450(美國Thermo Forma公司)；實(shí)時熒光定量(qRT)-聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)儀(原應(yīng)用生物系統(tǒng)公司)；小型高速冷凍離心機(jī)(賽默飛·世爾科技有限公司)；蛋白電泳儀、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜儀(美國Bio-Rad公司)；Odyssey熒光掃描成像系統(tǒng)(美國LI-COR CXL)。DMEM培養(yǎng)基(Gibco公司)；胎牛血清(Lonsera公司)；0.25%胰蛋白酶消化液(Gibco公司)；ox-LDL(廣州奕源生物科技有限公司)；四甲基偶氮唑鹽(MTT，Solarbio公司)；RNA提取試劑盒(Axygen生物公司)；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒及SYBR熒光定量PCR試劑盒(均購自日本TAKERA公司)；慢病毒載體(上海吉凱基化學(xué)技術(shù)有限公司)；LC3-Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1和P62抗體(均購自Cell Signaling Technology)；內(nèi)參GAPDH抗體(Proteintech)，抗兔IgG(H+L)熒光二抗(Cell Signaling Technology)。

1.2方法

1.2.1miR-24慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定 以miR-24序列(來自http://www.miRbase.org)：5′UGGCUCAGUUCAGCAGGAACAG-3′為根據(jù)，設(shè)計(jì)miR-24的發(fā)夾結(jié)構(gòu)，應(yīng)用PCR技術(shù)獲取目的基因片段，通過基因重組技術(shù)(AgeI/NheI 酶切)將目的基因克隆到GV367載體的MCS中(載體元件順序：Ubi-MCS-SV40-EGFP-IRES-puromycin)，接著進(jìn)行PCR鑒定及DNA測序比對分析確定載體形成miR-24高表達(dá)慢病毒顆粒即LV-GV367-miR-24，同體構(gòu)建成功后用慢病毒包裝相應(yīng)的GV367載體時根據(jù)miR-24反義序列及隨機(jī)對照序列構(gòu)建LV-GV367-anti-miR-24和LV-GV367-陰性對照NC。GV367載體上含有增強(qiáng)綠色熒光蛋白(EGFP)標(biāo)記及嘌呤霉素抗性，故已轉(zhuǎn)染細(xì)胞可見綠色熒光，且可用嘌呤霉素進(jìn)行篩選，建立穩(wěn)定表達(dá)目的基因的細(xì)胞株。

主要以陜西省榆林市清澗地區(qū)作為試驗(yàn)所在地。該地區(qū)是典型的黃土高原丘陵溝壑區(qū)，晝夜溫差大，年均氣溫10攝氏度，年均降水450毫米，無霜期200天。

1.2.3細(xì)胞的分組及ox-LDL誘導(dǎo)HUVECs自噬 將實(shí)驗(yàn)細(xì)胞隨機(jī)分為5組：正常組、ox-LDL組、陰性對照組、anti-miR-24組、miR-24組。正常組不給予任何干預(yù)，ox-LDL組用終濃度為100 μg/ml的ox-LDL工作液干預(yù)6 h誘導(dǎo)細(xì)胞自噬〔10〕。陰性對照組、anti-miR-24組、miR-24組的細(xì)胞先分別感染相應(yīng)的慢病毒載體，然后用終濃度為100 μg/ml的ox-LDL工作液干預(yù)6 h誘導(dǎo)細(xì)胞自噬。

外賣是大多數(shù)年青上班族的午餐首選，因?yàn)槲缧輹r間短，又懶得下樓買，只得叫外賣。可是現(xiàn)在外賣的質(zhì)量情況堪憂，如何才能健康吃外賣呢？

