戴冬艷，徐佳，蔡鵬

異甘草酸鎂是第四代甘草酸制劑，異甘草酸鎂注射液即異甘草酸鎂的氯化鈉滅菌水溶液，因其具有抗炎、抗生物氧化、解毒、保護肝細胞膜和改善肝功能的作用，被廣泛用于治療肝膽系統(tǒng)疾病合并肝功能異常；也有文獻報道，在抗腫瘤治療時，預(yù)防性應(yīng)用異甘草酸鎂注射液，能夠預(yù)防抗腫瘤化療藥物相關(guān)性急性肝損傷，明顯降低其發(fā)生率和其嚴重程度。該藥臨床也用于治療慢性乙型肝炎、重癥肝炎、藥物性肝損傷、非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。

藥品檢測過程中，異甘草酸鎂注射液的測定依據(jù)是國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準WS1-（X-062）-2012Z，其中異甘草酸鎂和氯化鈉的含量采用兩種不同的方法分別進行測定，異甘草酸鎂的含量測定采用高效液相色譜（HPLC）法測定，氯化鈉的含量采用容量分析法進行檢測，且容量分析法需要標定硝酸銀滴定液，操作十分繁瑣費時，為檢測人員的測定工作帶來極大的不便，因此開發(fā)一種新的方法用于同時檢測兩種元素的含量顯得尤為重要。

近年來，電感耦合等離子發(fā)射光譜（ICP-OES）分析技術(shù)高速發(fā)展，ICP-OES因其基體效應(yīng)較小、檢出限低、精密度高、線性范圍較寬和多元素同時測定等優(yōu)點，已被廣泛應(yīng)用于藥物中的無機成分特別是金屬元素的分析中。如周偉明等采用ICPOES法對復(fù)方氯化鈉注射液中氯化鉀和氯化鈣進行測定，測定速度很快，有效簡化實驗步驟；另外陳陽等采用該方法對脂肪乳氨基酸（17）葡萄糖（11%）注射液中鉀、鈉、鈣、鎂進行含量測定，與傳統(tǒng)方法相比較，準確率很高，方法簡單，說明該方法有望作為金屬元素分析的替代分析方法。

綜上所述，基于文獻調(diào)研和前期工作基礎(chǔ)，2018年至2019年，本研究建立了ICP-OES法同時測定異甘草酸鎂注射液中鈉離子和鎂離子的含量，進而換算得到異甘草酸鎂與氯化鈉的含量，并將ICPOES法測定結(jié)果與按國家食品藥品監(jiān)督管理局標準WS1-（X-062）-2012Z 標準檢測的結(jié)果進行比較，結(jié)果準確且重現(xiàn)性較好，說明本研究可以有效的應(yīng)用于異甘草酸鎂注射液的質(zhì)量監(jiān)控。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

iCAP7400 型電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀（Thermo，USA）；Milli-Q純水機（Millipore，USA）

1.2 試劑

鈉元素標準溶液（中國計量科學(xué)研究院，批號18011，含量1 000 μg∕mL）；鎂元素標準溶液（中國計量科學(xué)研究院，批號17102，含量1 000 μg∕mL）；異甘草酸鎂注射液（正大天晴藥業(yè)集團股份有限公司，批號 180319204、181213204、181215104）；水為Milli-Q 純水系統(tǒng)制備的超純水；硝酸為優(yōu)級純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 標準儲備液 精密量取10 mL鎂元素標準溶液，置100 mL 容量瓶中，用超純水稀釋、定容至刻度，制成鎂元素標準儲備液Ⅰ（c＝100 μg∕mL）。精密量取10 mL鎂元素標準儲備液Ⅰ，置100 mL容量瓶中，用超純水稀釋、定容至刻度，制成鎂元素標準儲備液Ⅱ（c＝10 μg∕mL）。

