羅智心 姚靜 張茹 王利華 羅光華 方繼朝

摘要：二化螟[Chilo suppressalis （Walker）]是我國(guó)乃至亞洲各國(guó)稻區(qū)分布最廣的重大水稻害蟲(chóng)之一，近年來(lái)其抗藥性問(wèn)題尤為突出。因此，尋求環(huán)境相容性更好的二化螟防控手段迫在眉睫，而建立穩(wěn)定的室內(nèi)種群和規(guī)范化的人工飼養(yǎng)管理體系是開(kāi)展相關(guān)研究的基礎(chǔ)。針對(duì)目前二化螟室內(nèi)大規(guī)模人工飼養(yǎng)中存在的操作不規(guī)范、管理不嚴(yán)格、效率低下等問(wèn)題，本研究通過(guò)區(qū)分幼蟲(chóng)人工飼料用量、規(guī)范各項(xiàng)飼養(yǎng)操作的時(shí)間節(jié)點(diǎn)、加強(qiáng)飼養(yǎng)全程的管理等方法，建立了一套成熟的二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系。該技術(shù)體系操作簡(jiǎn)單、實(shí)用性強(qiáng)，不僅可以滿足種群長(zhǎng)期繼代飼養(yǎng)的基本需求，而且可以隨時(shí)擴(kuò)繁，以滿足不同蟲(chóng)齡的大規(guī)模用蟲(chóng)需求，可作為二化螟室內(nèi)人工飼養(yǎng)技術(shù)規(guī)范加以推廣。

關(guān)鍵詞：二化螟;水稻害蟲(chóng);人工飼養(yǎng);技術(shù)規(guī)范

中圖分類號(hào)：S435.112+.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2021）24-0100-10

收稿日期：2021-06-25

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（編號(hào)：31801737、31672024）;國(guó)家水稻產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（編號(hào)：CARS-01-37）;國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（編號(hào)：2016YFD0200805）;江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號(hào)：CX（19）3114]。

作者簡(jiǎn)介：羅智心（1985—），女，江蘇南京人，博士，助理研究員，主要從事農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)防控技術(shù)研究。E-mail：515958397@qq.com。

通信作者：羅光華，博士，副研究員，主要從事農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)綜合防控研究，E-mail：luogh_cn@163.com;方繼朝，博士，研究員，主要從事水稻害蟲(chóng)防控技術(shù)研究，E-mail：fangjc126@126.com。

二化螟[Chilo suppressalis （walker）]是重要的糧食作物害蟲(chóng)，不僅廣泛分布于我國(guó)乃至東南亞、南亞國(guó)家的水稻產(chǎn)區(qū)，而且是大部分稻區(qū)的螟蟲(chóng)優(yōu)勢(shì)種[1-3]。該蟲(chóng)具有鉆蛀性危害的特點(diǎn)，運(yùn)用常規(guī)防治手段很難達(dá)到理想的效果。近年來(lái)，隨著我國(guó)稻區(qū)耕作制度和種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整、化學(xué)農(nóng)藥的不合理使用等原因，二化螟抗藥性水平不斷提高，發(fā)生數(shù)量呈明顯上升趨勢(shì)[4-6]，這些不利因素促使人們尋求環(huán)境相容性更好的害蟲(chóng)防控手段。目前針對(duì)二化螟開(kāi)展的研究涉及面很廣，主要包括抗藥性監(jiān)測(cè)及機(jī)制解析[7-9]、轉(zhuǎn)基因抗螟水稻的選育[10-12]、天敵擴(kuò)繁和生物防治[13-15]、生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控[16-17]等多項(xiàng)研究，而建立穩(wěn)定的二化螟室內(nèi)種群和規(guī)范化的人工飼養(yǎng)管理體系是開(kāi)展相關(guān)研究的基礎(chǔ)。

20世紀(jì)70年代以來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)二化螟人工飼養(yǎng)技術(shù)的研究進(jìn)入高速發(fā)展時(shí)期。其中在利用天然植物材料的飼養(yǎng)方法方面，水稻種苗飼養(yǎng)法的使用范圍較廣且沿用至今[18-22]，在此基礎(chǔ)上發(fā)展的茭白、荸薺等新鮮植物材料飼養(yǎng)法亦陸續(xù)出現(xiàn)，且飼養(yǎng)效果良好[23-24]。但由于天然食料飼養(yǎng)法在防腐效果、操作復(fù)雜程度、飼養(yǎng)規(guī)模等方面存在一定的局限性。目前，該類方法多用于特定水稻品種飼養(yǎng)比較，或特定二化螟抗性種群飼養(yǎng)的相關(guān)試驗(yàn)[7，9，25-26]。