1.2.4qRT-PCR法檢測miR-24、LC3-Ⅱ、Beclin-1和P62 mRNA的表達(dá) 按RNA提取試劑盒提取各組細(xì)胞的總RNA，并測定濃度。予上海生工生物工程提供引物設(shè)計(jì)(序列見表1)，嚴(yán)格按照RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒與熒光定量PCR試劑盒說明進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和qRT-PCR。miR-24反應(yīng)條件：95 ℃ 1 min變性，95℃ 15 s、60℃ 30 s，40個循環(huán)，以U6作為內(nèi)參。目的基因反應(yīng)條件：UDG酶激活2 min；95℃，2 min；95℃，15 s；60℃，15 s；72℃，1 min；第2～4步進(jìn)行40個循環(huán)，以GAPDH作為內(nèi)參。每個樣本重復(fù)測定3次，取平均值，采用2-ΔΔCt法計(jì)算mRNA的相對表達(dá)量。

表1 引物序列

1.2.7Western印跡法檢測LC3-Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1、P62的蛋白表達(dá)量 實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞給予ox-LDL誘導(dǎo)自噬后，收集培養(yǎng)液及培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞，將各組細(xì)胞裂解，12 000 r/min、4℃離心15 min，取上清液。應(yīng)用二喹啉甲酸(BCA)標(biāo)準(zhǔn)曲線蛋白定量，分別取各組的蛋白30 μg進(jìn)行十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)并轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上。用脫脂奶粉封閉1 h后加入Ⅰ 抗(稀釋比例1∶1 000)濕盒孵育過夜(4℃)。第2 天用TBST沖洗3次，每次10 min，然后加入 Ⅱ 抗(H+L熒光標(biāo)記)(稀釋比例1∶10 000)孵育1 h，重復(fù)用TBST沖洗3次，每次10 min。利用雙色熒光掃描成像系統(tǒng)分析蛋白電泳條帶的灰度值，計(jì)算蛋白的表達(dá)量，以GAPDH為內(nèi)參，蛋白相對表達(dá)量=目的蛋白灰度值/GAPDH灰度值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

2.3透射電鏡觀察各組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) 透射電鏡觀察結(jié)果顯示(圖1)，正常組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)各細(xì)胞器分布基本正常，細(xì)胞核形態(tài)正常，細(xì)胞質(zhì)中偶見少量自噬小體；ox-LDL組細(xì)胞質(zhì)中可見數(shù)個散在于細(xì)胞質(zhì)中的雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小體及內(nèi)含細(xì)胞器的空泡狀自噬溶酶體，數(shù)量與陰性對照組相當(dāng)。miR-24組細(xì)胞中的自噬小體較ox-LDL組少，細(xì)胞核形態(tài)基本正常，anti-miR-24組細(xì)胞中可見較多自噬小體。結(jié)果提示，在誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生自噬后，過表達(dá)miR-24可抑制細(xì)胞自噬的程度。

2.1慢病毒轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞miR-24的表達(dá)量 正常組miR-24相對表達(dá)量(1.00±0.00)與陰性對照組(1.10±0.01)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，miR-24組miR-24相對表達(dá)量(1.82±0.12)明顯高于正常組和陰性對照組，anti-miR-24組miR-24相對表達(dá)量(0.47±0.10)明顯低于正常組和陰性對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。說明miR-24組、anti-miR-24組慢病毒成功轉(zhuǎn)染HUVECs并影響細(xì)胞miR-24表達(dá)，而陰性對照組慢病毒轉(zhuǎn)染不影響細(xì)胞miR-24表達(dá)，穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建成功。

1.2.5透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)自噬小體 分別消化收集各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞，0.1 mol/L磷酸緩沖液漂洗1次，低溫離心(1 000 r/min，5 min，4℃)，棄上清液，沿管壁加入提前預(yù)冷的2.5%戊二醛電鏡級固定液1 ml，置于4℃冰箱避光固定過夜。0.1 mol/L磷酸緩沖液漂洗3次,每次15 min，1.0%鋨酸溶液后固定2 h(4℃)。0.1 mol/L磷酸緩沖液漂洗3次,每次15 min，50%、70%、90%、3次100%梯度丙酮逐級脫水，每次15 min。100%丙酮∶樹脂=1∶1滲透2 h，100%丙酮∶樹脂=1∶2滲透2 h，純樹脂滲透過夜，環(huán)氧樹脂618包埋，烘箱聚合(37℃ 15 h，45℃ 12 h，60℃ 24 h)。超薄切片，厚度60～70 nm，醋酸鈾、檸檬酸鉛雙染色，上機(jī)觀察。

