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引言

化學(xué)指紋圖譜能夠?qū)λ幬锘瘜W(xué)成分的種類、含量進(jìn)行較為宏觀、整體的進(jìn)行反映,具有特征性、專屬性、完整性、穩(wěn)定性及可量化的特點(diǎn),是藥物質(zhì)量控制的常用方法。中藥化學(xué)成分及其作用機(jī)制的復(fù)雜使得僅通過(guò)對(duì)化學(xué)成分檢測(cè)的方式難以準(zhǔn)確、客觀的對(duì)中藥質(zhì)量以及安全性、有效性進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)。在此背景下,研究人員不斷探索能夠完整反映和評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的方法。通過(guò)利用化學(xué)指紋圖譜的質(zhì)量可控性最大程度的獲取并利用其所反映的中藥成分信息,探索其與中藥療效的內(nèi)在關(guān)系,即“中藥譜效學(xué)”在中藥質(zhì)量控制上有著較好的應(yīng)用和發(fā)展前景。

1 譜效關(guān)系概述

中藥譜效關(guān)系研究是指基于對(duì)中藥成分的化學(xué)指紋譜圖,將中藥的各成分圖譜與藥物實(shí)際效果相關(guān)聯(lián)并進(jìn)行線性或非線性的數(shù)學(xué)處理,建立“譜-效”模型,進(jìn)而確定與藥效相關(guān)的化合物群,實(shí)現(xiàn)“譜”、“效”一致,即以完整的“譜”表征整體的“效”,進(jìn)而建立起能夠準(zhǔn)確反映藥物功效的中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。中藥譜效關(guān)系研究?jī)?nèi)容包括建立化學(xué)指紋圖譜、藥物活性研究、采用科學(xué)的數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行關(guān)聯(lián)性分析、建立合適的藥效評(píng)價(jià)模型。

2 分析方法

2.1 化學(xué)指紋圖譜建立 在中藥譜系關(guān)系分析研究中,藥物化學(xué)指紋圖譜的建立是重要的基礎(chǔ)工作內(nèi)容,目前常用的方法包括以下幾種。

2.1.1 高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC) HPLC是用于藥物化學(xué)指紋圖譜建立的常用方法,通過(guò)對(duì)流動(dòng)相組成、調(diào)整洗脫條件、改變柱溫、更換色譜柱、調(diào)整流速等參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)可以對(duì)復(fù)雜化合物成分進(jìn)行有效分離,并且可以通過(guò)串聯(lián)多種類型檢測(cè)器來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)多種化合物進(jìn)行共同檢測(cè),且分析結(jié)果受化合物本身穩(wěn)定性和揮發(fā)性的影響較低,具有樣品消耗少、分析速度快、分離效能高、穩(wěn)定性良好以及可重復(fù)等特點(diǎn),但該方法對(duì)于大分子化合物的分離能力相對(duì)較差。

2.1.2 氣相色譜法(gas chromatography method,GC) GC當(dāng)前在藥物化學(xué)、石油化工等各個(gè)領(lǐng)域中有著廣泛應(yīng)用,具有高效分離、選擇性高、靈敏度好、分析速度快等優(yōu)點(diǎn),對(duì)于含有揮發(fā)性成分的樣品檢測(cè)有著良好的應(yīng)用效果。隨著快速GC方法和便攜式GC儀的發(fā)展,該技術(shù)在現(xiàn)場(chǎng)分析上有著顯著優(yōu)勢(shì)。

2.1.3 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) 該技術(shù)是通過(guò)連接色譜儀與質(zhì)譜儀,將經(jīng)過(guò)色譜儀分離后的化學(xué)成分進(jìn)行電離后進(jìn)入質(zhì)譜儀進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)的技術(shù)。該技術(shù)可以有效解決單一檢測(cè)方式對(duì)某些特定化學(xué)成分的檢測(cè)靈敏度、響應(yīng)低或噪音大的問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)對(duì)更多成分的檢測(cè),提高化學(xué)指紋圖譜的全面性。該技術(shù)在組分復(fù)雜、成分不明確的中藥檢測(cè)中有著良好的應(yīng)用效果。常用的有高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)等。

2.1.4 核磁共振法(1H-NMR) 1H-NMR是化學(xué)及藥物分析領(lǐng)域中的常用方法,其具有樣品用量少、檢測(cè)速度快、獲取信息多等優(yōu)勢(shì),能夠客觀、全面的反映樣品化學(xué)成分特征,在中藥成分檢測(cè)與化學(xué)指紋圖譜建立中有著良好的應(yīng)用前景。

2.2 藥效評(píng)價(jià) 對(duì)于中藥藥效活性的分析評(píng)價(jià)基于傳統(tǒng)中醫(yī)理論和現(xiàn)代藥理學(xué)研究有著不同的評(píng)價(jià)方法。