在半人工或純?nèi)斯わ暳巷曫B(yǎng)方法方面，日本學(xué)者起步較早并先后研發(fā)了二化螟石井飼料[27-28]和釜野飼料[29]。20世紀(jì)80年代初期，我國(guó)學(xué)者尚稚珍等對(duì)二化螟1代人工飼料配方及飼養(yǎng)管理方法展開(kāi)了初步探索[30]。隨后胡陽(yáng)等研發(fā)了以稻莖粉、稻糠粉、大豆粉、茭白莖粉等為主要原料的二化螟2代人工飼料配方[31-34]，李波等在此基礎(chǔ)上優(yōu)化了該配方，發(fā)展出了以新鮮茭白、大豆粉、酵母粉等為主要原料的3代人工飼料配方[35-36]?，F(xiàn)有二化螟3代人工飼料配方已趨于成熟，用該人工飼料飼養(yǎng)的試蟲(chóng)在蛹質(zhì)量、性比等多項(xiàng)適合度指標(biāo)上均表現(xiàn)良好[25]。與之匹配的室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)體系也在進(jìn)一步完善之中，極大地促進(jìn)了二化螟相關(guān)研究工作的開(kāi)展，包括各種室內(nèi)品系的篩選和繼代保持等[8，37-38]。

值得注意的是，盡管二化螟人工飼料配方已經(jīng)基本完善，但涉及該蟲(chóng)人工飼養(yǎng)過(guò)程中不同試蟲(chóng)齡期的飼養(yǎng)容器大小、飼料用量、種群密度等具體指標(biāo)和注意事項(xiàng)等的表述尚不夠精準(zhǔn)。此外，雖然已有研究者對(duì)幼蟲(chóng)管理、化蛹管理、羽化管理、產(chǎn)卵管理進(jìn)行了一定的分類和描述[23]，但在各蟲(chóng)態(tài)規(guī)范化飼養(yǎng)管理方面的表述并不完善，尤其是在各項(xiàng)操作時(shí)間節(jié)點(diǎn)的選擇、標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)管理等方面存在一定的不足。

本研究在總結(jié)和優(yōu)化前人飼養(yǎng)方法的基礎(chǔ)上，首次提出以5 d作為室內(nèi)種群采集蟲(chóng)卵的周期，以 4 d 作為收集蟲(chóng)蛹的周期，以36 d作為單個(gè)批次卵塊接種至化蛹階段的幼蟲(chóng)飼養(yǎng)周期;通過(guò)對(duì)不同蟲(chóng)態(tài)操作流程的規(guī)范化管理，建立了多批次、重疊循環(huán)飼養(yǎng)的新型管理體系——二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系。該體系不僅可以滿足室內(nèi)種群長(zhǎng)期繼代飼養(yǎng)的基本需求，而且可以根據(jù)試驗(yàn)用蟲(chóng)量的變化隨時(shí)擴(kuò)大繁殖，極大地縮短了不同蟲(chóng)齡、不同蟲(chóng)態(tài)試蟲(chóng)的準(zhǔn)備周期。此外，該飼養(yǎng)管理體系有效地解決了筆者所在實(shí)驗(yàn)室二化螟室內(nèi)種群飼養(yǎng)規(guī)模不穩(wěn)定的問(wèn)題，即偶發(fā)性的種群規(guī)?？焖傥s甚至趨于滅絕的情況。筆者所在實(shí)驗(yàn)室采用該體系連續(xù)飼養(yǎng)二化螟室內(nèi)種群超過(guò)2年，種群發(fā)育狀態(tài)良好，各項(xiàng)適合度指標(biāo)穩(wěn)定，未發(fā)生種群規(guī)模萎縮現(xiàn)象。該飼養(yǎng)管理體系是對(duì)現(xiàn)有二化螟人工飼料飼養(yǎng)方法的補(bǔ)充完善和改進(jìn)發(fā)展，是一種全新的標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)與管理方法，實(shí)施效果良好，可作為二化螟室內(nèi)人工飼養(yǎng)技術(shù)規(guī)范加以推廣。