把容易的問題安排給后進(jìn)生答，這樣可以激發(fā)后進(jìn)生的學(xué)習(xí)積極性，啟發(fā)和培養(yǎng)他們的思維能力。而對于成績比較優(yōu)秀的學(xué)生，教師要給他們提供一些稍微有些難度的問題，讓他們通過努力思考可以得出答案。同時，老師在提出問題后，還要相機(jī)點(diǎn)撥，為學(xué)生的思考“架橋”，降低問題的坡度，以利于學(xué)生逐步接近“目標(biāo)”，達(dá)到預(yù)期的教學(xué)效果。從學(xué)生的實(shí)際出發(fā)，面向全體，讓每個學(xué)生都成為課堂的主人、學(xué)習(xí)的主體，使得班內(nèi)各層次的學(xué)生都得到發(fā)展。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS25.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、SNK-q檢驗(yàn)。

繼續(xù)優(yōu)化移民戶收入結(jié)構(gòu)，加速農(nóng)村勞動力轉(zhuǎn)移步伐，由出臺的勞務(wù)經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償機(jī)制帶動大量勞務(wù)經(jīng)濟(jì)興起，不斷帶動勞務(wù)輸出，通過政策引導(dǎo)鼓勵農(nóng)民外出務(wù)工，不斷利用扶貧培訓(xùn)政策，大力提高農(nóng)村勞動力素質(zhì)和專業(yè)技能，大力完善勞務(wù)派遣制度。

2 結(jié) 果

大食與唐朝交往密切。唐開元四年（716）“七月,大食國黑密牟尼蘇利漫遣使上表,獻(xiàn)金線織袍、寶裝玉灑池瓶各一”。大食國黑密牟尼蘇利漫即白衣大食第十代哈里發(fā)蘇萊漫（sulaiman，715-717）,而“金線織袍”實(shí)物在都蘭大墓所出織金錦似乎得到了證實(shí)。

2.2ox-LDL對HUVECs中miR-24表達(dá)量的影響 用100 μg/ml ox-LDL 干預(yù)HUVECs 6 h后，用qRT-PCR法檢測正常組和ox-LDL組的miR-24相對表達(dá)量。結(jié)果顯示，ox-LDL組miR-24表達(dá)水平(0.35±0.10)均明顯低于正常組(1.00±0.00)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示ox-LDL可明顯下調(diào)HUVECs中miR-24表達(dá)水平。

受納入研究樣本量較少的限制，本文研究方法可能存在一定的局限性，有必要行大樣本的隨機(jī)對照研究以進(jìn)一步證實(shí)。綜上所述，對于腦卒中患者采用中醫(yī)延續(xù)護(hù)理能夠顯著改善患者的臨床癥狀，提高患者的生活質(zhì)量與耐受性，值得臨床實(shí)踐中應(yīng)用與推廣。

1.2.6MTT法檢測細(xì)胞活性 細(xì)胞分別以每孔8×103個接種到96 孔板，待細(xì)胞貼壁后加入終濃度100 μg/ml ox-LDL藥物干預(yù)6 h。棄去培養(yǎng)基，每孔加入100 μl新配制MTT(工作液濃度0.5 mg/L)，37℃孵育4 h，小心棄去孔中培養(yǎng)液，每孔加入DMSO 150 μl，震蕩10 s，酶標(biāo)儀490 nm 波長測定吸光度值(A490 nm)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

圖1 各組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及自噬小體觀察結(jié)果比較(×25 000)

