施玉婷 朱帆東 謝明曉 唐 璐 陸嘉磊 胡朗杰 賀玉琴

長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院 湖南 長(zhǎng)沙 410219

胃潰瘍是指胃黏膜受某種因素影響時(shí)而出現(xiàn)破損,隨即其粘膜下毛細(xì)血管壓力升高與通透性增加,從而出現(xiàn)的一種消化性潰瘍。對(duì)于該病的治療宗旨意在通過(guò)外界施以干預(yù)手段,在減輕胃黏膜的損傷同時(shí)促使其修復(fù)[1]。有中醫(yī)學(xué)資料記載[2],參苓白術(shù)散主要由人參、茯苓、白術(shù)、甘草等藥物組成,其具有消炎、調(diào)節(jié)胃腸蠕動(dòng)以及去濕養(yǎng)胃等功效。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)使用不同濃度的參苓白術(shù)對(duì)小鼠胃潰瘍模型進(jìn)行灌胃處理,從而觀察參苓白術(shù)散對(duì)胃潰瘍的保護(hù)作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)KM小鼠100只,健康,雄性,體重(20.2±2.3)g。由長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,飼養(yǎng)于溫度18-22℃清潔級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。

1.2 實(shí)驗(yàn)主要藥品 參苓白術(shù)散免煎顆粒劑,購(gòu)于長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診中藥房按原方比例配。參照現(xiàn)代劑量組成(人參20 g、白術(shù)20 g、茯苓20 g、白扁豆15 g、蓮子12 g、山藥20 g、甘草20 g、薏苡仁12g、砂仁12 g、桔梗12 g)。

1.3 實(shí)驗(yàn)大致流程 實(shí)驗(yàn)前將小鼠禁食(不禁水)24～36h,乙醚淺麻醉后,仰臥固定在手術(shù)架上,酒精消毒腹部,劍突軟骨下腹中線切口1.5cm左右開(kāi)腹,將胃拉出,在胃的腹側(cè)面,即胃體部與幽門部交界處,將微量注射器放平刺入漿膜0.5～0.6mm處,注入20%乙酸0.05ml,形成丘疹,再用0.9%生理鹽水沖洗,將胃送回腹腔,仔細(xì)縫合腹壁及外皮,手術(shù)的當(dāng)天小鼠禁食(不禁水),次日,對(duì)照組使用生理鹽水進(jìn)行灌胃,劑量為0.2 ml/10 g;參苓白術(shù)散顆粒低、中、高劑量組灌胃濃度分別用10g/kg/d、18g/kg/d、36g/kg/d。所有小鼠均給予同等劑量藥物進(jìn)行灌胃,灌胃時(shí)間長(zhǎng)達(dá)14天。第14天灌胃后禁食12h,全部用頸椎脫臼法處死,開(kāi)腹取胃,用夾子夾緊賁門,由幽門注入1%甲醛溶液5ml,夾緊幽門,將全胃置于1%甲醛溶液中固定10min,取出后,沿胃大彎剪開(kāi),將胃向外翻開(kāi),用量杯量取胃液,之后用水輕輕清洗胃內(nèi)容物,將胃平鋪于玻璃板上,胃粘膜出現(xiàn)明顯灰白色條索狀損傷,用尺子測(cè)量胃粘膜損傷長(zhǎng)度,以損傷長(zhǎng)度(損傷寬度大于1mm者加倍計(jì)算)總和作為胃粘膜損傷指數(shù)。

1.4 觀察指標(biāo) 胃壁損傷指數(shù)(在清除胃內(nèi)容物后,用尺子測(cè)量胃粘膜損傷長(zhǎng)度,以損傷長(zhǎng)度(總和作為胃粘膜損傷指數(shù))、胃液量(ml)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS22.0建立數(shù)據(jù)庫(kù)并分析,計(jì)量資料的比較使用F檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)取0.05,雙側(cè)概率。

2 結(jié)果

2.1 四組小鼠處理后胃粘膜損傷指數(shù)的比較 四組小鼠處理后胃粘膜損傷指數(shù)比較,處理后試驗(yàn)組(低、中、高劑量組)胃黏膜損傷指數(shù)均顯著低于與對(duì)照組(P＜0.05)。詳見(jiàn)表1。

四組小鼠處理后胃粘膜損傷指數(shù)的比較(±s)

四組小鼠處理后胃粘膜損傷指數(shù)的比較(±s)

組別 胃粘膜損傷指數(shù)(mm) F P對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組34.12±3.2 28.75±3.1 29.22±2.6 20.24±2.4 26.84 0.00

2.2 四組小鼠處理后胃液量比較 四組小鼠處理后胃液量的比較,處理后試驗(yàn)組(低、中、高劑量組)胃液量顯著少于與對(duì)照組(P＜0.05),詳見(jiàn)表2。

表2 兩組小鼠處理后胃液量比較(±s)

表2 兩組小鼠處理后胃液量比較(±s)

組別 胃液量(ml) F P對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組4.51±1.4 3.22±1.3 3.72±1.5 2.55±1.2 3.15 0.03

3 討論

胃潰瘍作為臨床上常見(jiàn)的消化系統(tǒng)疾病,由于該病不易察覺(jué),發(fā)病時(shí)病情較重,嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡,故而備受關(guān)注。目前,有研究表明[3],參苓白術(shù)散對(duì)胃粘膜具有一定的保護(hù)作用,為探究其具體作用,特進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

本研究發(fā)現(xiàn),處理后,四組小鼠的胃黏膜損傷指數(shù)和胃液量差異顯著,從小到達(dá)依次為高劑量組、中劑量組、低劑量組組和對(duì)照組。說(shuō)明參苓白術(shù)散對(duì)胃粘膜確有保護(hù)作用,分析原因,現(xiàn)代研究表明[4],胃潰瘍的發(fā)生是由防御因子受損或(和)攻擊因子作用增強(qiáng)所致,其中炎性因子屬于損害胃粘膜的重要攻擊因子。TNF-α作為重要的炎性因子,其由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,在損傷胃粘膜的過(guò)程中,其發(fā)揮重要的介質(zhì)作用,同時(shí),TNF-α還可促進(jìn)細(xì)胞因子IL-1、IL-2、IL-8等白介素先后釋放,從而引起中性粒細(xì)胞活化,急性期蛋白生成,影響?zhàn)つぱ豕┙o,加劇損傷,最終形成潰瘍。參苓白術(shù)散[3]由人參、白術(shù)、茯苓、白扁豆、蓮子、山藥、薏苡仁、砂仁、桔梗組成,具有健脾益氣、滲濕止瀉之功能。方中人參、白術(shù)、茯苓、白扁豆、薏苡仁,甘溫益脾陽(yáng),蓮子、山藥之甘平滋脾陰,是以扶陽(yáng)多于護(hù)陰,用以補(bǔ)脾元升清氣。并以砂仁、桔梗調(diào)理脾胃。重在補(bǔ)而輔以調(diào),配伍合度,補(bǔ)通得當(dāng),有調(diào)中養(yǎng)胃之益,且有相關(guān)研究表明[4]其可減少炎性細(xì)胞的生成和TNF-a的表達(dá)。故而對(duì)胃粘膜具有一定的保護(hù)作用。綜上所述,參苓白術(shù)散對(duì)小鼠胃潰瘍的保護(hù)作用顯著,值得臨床推廣。