1 材料與方法

1.1 飼養(yǎng)材料

1.1.1 主要用品 二化螟飼養(yǎng)管理體系所需的主要材料和設(shè)備包括幼蟲(chóng)及成蟲(chóng)飼養(yǎng)通用的空調(diào)、智能加濕器、多層光照養(yǎng)蟲(chóng)架（長(zhǎng)120～150 cm × 寬45 cm × 高180 cm，幼蟲(chóng)用層間距35 cm，成蟲(chóng)用層間距75 cm）;還包括幼蟲(chóng)飼養(yǎng)管理及配制人工飼料相關(guān)的高溫濕熱滅菌鍋、烘箱、電動(dòng)榨汁機(jī)、電動(dòng)攪拌器、冰箱、無(wú)菌操作臺(tái)、無(wú)菌培養(yǎng)皿（直徑 3.5 cm）、不銹鋼消毒盤(pán)、黑布、松緊帶、鋁飯盒、卷紙、廣口玻璃罐頭瓶（240、350 mL）、打孔瓶蓋（直徑5.3 cm，方形透氣孔1.8 cm× 1.8 cm）、整理箱（長(zhǎng)18 cm × 寬13 cm × 高14 cm）、鋁鍋（直徑28 cm × 高18 cm）、量杯、剪刀、藥匙、移液槍、竹鏟子、鑷子、漏斗、分液吊舀（125 mL）、毛筆、不銹鋼網(wǎng)球（直徑4.5 cm）、干燥缸、不銹鋼刮刀、一次性圓形飯盒（500 mL，底部 直徑8 cm，頂部直徑12 cm，高 8 cm）、打孔飯盒蓋（直徑12 cm，含12個(gè)直徑2 mm透氣孔）。成蟲(chóng)飼養(yǎng)管理相關(guān)的養(yǎng)蟲(chóng)籠（長(zhǎng)40 cm × 寬40 cm × 高60 cm）、產(chǎn)卵苗（制備方法見(jiàn)“1.1.4”節(jié)）、塑料布丁盒（300 mL）、棉花、塑料三角燒瓶（250 mL）等。

1.1.2 主要試劑 二化螟飼養(yǎng)管理所需的主要試劑包括瓊脂條、大豆粉、酵母粉、干酪素、蔗糖、威氏鹽、復(fù)合維生素、膽固醇、頭孢氨芐膠囊、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、山梨酸、抗壞血酸或抗壞血酸鈉、氯化膽堿、甲醛溶液（40%）、植物油、方糖塊（4.5 g/塊）、84消毒液等。

1.1.3 飼養(yǎng)條件 幼蟲(chóng)、成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室及水稻育苗室均為人工氣候室，溫度（28±1） ℃，相對(duì)濕度70%～80%，光周期16 h光照—8 h黑暗。每日需定時(shí)打開(kāi)排風(fēng)扇換氣6～8次，每次15 min。

1.1.4 產(chǎn)卵苗制備 選取螟蛾低抗水稻品種作為產(chǎn)卵苗品種。筆者所在實(shí)驗(yàn)室所用品種為南粳52。通常每周種植15～20杯（約50株/杯）稻苗即可滿足常規(guī)飼養(yǎng)中采集蟲(chóng)卵的用苗需求。具體制備方法如下：

根據(jù)種子千粒質(zhì)量稱取相應(yīng)質(zhì)量的水稻種子，置于整理箱中，漂洗干凈后加水浸泡，置于水稻育苗室[溫度（28±1） ℃，相對(duì)濕度70%～80%，光周期16 h光照：8 h黑暗的人工氣候室]內(nèi)12 h。次日將稻種取出淘洗3～5次后濾干，將雙層濕紗布覆蓋在濕種子上催芽至少24 h，待胚根長(zhǎng)出后播種于盛有營(yíng)養(yǎng)土的200 mL一次性硬質(zhì)塑料杯中，每杯播種約50粒，并用蛭石覆蓋表面，定期澆水，取生長(zhǎng)期10～18 d、株高15～20 cm的水稻苗作為產(chǎn)卵苗。

1.1.5 供試蟲(chóng)源 二化螟室內(nèi)種群的初始蟲(chóng)源由江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，該種群在筆者所在實(shí)驗(yàn)室的養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)連續(xù)重疊循環(huán)飼養(yǎng)累積超過(guò)150批次。

1.2 人工飼料標(biāo)準(zhǔn)化配制流程

二化螟人工飼料中復(fù)合維生素B配方參考李波等的配方[35-36]，新鮮茭白、水等其他組分含量在原有配方基礎(chǔ)上略作調(diào)整。具體配制流程如下：