2.4各組HUVECs細(xì)胞活性比較 miR-24組OD值(0.35±0.08)、anti-miR-24組OD值(0.68±0.12)、陰性對照組(0.72±0.10)、ox-LDL組(0.71±0.09)均明顯低于正常組(0.89±0.04)，miR-24組OD值明顯低于陰性對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，陰性對照組與ox-LDL組、anti-miR-24組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。提示表達(dá)miR-24能在一定程度上抑制HUVECs的活性。

1.2.2HUVECs轉(zhuǎn)染 HUVECs用含20%新生胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，加入雙抗：青霉素100 IU/ml和鏈霉素0.1 mg/ml，在37℃、5%CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，取生長狀態(tài)良好的細(xì)胞以每孔5×105個細(xì)胞接種到6孔板，培養(yǎng)24 h。3種慢病毒以感染指數(shù)MOI=70感染HUVECs，置于培養(yǎng)箱孵育48 h，在倒置熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)情況，加入嘌呤霉素(10 μg/ml)進(jìn)行篩選。

2.5各組細(xì)胞LC3-Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1及P62蛋白相對表達(dá)量比較 Western印跡結(jié)果顯示(圖2)，陰性對照組、anti-miR-24組ox-LDL組LC3-Ⅰ/Ⅱ與Beclin-1表達(dá)明顯高于正常組，而ox-LDL組、陰性對照組、anti-miR-24組及miR-24組的P62的表達(dá)明顯低于正常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，說明ox-LDL能顯著誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生自噬。anti-miR-24 組LC3-Ⅰ/Ⅱ與Beclin-1表達(dá)量明顯高于陰性對照組，P62的表達(dá)量明顯低于陰性對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。而miR-24組的LC3-Ⅰ/Ⅱ與Beclin-1表達(dá)量明顯低于陰性對照組，P62的表達(dá)量明顯高于陰性對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。提示在ox-LDL誘導(dǎo)細(xì)胞自噬后，過表達(dá)miR-24能抑制HUVECs自噬水平。見表2。

1～5：正常組、ox-LDL組、陰性對照組、anti-miR-24組、miR-24組

表2 各組細(xì)胞LC3-Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1及P62蛋白的相對表達(dá)量

2.6各組細(xì)胞LC3-Ⅱ、Beclin-1及P62 mRNA相對表達(dá)量比較 陰性對照組、anti-miR-24組、miR-24組、ox-LDL組的LC3-Ⅱ與Beclin-1 mRNA相對表達(dá)量均明顯高于正常組，而P62 mRNA相對表達(dá)量均明顯低于正常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。anti-miR-24 組的LC3-Ⅱ與Beclin-1 mRNA相對表達(dá)量明顯高于陰性對照組，而P62 mRNA相對表達(dá)量明顯低于陰性對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。miR-24 組的LC3-Ⅱ與Beclin-1 mRNA相對表達(dá)量明顯低于陰性對照組，，而P62 mRNA相對表達(dá)量明顯高于陰性對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。提示miR-24過表達(dá)可在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)一步下調(diào)LC3-Ⅱ與Beclin-1的表達(dá)量及上調(diào)P62的表達(dá)量。見表3。

表3 各組細(xì)胞LC3-Ⅱ、Beclin-1及P62 mRNA相對表達(dá)量

3 討 論

本研究發(fā)現(xiàn)ox-LDL能誘導(dǎo)HUVECs產(chǎn)生自噬，同時還能下調(diào)HUVECs中miR-24的表達(dá)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miR-24對ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs自噬具有明顯的抑制作用，再一次驗(yàn)證了miR-24顯著抑制HUVECs的增殖能力。因此推測過表達(dá)miR-24可通過抑制ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs自噬并抑制細(xì)胞增殖，進(jìn)而發(fā)揮其在AS中的作用。