2.1.2 混合標準溶液 精密量取鎂元素標準儲備液Ⅰ（c＝100 μg∕mL）1.0、2.0、4.0、6.0、10.0、20.0 mL和鈉元素標準溶液（c＝1 000 μg∕mL）3.0、4.0、6.0、8.0、10.0、20.0 mL，分別置200 mL 量瓶中，超純水稀釋并定容至刻度，充分搖勻，制成每1 mL 含鎂離子分別為0.5、1、2、3、5、10 μg，鈉離子分別為15、20、30、40、50、100 μg的系列濃度混合標準溶液。

2.1.3 供試品溶液 精密量取2 mL 異甘草酸鎂注射液，置200 mL 容量瓶中，用超純水稀釋定容至刻度，并充分搖勻，即得供試品溶液。

2.1.4 空白溶液 以超純水作為空白溶液。

2.2 試驗條件

等離子體功率1.20 kW；冷卻氣12 L∕min；載氣流速0.55 L∕min；輔助氣0.55 L∕min；蠕動泵轉(zhuǎn)速50 r∕min；觀測模式為徑向觀察；測量次數(shù)為3 次；鈉的分析譜線為588.995 nm；鎂的分析譜線為285.213 nm。

2.3 專屬性

本研究的空白溶液為超純水，盡管水中含有極少量的鈉、鎂等離子，但是試驗中可以通過儀器軟件扣除溶液空白，消除超純水中鈉和鎂離子對于試驗測定結(jié)果的影響。

2.4 線性與范圍

取“2.1.2”項下的系列濃度混合標準溶液，從低濃度到高濃度依次進樣測定，以待測離子的濃度C（μg∕mL）為橫坐標、光譜強度I為縱坐標繪制標準曲線，結(jié)果表明，鎂離子和鈉離子的質(zhì)量濃度與其發(fā)射光強度線性關(guān)系良好，見表1。

表1 線性考察結(jié)果

2.5 精密度試驗

取線性關(guān)系中的第3 點混合標準溶液（鎂離子2 μg∕mL、鈉離子30 μg∕mL），連續(xù)測定6次，記錄光譜強度。結(jié)果，鎂和鈉的RSD分別為0.67%和0.86%（n＝6），表明儀器精密度良好。見表2。

2.6 重復(fù)性試驗

按照“2.1.3”項下的方法制備6份同一批號的供試品溶液（批號180319204），分別進行測定，計算其含量。結(jié)果測得異甘草酸鎂注射液中鎂離子和鈉離子的平均含量分別為133.38、3 449.83 μg∕mL，RSD 分別為1.50%、1.79%，表明該方法重復(fù)性良好（見表2）。

2.7 穩(wěn)定性試驗

取同一份供試品溶液（批號180319204），分別于0、2、4、8、12、24 h 進行測定，結(jié)果，鎂和鈉的RSD 分別為1.47%和1.25%，結(jié)果表明，該供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定（見表2）。

2.8 加樣回收率試驗

精密量取5 mL 異甘草酸鎂注射液（批號180319204），置50 mL 容量瓶中，用超純水稀釋并定容至刻度，充分搖勻，精密量取3 mL至50 mL容量瓶中，加入4 mL鎂元素標準儲備液Ⅱ（c＝10 μg∕mL）、1 mL 鈉元素溶液標準溶液（c＝1 000 μg∕mL），即得加樣回收溶液；同法共制得加樣回收溶液6 份。進樣測定并計算回收率。結(jié)果，鎂和鈉的平均回收率分別為96.73%（RSD＝1.87%）、96.98%（RSD＝1.79%）（n＝6），表明該方法的回收率良好（見表3）。

表2 精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗結(jié)果

表3 加樣回收率試驗結(jié)果（n＝6）

2.9 樣品測定

按所擬定的含量測定方法，對同廠家的共3批異甘草酸鎂注射液中的鎂離子和鈉離子進行測定，并換算成異甘草酸鎂和氯化鈉的含量。同時根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準WS1-（X-062）-2012Z 標準中的方法，對上述3 批樣品分別用HPLC 法測定異甘草酸鎂的含量、用容量分析法測定氯化鈉的含量（見表4）。