1.2.1 飼料用量規(guī)格劃分 根據(jù)不同齡期幼蟲(chóng)的食量及單瓶接種蟲(chóng)量差異，劃分3種飼料用量規(guī)格如下：

少量型飼料：1～2齡初孵幼蟲(chóng)食量較小，單瓶接種蟲(chóng)量為800～1 200頭/瓶，飼料需求量較少，約為40 mL/瓶。

大量型飼料：3～4齡幼蟲(chóng)食量較大，單瓶接種蟲(chóng)量為150～200頭/瓶，飼料需求量最大，約為 120 mL/瓶。

中量型飼料：4～5齡幼蟲(chóng)即將化蛹，故食量較小，單瓶接種蟲(chóng)量固定為50頭/瓶，飼料需求量居中，約為60 mL/瓶。

每周配制幼蟲(chóng)人工飼料前，需根據(jù)所有試蟲(chóng)種群規(guī)模提前計(jì)算下1周上述3種規(guī)格飼料的使用量。

1.2.2 相關(guān)用品的準(zhǔn)備 根據(jù)計(jì)算好的3種規(guī)格飼料的使用量，提前將足夠數(shù)量的飼料瓶（即 240 mL 廣口玻璃罐頭瓶）、打孔瓶蓋、無(wú)菌卷紙、分裝飼料用的漏斗、分液吊舀等洗凈、滅菌、烘干。其中飼料瓶和瓶蓋需要用1 ∶100倍稀釋的84消毒液浸泡20 min左右，再用清水洗凈后放入滅菌鍋滅菌。以下均按照筆者所在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)飼養(yǎng)過(guò)程中單周飼料用量準(zhǔn)備各項(xiàng)材料。

1.2.3 材料A的制備 稱取瓊脂條120 g，將其剪成5 cm左右的小段，并將大塊的瓊脂適當(dāng)撕散后放入鋁鍋中。用量杯量取自來(lái)水2 400 mL倒入鋁鍋中，用竹鏟子將瓊脂按壓到水中，浸泡30～45 min，待其泡軟后進(jìn)行步驟“1.2.5”節(jié)。

1.2.4 材料B的制備 提前1～2 d采購(gòu)新鮮茭白1 000 g，置于4 ℃冰箱內(nèi)保存。配制飼料當(dāng)天取出，切成1.5 cm左右見(jiàn)方的小塊。用量杯量取自來(lái)水1 800 mL，將茭白小塊分3～4次放入電動(dòng)榨汁機(jī)打成勻漿，將打好的茭白勻漿倒入另一口鋁鍋中。

稱取大豆粉300 g、酵母粉200 g、干酪素100 g、蔗糖100 g，倒入上述盛有茭白勻漿的鋁鍋中。取1個(gè)電動(dòng)攪拌器的攪拌頭將茭白勻漿和其他4種粉末材料手動(dòng)混合，使粉末浸濕后，再用電動(dòng)攪拌器充分?jǐn)嚢杈鶆颉?/p>

注意事項(xiàng)：由于先加粉末材料再加茭白勻漿攪拌時(shí)，鍋底粉末易結(jié)塊，攪拌不均勻。而先加茭白勻漿再加粉末材料并直接用電動(dòng)攪拌器攪拌時(shí)，粉末容易揚(yáng)塵干擾操作。故采用上述“加茭白勻漿、加粉末材料、手動(dòng)簡(jiǎn)單攪拌、電動(dòng)充分?jǐn)嚢琛钡牟僮髁鞒獭?/p>

1.2.5 滅菌與冷卻 將盛有材料A、B的2口鋁鍋、竹鏟子、鑷子和藥匙放入高溫濕熱滅菌鍋中，其中盛放材料A的鋁鍋置于下方。于121 ℃下滅菌20 min，待冷卻至70～80 ℃，迅速取出進(jìn)行步驟“1.2.8”節(jié)。

注意事項(xiàng)：本步驟耗時(shí)約100 min，需要注意前后步驟的快速銜接?？衫迷摃r(shí)段稱取步驟“1.2.6”節(jié)中所需的材料C，并提前擺放好步驟“1.2.8”節(jié)中所需的飼料瓶。

1.2.6 材料C的制備 稱取威氏鹽1 g、復(fù)合維生素0.171 g、膽固醇2 g、市售頭孢氨芐膠囊2粒（約0.25 g，除去外殼，倒出粉末）、對(duì)羥基苯甲酸甲酯發(fā)10 g、山梨酸10 g、抗壞血酸（或抗壞血酸鈉）30 g、氯化膽堿3 g，置于1個(gè)干凈的350 mL廣口玻璃罐頭瓶中，將上述微量元素粉末混合均勻后備用。用另一個(gè)干凈的350 mL廣口玻璃罐頭瓶取40～50 ℃溫開(kāi)水200 mL備用。

注意事項(xiàng)：（1）氯化膽堿暴露在空氣中容易受潮，因此最后稱取。（2）本步驟中所有藥品需隨用隨配，通?？衫蔑暳蠝缇拈g隙準(zhǔn)備。

1.2.7 材料D的制備 準(zhǔn)備甲醛溶液6 mL、植物油6 mL。

1.2.8 成品飼料的混合與分裝 根據(jù)提前計(jì)算好的少量型、中量型、大量型3種規(guī)格飼料的使用量，將相應(yīng)數(shù)量的飼料瓶提前擺放好，并用鋁箔紙覆蓋瓶口防塵。

取出滅菌鍋中已冷卻至70～80 ℃的材料A、材料B。先用鑷子將材料B攪拌打碎，再將已經(jīng)融化的材料A倒入材料B中，用竹鏟子攪拌使2種材料初步混合均勻。在材料C的微量元素中加入溫開(kāi)水，用藥匙將所有藥品粉末攪拌均勻，待藥品粉末充分溶解后倒入盛有材料A、材料B的鋁鍋中。之后用移液槍量取材料D加入鋁鍋中，用竹鏟子攪拌使所有材料混合均勻?；旌虾蟮娘暳铣善敷w積約為6 500 mL，可分裝筆者所在實(shí)驗(yàn)室單周飼養(yǎng)所需飼料70～100瓶。

用分液吊舀和漏斗將飼料成品分裝于瓶中，完成后用鋁箔紙蓋好。待所有飼料冷卻至28 ℃以下后，取下鋁箔紙，用2張無(wú)菌卷紙覆蓋瓶口，并蓋上打孔瓶蓋。將所有分裝好的飼料置于4 ℃冰箱中冷藏保存。飼料在使用前需提前至少8 h取出，置于人工氣候室內(nèi)回溫，之后方可接入試蟲(chóng)。

注意事項(xiàng)：由于冬季室溫較低，飼料容易凝固，故需要注意加快分裝速度，或提前將室溫升至20 ℃以上。冷藏保存超過(guò)10 d以上的飼料顏色發(fā)黃且水分流失較多，接入試蟲(chóng)后易發(fā)霉，故不建議使用。此外，可根據(jù)實(shí)際配制飼料需求，按比例調(diào)整各項(xiàng)材料和試劑的使用量。

1.3 幼蟲(chóng)36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)流程

筆者所在實(shí)驗(yàn)室采用的二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系，從單個(gè)批次1 d的卵塊采集與接種，到36 d的四蛹（即第4次收蛹）完成該批次所有操作，時(shí)間跨度為36 d（表1），其中涉及的所有步驟均需在無(wú)菌操作臺(tái)上進(jìn)行。此外，根據(jù)實(shí)際用蟲(chóng)需求，可在卵塊采集與接種、分瓶（即第1次換飼料）、二換（即第2次換飼料）這3個(gè)步驟時(shí)保留更多的蟲(chóng)量，用于擴(kuò)大繁殖。具體操作流程如下：

1.3.1 卵塊采集與接種（1 d） 以5 d為1個(gè)周期，更換成蟲(chóng)飼養(yǎng)中獲得的產(chǎn)卵苗，并進(jìn)行卵塊采集與接種。通常于最后一天的人工暗期結(jié)束后，從成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)取出產(chǎn)卵苗，并以最后一天的日期作為編號(hào)新建1個(gè)批次（表1）。次日，將卵塊從水稻葉片上剪下，按照其長(zhǎng)寬劃分為3種規(guī)格。其中大卵塊為長(zhǎng)度15～35 mm、寬度2～5 mm，卵粒數(shù)量100～180粒的卵塊;中卵塊為長(zhǎng)度5～15 mm、寬度2～5 mm，卵粒數(shù)量30～100粒的卵塊;小卵塊為長(zhǎng)度3～5 mm、寬度2～5 mm，卵粒數(shù)量20～30粒的卵塊;其他更小的卵塊及顏色斑駁不均勻的卵塊不收集。因卵塊接種用的無(wú)菌培養(yǎng)皿直徑為35 mm，故需將長(zhǎng)度大于35 mm的大卵塊剪成35 mm以內(nèi)的小段。通常將每個(gè)批次采集到的卵塊平均分為 4～8份（圖1-A），每份含有10～20個(gè)大中卵塊，或20～30個(gè)中小卵塊，隨后進(jìn)行卵塊滅菌及接種。

卵塊滅菌處理時(shí)，取單份卵塊放入不銹鋼網(wǎng)球中，浸沒(méi)于70%乙醇溶液中快速涮洗約20 s，再浸入無(wú)菌水中快速涮洗約20 s，取出后用無(wú)菌卷紙吸干表面殘水，并將卵塊分?jǐn)傞_(kāi)晾干。之后將卵塊移入3.5 cm無(wú)菌培養(yǎng)皿的蓋子或底座中，再移入盛有50 mL甲醛溶液的干燥缸中充分熏蒸約10 min。計(jì)時(shí)結(jié)束后立即取出，置于無(wú)菌風(fēng)下吹約5 min。