VEC在血管結(jié)構(gòu)的維持與功能方面發(fā)揮著重要的作用，VEC損傷和自噬異常對AS的發(fā)生和發(fā)展有促進(jìn)作用〔11〕。血管內(nèi)皮受到有害刺激后會誘發(fā)自噬以保護(hù)細(xì)胞免受損傷。但是自噬異常也會導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，導(dǎo)致內(nèi)皮完整性喪失，局部脂質(zhì)沉積，AS和斑塊不穩(wěn)定〔12〕。自噬過程由一系列自噬相關(guān)基因(Atg)介導(dǎo)完成，其中以酵母自噬基因Atg6同源物Beclin-1和LC3為代表性蛋白〔13〕。自噬發(fā)生時，細(xì)胞溶質(zhì)形式的LC3(LC3-Ⅰ)與磷脂酰乙醇胺(PE)綴合形成LC3-PE綴合物(LC3-Ⅱ)，被募集到自噬體膜中〔14〕。LC3-Ⅱ始終穩(wěn)定地保留在自噬體膜上直到與溶酶體融合，因此可作為自噬體的標(biāo)記蛋白〔15〕。另外，Beclin-1也可以調(diào)節(jié)自噬體的形成，而且能促進(jìn)其成長成熟，亦是調(diào)控細(xì)胞自噬的必要因子〔16〕。P62是多功能的泛素化結(jié)合蛋白，它通過與LC3直接綁定，部分性地進(jìn)入自噬體內(nèi)，并在自噬期間被不斷分解，因此其表達(dá)程度與自噬程度具有相反性。ox-LDL作為一種刺激因素可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生自噬，Zhang等〔17〕研究發(fā)現(xiàn)，ox-LDL能上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞中自噬相關(guān)基因Beclin-1和LC3Ⅱ的表達(dá)，且分別在0.5 h和6 h時自噬蛋白的表達(dá)達(dá)到峰值。本研究結(jié)果提示，通過ox-LDL刺激可誘發(fā)HUVECs產(chǎn)生自噬。

miRNA是人體內(nèi)的一種對基因具有調(diào)控作用的重要小分子核糖核酸，參與多種疾病的病生理過程〔18〕。當(dāng)機(jī)體受到某種刺激以后，組織或細(xì)胞內(nèi)的miRNA水平就會出現(xiàn)不同程度的上調(diào)或下調(diào)，從而發(fā)揮對機(jī)體的保護(hù)或者損害作用。有研究表明，ox-LDL可誘導(dǎo)細(xì)胞中的miRNA水平發(fā)生改變。Tang等〔19〕研究發(fā)現(xiàn)，ox-LDL以時間和劑量依賴性方式下調(diào)HUVECs中miR-21 的水平，過表達(dá) miR-21 可增強(qiáng)ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs自噬，抑制AS。Chen等〔20〕報道m(xù)iR-155的過表達(dá)可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬的激活，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活和化學(xué)抗性。本研究結(jié)果提示ox-LDL能下調(diào)HUVECs中miR-24的表達(dá)水平。

大多數(shù)miRNA具有抑制自噬的作用，但也有少部分miRNA具有促進(jìn)自噬作用。miR-216a 通過下調(diào)Beclin1和 ATG5抑制ox-LDL誘導(dǎo)的自噬〔21〕。miR-214-3p可通過直接靶向ATG5的3′-UTR抑制HEK293 細(xì)胞自噬〔22〕。研究發(fā)現(xiàn)，miR-155可通過增強(qiáng)LC3和降低p62 mRNA水平增強(qiáng)ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs自噬。盡管目前已證實(shí)多種miRNA對細(xì)胞自噬具有調(diào)控作用，但關(guān)于miR-24與自噬的研究則鮮有報道。本研究結(jié)果提示miR-24對ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs自噬具有一定的調(diào)節(jié)作用。

VEC自噬在AS發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，miR-24可通過調(diào)節(jié)VEC自噬的作用進(jìn)而發(fā)揮其在AS中的作用。但是，本研究僅是miR-24體外實(shí)驗(yàn)的初探，并且機(jī)制研究深度不夠，要進(jìn)一步驗(yàn)證這一機(jī)制，還需要開展下一步的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。