兩種測定結(jié)果進行比較，ICP-OES 法與國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊方法的測定結(jié)果基本一致，表明本研究建立的ICP-OES 法測定的結(jié)果準確、可靠。

3 討論

3.1 譜線選擇

根據(jù)待測元素的含量，一般選擇干擾少，靈敏度高的譜線，故本研究中對鎂、鈉元素選取2～3 條譜線進行測定。本研究從儀器中分別選擇鎂279.553 nm、鎂280.270 nm、鎂285.213 nm 和鈉588.995 nm、鈉589.592 nm 等幾條特征譜線分別進行測定，考慮該樣品中的鎂、鈉元素含量較高，且需扣除空白溶液中鎂、鈉元素的干擾，考慮選用靈敏度較低的分析譜線，綜合比較各條特征譜線的光譜強度、穩(wěn)定性和受干擾情況，因此最終直接選擇了該儀器的分析譜線數(shù)據(jù)庫中推薦的鎂、鈉元素的測定波長，鎂、鈉的發(fā)射譜線分別為285.213 nm、588.995 nm。

表4 樣品含量測定結(jié)果及兩種方法測定結(jié)果比較

3.2 觀測方式的選擇

本研究所用的ICP-OES 是一種雙向觀測型儀器，軸向觀測靈敏度高、檢出限低，而徑向觀測干擾小、專屬性強、穩(wěn)定性好。有文獻報道，當鈉離子濃度≥20 μg∕mL 時，軸向觀測預(yù)采光時達到飽和；且該樣品中的鈉離子和鎂離子為常量離子，含量高；同時需要消除空白溶液中基質(zhì)離子的影響。通過試驗比較，該法采用靈敏度較低、干擾小的徑向觀測。

3.3 樣品的前處理

異甘草酸鎂注射液為異甘草酸鎂的氯化鈉水溶液，鎂離子和鈉離子均呈游離狀態(tài)，本研究以超純水作為溶劑直接稀釋測定。試驗過程中也對異甘草酸鎂注射液進行微波消解前處理、以5%稀硝酸作為溶劑進行測定，鎂離子和鈉離子的含量測定結(jié)果與樣品直接稀釋測定無顯著差別。故選擇以超純水為溶劑，樣品直接稀釋測定，前處理簡單。

3.4 兩種測定方法的比較

本研究測定的結(jié)果與法定標準測定的結(jié)果基本一致。在法定標準中，氯化鈉的測定是采用的是容量分析法，異甘草酸鎂是高效液相色譜法，兩種成分的測定方法均比較經(jīng)典、專屬性高、結(jié)果準確、廣泛適用于企業(yè)、基層藥檢所對該品種的質(zhì)量控制；本研究建立的ICP-OES 測定方法，操作簡便且能夠同時測定兩種成分含量，效率更高，但是部分企業(yè)、基層藥檢所該儀器未曾普及，應(yīng)用有限。但是隨著新的檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，新的檢測方法不斷開發(fā)，該含量測定方法也可作為異甘草酸鎂注射液的質(zhì)量控制的補充方法。

4 小結(jié)

本研究建立的ICP-OES法能夠同時測定異甘草酸鎂注射液中異甘草酸鎂和氯化鈉的含量，具有操作簡便、靈敏度高、線性范圍寬、專屬性強，可同時測定多元素等優(yōu)點，且測定結(jié)果與國家食品藥品監(jiān)督管理局標準WS1-（X-062）-2012Z按標檢測的結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義，能夠作為異甘草酸鎂注射液現(xiàn)行質(zhì)量標準的補充，應(yīng)用于異甘草酸鎂注射液的質(zhì)量控制和評價，也可為其他藥物中的鎂、鈉元素含量測定提供參考。