卵塊接種時(shí)，取另一個(gè)完整的無(wú)菌培養(yǎng)皿，置于少量型飼料的中央位置，之后用無(wú)菌鑷子取1份已分裝好并完成滅菌處理的卵塊，置于該完整無(wú)菌培養(yǎng)皿上（圖1-B）;完成后用2張無(wú)菌卷紙覆蓋瓶口并蓋上打孔瓶蓋。每3～4個(gè)飼料瓶分裝于1個(gè)整理箱中，用滅菌黑布蓋好整理箱，并用白色松緊帶封口，完成后移入幼蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)保存。本步驟少量型飼料用量為4～8瓶。

1.3.2 取皿（6 d） 在卵塊接種后6 d，幼蟲(chóng)已基本完成孵化，齡期集中在1～2齡。此時(shí)需要進(jìn)行“取皿”，即取出盛放有殘留卵殼的培養(yǎng)皿蓋子或底座，以及飼料中央完整的培養(yǎng)皿，并用小毛筆將完整培養(yǎng)皿底部殘留的幼蟲(chóng)還原回飼料瓶?jī)?nèi)（表1、圖1-C、圖1-D）。完成后蓋上無(wú)菌卷紙和打孔瓶蓋，裝箱并封口后，將整理箱放回幼蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室。

1.3.3 分瓶（10 d） 在卵塊接種后10 d，幼蟲(chóng)已完成至少1次褪皮，齡期集中在2～3齡。此時(shí)需要進(jìn)行“分瓶”，即將舊飼料切分，接種于新飼料瓶中，故該步驟又稱“第1次換飼料”（表1）。通常取1個(gè)無(wú)菌培養(yǎng)皿的蓋子或底座，置于大量型飼料的中央位置，再用藥刮將步驟“1.3.1”節(jié)卵塊接種后被取食過(guò)的舊飼料平均切分成4～6塊，每塊包含約 150～200頭幼蟲(chóng)（圖1-E）;之后隨機(jī)取其中2～3塊舊飼料，分別置于新飼料瓶中央的培養(yǎng)皿蓋子或底座中（圖1-F）。完成后蓋上無(wú)菌卷紙和打孔瓶蓋，裝箱并封口后，將整理箱放回幼蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室。本步驟大量型飼料用量為12～24瓶。

1.3.4 取舊飼料（15 d） 在卵塊接種后15 d，幼蟲(chóng)已完成至少2次褪皮，齡期集中在3～4齡。此時(shí)需要完成“取舊飼料”，即用無(wú)菌鑷子取出步驟“1.3.3”節(jié)分瓶時(shí)盛放有舊飼料殘?jiān)呐囵B(yǎng)皿蓋子或底座，挑揀出殘?jiān)械挠紫x(chóng)，還原回飼料瓶?jī)?nèi)（表1、圖1-G）。完成后蓋上無(wú)菌卷紙和打孔瓶蓋，裝箱并封口后，將整理箱放回幼蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室。

1.3.5 二換（20 d） 在卵塊接種后20 d，幼蟲(chóng)齡期集中在4～5齡。此時(shí)需要進(jìn)行“二換”，即“第2次換飼料”（表1）。通常隨機(jī)取出步驟“1.3.4”節(jié)舊飼料瓶中的100頭幼蟲(chóng)，分別投入2瓶中量型飼料中，每瓶50頭（圖1-H）。 完成后蓋上無(wú)菌卷紙和打孔瓶蓋，裝箱并封口后，將整理箱放回幼蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室。本步驟中量型飼料用量為24～48瓶。筆者所在實(shí)驗(yàn)室單個(gè)批次二換時(shí)通常保留1 200～1 600頭幼蟲(chóng)，分裝入6～8個(gè)整理箱中保存，用于后續(xù)4次收集蟲(chóng)蛹。

1.3.6 一蛹（24 d） 在卵塊接種后24 d，幼蟲(chóng)齡期集中在5齡，且有部分幼蟲(chóng)即將開(kāi)始化蛹，此時(shí)需要進(jìn)行“一蛹”，即“第1次收集蟲(chóng)蛹”（表1）。通常取1個(gè)500 mL一次性圓形飯盒，并在底部加入圓形卷紙片或?yàn)V紙片，作為收蛹盒。之后用無(wú)菌鑷子取出步驟“1.3.5”節(jié)飼料瓶中、瓶蓋上及無(wú)菌卷紙內(nèi)已褪皮成形的蛹，置于收蛹盒中。用鑷子清除飼料表面及飼料瓶側(cè)壁上的蟲(chóng)糞，將幼蟲(chóng)還原回飼料瓶?jī)?nèi)（圖1-I）。完成后蓋上無(wú)菌卷紙和打孔瓶蓋，裝箱并封口后，將整理箱放回幼蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室。當(dāng)盒內(nèi)收集蛹量達(dá)到約200頭時(shí)，更換新的收蛹盒。收集到的蛹移入成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)保存。

1.3.7 二蛹（28 d） 在卵塊接種后28 d，幼蟲(chóng)進(jìn)入化蛹高峰，此時(shí)需要進(jìn)行“二蛹”，即“第2次收集蟲(chóng)蛹”（表1）。具體操作流程同“一蛹”。

1.3.8 三蛹（32 d） 在卵塊接種后32 d，幼蟲(chóng)的化蛹高峰即將結(jié)束，此時(shí)需要進(jìn)行“三蛹”，即“第3次收集蟲(chóng)蛹”（表1）。具體操作流程同“一蛹”。

1.3.9 四蛹（36 d） 在卵塊接種后36 d，幼蟲(chóng)的化蛹高峰基本結(jié)束，僅有少量幼蟲(chóng)未完成化蛹。此時(shí)需要進(jìn)行“四蛹”，即“第4次收集蟲(chóng)蛹”（表1）。具體操作流程基本同“一蛹”。完成后用藥匙清理瓶中所有飼料殘?jiān)坝紫x(chóng)，集中冷凍48 h后處理，結(jié)束該批次的飼養(yǎng)。之后整理清空的飼料瓶、瓶蓋、黑布等相關(guān)用品，洗凈、滅菌、烘干后循環(huán)使用。

通常本步驟收集到的蟲(chóng)蛹數(shù)量小于200頭，故無(wú)需更換新的收蛹盒。此外，筆者所在實(shí)驗(yàn)室單個(gè)批次二換時(shí)通常保留1 200～1 600頭幼蟲(chóng)，故上述4次收蛹操作累積可獲得約1 000～1 300頭蛹（5～6盒）。

按照上述飼養(yǎng)流程，單個(gè)批次幼蟲(chóng)飼養(yǎng)全程為36 d，前后2個(gè)批次初始日期間隔為5 d，每30 d可新建6個(gè)批次，從而實(shí)現(xiàn)多個(gè)不同批次的重疊循環(huán)飼養(yǎng)。

1.3.10 注意事項(xiàng) 除卵塊采集以外的所有步驟，即從卵塊的滅菌和接種至四蛹的所有步驟均需在無(wú)菌操作臺(tái)上進(jìn)行。如發(fā)現(xiàn)飼料瓶?jī)?nèi)有細(xì)菌、真菌或病毒污染，應(yīng)立刻將該飼料瓶取出，嚴(yán)禁打開(kāi)瓶蓋，應(yīng)直接放入滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理后方可清洗。幼蟲(chóng)飼養(yǎng)所需的鑷子、藥匙、飼料瓶、卷紙等相關(guān)物品和工具需提前洗凈、滅菌、烘干。

1.4 成蟲(chóng)飼養(yǎng)操作規(guī)范

將幼蟲(chóng)飼養(yǎng)中收集到的蛹移入成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室，開(kāi)始成蟲(chóng)階段的飼養(yǎng)。具體操作流程如下： （1）取1個(gè)成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)籠，置于成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室的多層光照養(yǎng)蟲(chóng)架上。取1個(gè)300 mL一次性塑料碗，加入適量棉花及10%蔗糖水作為糖水碗。將糖水碗置于養(yǎng)蟲(chóng)籠中央，用于成蟲(chóng)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。 （2）取全新的產(chǎn)卵苗4～5杯、幼蟲(chóng)飼養(yǎng)所得的收蛹盒2～3個(gè)（含蛹約400～600頭），置于養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)，且均勻分散于糖水碗周圍。（3）通常在將收蛹盒移入成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室后的3～5 d為該盒蛹的成蟲(chóng)羽化高峰。待成蟲(chóng)大量羽化并交配產(chǎn)卵后，可取出產(chǎn)卵苗采集蟲(chóng)卵，并按照上文所述各步驟，重復(fù)幼蟲(chóng)人工飼料的配制，以及不同批次幼蟲(chóng)36 d飼養(yǎng)和成蟲(chóng)飼養(yǎng)的重疊循環(huán)飼養(yǎng)過(guò)程。（4）在將收蛹盒移入成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室后的第10 d，籠內(nèi)成蟲(chóng)基本死亡后，清理養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)的成蟲(chóng)尸體、產(chǎn)卵苗、糖水碗和收蛹盒，將養(yǎng)蟲(chóng)籠打掃干凈，用于循環(huán)使用。

注意事項(xiàng)：幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)室、水稻育苗室、無(wú)菌接種室需定期清潔，通常以每周打掃1次為宜。

1.5 適合度參數(shù)調(diào)查

采用上述方法重疊循環(huán)飼養(yǎng)二化螟室內(nèi)種群，并抽樣調(diào)查10個(gè)批次的9項(xiàng)適合度參數(shù)。其中每個(gè)批次取皿時(shí)調(diào)查約15個(gè)卵塊的孵化率，分瓶時(shí)調(diào)查約300頭幼蟲(chóng)的存活率，二換時(shí)調(diào)查約350頭幼蟲(chóng)的存活率，四蛹結(jié)束后調(diào)查200頭幼蟲(chóng)的化蛹率、30～40頭雌雄蛹的蛹質(zhì)量、約200頭蛹的成蟲(chóng)羽化率及雌雄比、10頭雌蟲(chóng)的產(chǎn)卵量。

1.6 數(shù)據(jù)分析

采用R 3.1.0 軟件對(duì)抽樣調(diào)查的9項(xiàng)適合度參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。其中，卵孵化率、幼蟲(chóng)存活率、化蛹率、羽化率、雌雄比采用Fisher概率檢測(cè)和Ryan多重比較進(jìn)行差異顯著性分析（P<0.05）;雌雄蛹質(zhì)量和單雌產(chǎn)卵量采用方差分析（ANOVA）和Tukey-Kramer多重比較進(jìn)行差異顯著性分析（P<0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)體系下二化螟的適合度參數(shù)

抽樣調(diào)查36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系下飼養(yǎng)的10個(gè)批次二化螟的9項(xiàng)適合度參數(shù)見(jiàn)表2。結(jié)果顯示除了分瓶幼蟲(chóng)存活率、 化蛹率和雌雄比中的1個(gè)批次以外，其余各批次的各項(xiàng)適合度參數(shù)之間均無(wú)顯著性差異。其中卵孵化率為（89.4±0.3）%，分瓶幼蟲(chóng)存活率為（92.6±0.8）%，二換幼蟲(chóng)存活率為（91.5±0.6）%，化蛹率為（87.1±1.1）%，羽化率為（91.1±0.5）%，均大于80%。雌、雄蛹質(zhì)量分別為（79.1±0.6） mg、（60.1±0.5） mg，單雌產(chǎn)卵量為（206.7±3.6）粒。種群健康穩(wěn)定，未出現(xiàn)退化現(xiàn)象。結(jié)果表明，二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系可以滿足室內(nèi)種群長(zhǎng)期繼代飼養(yǎng)的基本需求。

2.2 循環(huán)飼養(yǎng)流程及耗時(shí)

筆者所在實(shí)驗(yàn)室依照上述標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)體系飼養(yǎng)二化螟室內(nèi)種群時(shí)，以36 d為1個(gè)飼養(yǎng)周期，建立單個(gè)批次飼養(yǎng)操作流程時(shí)間軸（表1）。以A月第25～30天成蟲(chóng)所產(chǎn)卵塊新建的飼養(yǎng)批次為例。該批次編號(hào)為A-30，在第1天進(jìn)行卵塊采集與接種，第6天進(jìn)行取皿，直到第36天進(jìn)行四蛹并結(jié)束該批次的飼養(yǎng)。其中第1、10、20天的飼料使用量分別為少量型4～8瓶、大量型12～24瓶，中量型24～48瓶。其余批次各項(xiàng)操作的時(shí)間軸以此類推。以每月30 d為例，建立單月循環(huán)飼養(yǎng)操作流程（表3）。故每月可新建6個(gè)批次（例如C-05至C-30），并結(jié)束上一階段開(kāi)始的6個(gè)批次的飼養(yǎng)（如A-25至B-20）。

如表3所示，以單個(gè)批次接種卵塊4～8瓶，二換時(shí)保留幼蟲(chóng)1 200～2 400頭為例，單個(gè)批次的各項(xiàng)常規(guī)飼養(yǎng)操作耗時(shí)如下：（1）卵塊采集與接種耗時(shí)3.0～4.0 h;（2）取皿耗時(shí)約0.2 h;（3）分瓶耗時(shí)約1.0 h;（4）取舊飼料耗時(shí)約0.8 h;（5）二換耗時(shí)2.0～4.0 h;（6）一蛹耗時(shí)2.0～4.0 h;（7）二蛹耗時(shí)2.5～5.0 h;（8）三蛹耗時(shí)1.0～2.0 h;（9）四蛹耗時(shí)1.5～3.0 h。故單個(gè)批次常規(guī)飼養(yