張義冉，胡廣超，孫海龍，程祥琴，羅冠群，趙曉東

（1.洛陽惠中生物技術(shù)有限公司 河南洛陽 471000；2.北京市華都峪口禽業(yè)有限責(zé)任公司 北京 101206）

201 9 年底全國蛋雞總存欄為14.32 億只，環(huán)比減少1.46%，同比增加13.2%。國內(nèi)參差不齊的養(yǎng)殖水平和龐大的養(yǎng)殖量，導(dǎo)致的問題主要有：疫病日趨復(fù)雜、飼養(yǎng)人員緊張、人力成本增加、免疫應(yīng)激或抓雞應(yīng)激較大等。在蛋雞的免疫中，以雞新城疫（ND）、禽流感和雞傳染性法氏囊?。↖BD）免疫次數(shù)較多，也是出現(xiàn)問題最多的疫病。目前蛋雞養(yǎng)殖面臨國家推廣減抗、環(huán)保緊縮、人員緊缺、禽病多發(fā)等狀況。如何在限用抗生素的前提下，保證蛋雞的健康，減少免疫次數(shù)和劑量，是一線養(yǎng)殖者所面臨的緊迫問題[1]。

洛陽惠中生物技術(shù)有限公司研發(fā)的新流法三聯(lián)基因工程亞單位疫苗采用基因工程手段，將法氏囊病毒的VP2 蛋白組裝成病毒樣顆粒，具有相當(dāng)?shù)拿庖咴院透玫陌踩?；與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，高度純化的病毒樣顆粒疫苗具有組分單一、無病毒核酸、良好的安全性和質(zhì)量可控等顯著優(yōu)點[2,3]，也是蛋雞減少免疫次數(shù)的基礎(chǔ)。

為驗證新流法、新流、新支減流在蛋雞開產(chǎn)前的3 次免疫替代全病毒疫苗5 次免疫的效果。在湖南某養(yǎng)殖集團進(jìn)行實際生產(chǎn)試驗。本次試驗對雞群免疫后應(yīng)激反應(yīng)、吸收狀況、ND/H9/IBD 的抗體水平變化規(guī)律等三方面進(jìn)行了跟蹤。

1 材料與方法

1.1 免疫程序（表1）

表1 試驗組和對照組的免疫程序

1.2 雞群狀態(tài)

免疫后觀察雞群的精神狀態(tài)及后期疫苗吸收情況。

1.3 抗體檢測

各組分別于21、35、54、63、103、140 日齡，各采集血樣18 份，分離血清不少于0.3mL/ 羽，做好標(biāo)記保存待檢。

1.4 檢測方法

ND、H9 抗體采用血凝及血凝抑制試驗進(jìn)行檢測，而IBD 則采用ELISA 法檢測抗體水平及陽轉(zhuǎn)率[4]。

1.5 統(tǒng)一管理

整個飼養(yǎng)周期雞群藥品使用，其它弱毒苗免疫及飼養(yǎng)管理均一致。

2 數(shù)據(jù)及檢測結(jié)果

2.1 數(shù)據(jù)收集

試驗組疫苗免疫0.5h 后羽毛整潔，精神良好，無趴臥現(xiàn)象，轉(zhuǎn)群后飲水、采食正常，10d 后免疫部位無結(jié)節(jié)腫塊，疫苗吸收程度良好；對照組免疫0.5h 后部分精神萎靡及趴臥沉睡，10d 后免疫部位有部分結(jié)節(jié)。

2.2 抗體檢測結(jié)果

由表2 可知，試驗組21 日齡ND 抗體均值為3.3 log2，35 日齡以后抗體逐步上升，54 日齡抗體均值達(dá)到7.7 log2，63 日齡后抗體均值均在10 log2以上；H9 在各日齡均高于對照組，在54 日齡后達(dá)到10 log2以上；IBD 21 日齡的抗體值（ELISA）達(dá)到1,187，陽轉(zhuǎn)率為100%；對照組的ND、H9 抗體分別要比試驗組低1～2、2～3個滴度，IBD 抗體水平與試驗組基本相當(dāng)，但轉(zhuǎn)陽率21 天僅93.7%，比試驗組低6.4%。

表2 不同日齡肉雞N D/H 9/IBD 抗體檢測結(jié)果

2.3 費用對比

表3 免疫費用對比

3 總結(jié)討論

通過試驗數(shù)據(jù)表明，與全病毒疫苗及活疫苗相比，蛋雞使用洛陽惠中生物生產(chǎn)的4G 滅活疫苗免疫3 次后，雞群狀態(tài)良好，無應(yīng)激，疫苗吸收良好，這與研發(fā)和生產(chǎn)、純化工藝是密不可分的，而且還能避免活苗散毒等風(fēng)險。

抗體水平也有明顯優(yōu)勢，在雛雞階段正常雞群在21、35、55 日齡的ND 和H9 抗體值在2～4 log2、4～6 log2、6～10 log2范圍內(nèi)，兩組抗體值雖均處于保護水平以上，但試驗組的抗體值明顯高且提升速率快，ND、H9 抗體分別要比對照組高1～2、2～3 個滴度，能夠更好的抵御野毒的侵襲。IBD 抗體水平雖然相當(dāng)，但在21日齡試驗組的陽轉(zhuǎn)率較高，能夠有效地縮短免疫空白期。

在100 日齡以上時兩組ND 抗體值均在9 以上，H9 抗體值在11 以上，但試驗組抗體數(shù)值均高于對照組。說明使用試驗組免疫程序，使用惠中生物的基因工程疫苗，可以達(dá)到甚至超過對照組5 次免疫的效果。

由表3 可知，因減少免疫次數(shù)，減少免疫劑量，疫苗費用可減少0.22 元/ 只，人工費用減少0.12 元/ 只，合計減少0.34 元/只。同時由于減少了抓雞和免疫應(yīng)激2 次，雞群狀態(tài)提升，但對以后增加產(chǎn)蛋量的間接增效本次沒有進(jìn)行研究。

本試驗結(jié)果證明使用惠中生物4G 系列滅活疫苗能夠減少免疫次數(shù)，滿足養(yǎng)殖戶的需求，給畜牧業(yè)帶來經(jīng)濟效益。