2.2.1 基于傳統(tǒng)中醫(yī)理論的藥效評(píng)價(jià) 該評(píng)價(jià)方法是在傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)、中藥學(xué)、方劑學(xué)等理論的指導(dǎo)下通過(guò)將中藥“性味”、“歸經(jīng)”、“功效”等特性與臨床“辨證論治”、“病癥”相聯(lián)系而建立起的藥效評(píng)價(jià)。例如,有學(xué)者通過(guò)建立瘀熱互結(jié)證大鼠模型,給予平性藥、熱性藥、寒性藥進(jìn)行治療干預(yù),觀察大鼠各項(xiàng)特征指標(biāo)變化,從而分析藥學(xué)療效。

2.2.2 基于現(xiàn)代藥理學(xué)的藥效評(píng)價(jià) 該方法是在現(xiàn)代藥理學(xué)研究下,通過(guò)建立相關(guān)疾病模型直接對(duì)藥物的藥理活性和作用機(jī)制進(jìn)行研究的一種方法,該方法可以更加直觀、有效的反映中藥成分的藥效活性并與化學(xué)指紋譜圖建立起譜效關(guān)系,是當(dāng)前研究中藥譜效關(guān)系的主要方法。

2.3 數(shù)據(jù)處理與模型建立 在獲取中藥化學(xué)指紋圖譜與臨床藥效信息后,需要通過(guò)科學(xué)的數(shù)學(xué)研究方法來(lái)探索并建立兩者之間的關(guān)系,從而形成中藥譜效關(guān)系模型。常用的數(shù)據(jù)處理方法有：相關(guān)性分析、回歸分析、主成分分析、典型相關(guān)分析、聚類分析、灰色關(guān)聯(lián)度分析等。不同的數(shù)據(jù)處理方法有著各自的特點(diǎn)、優(yōu)勢(shì)及應(yīng)用范圍,需要研究者根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行合理選擇。

3 中藥譜效關(guān)系的具體應(yīng)用

中藥譜效關(guān)系的建立對(duì)于中藥的相關(guān)研究開(kāi)展、質(zhì)量評(píng)價(jià)控制以及臨床使用等多個(gè)方面有著重要的應(yīng)用價(jià)值。在中藥質(zhì)量控制上,其應(yīng)用主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。

3.1 中藥材質(zhì)量控制 通過(guò)對(duì)中藥材譜效關(guān)系進(jìn)行研究,可以對(duì)其藥效活性成分以及個(gè)成分的藥效大小進(jìn)行確定,建立起基于有效成分種類、含量以及藥效強(qiáng)弱的中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),實(shí)現(xiàn)對(duì)不同品種、產(chǎn)地、種植條件的中藥材質(zhì)量的有效評(píng)價(jià)和控制。

3.2 中藥材炮制質(zhì)量控制 炮制是中藥材用于臨床疾病治療或復(fù)方制劑制作生產(chǎn)的重要前置工藝,其能夠起到矯味矯臭、提高藥效、降低毒性、改變藥性等多種效果。通過(guò)中藥譜系關(guān)系研究進(jìn)一步確定藥效發(fā)揮相關(guān)成分以及相關(guān)成分分布部位,可以對(duì)中藥材炮制的進(jìn)行和完善提供有效的指導(dǎo)和參考,提高炮制工藝的準(zhǔn)確性、針對(duì)性。此外,由于中藥炮制過(guò)程會(huì)對(duì)藥物成分種類、含量造成明顯的影響,通過(guò)對(duì)炮制后中藥材的譜系關(guān)系進(jìn)行分析,可以確定炮制后的活性成分與藥效關(guān)系,闡釋炮制方法的內(nèi)涵并建立起對(duì)炮制工藝本身的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 中藥復(fù)方制劑質(zhì)量控制 對(duì)于中藥復(fù)方制劑的研究是現(xiàn)代中醫(yī)中藥發(fā)展的一個(gè)重要內(nèi)容,以往化學(xué)成分分離結(jié)合、簡(jiǎn)單活性成分篩選的方法難以有效解釋中藥復(fù)方的內(nèi)涵。通過(guò)譜效關(guān)系研究,可以對(duì)中藥單一組分以及不同成分之間的相互作用和影響進(jìn)行更加準(zhǔn)確的研究,同時(shí)也可以越過(guò)中藥材成分直接對(duì)復(fù)方制劑活性物質(zhì)進(jìn)行確定,從而用于中藥復(fù)方制劑額地創(chuàng)新研究以及質(zhì)量評(píng)價(jià)控制。

結(jié)語(yǔ)

綜上所述,中藥譜效關(guān)系研究是中藥現(xiàn)代化發(fā)展、加強(qiáng)對(duì)中藥質(zhì)量控制的一個(gè)重要發(fā)展方向,有著較好的應(yīng)用前景。在目前中藥譜效關(guān)系相關(guān)研究和應(yīng)用中,中藥化學(xué)指紋譜系建立的準(zhǔn)確性、全面性以及藥效評(píng)價(jià)、譜效模型建立的科學(xué)性等方面還有待進(jìn)一步研究提高,從而使中藥譜效關(guān)系發(fā)揮出更大的應(yīng)用價(jià)值。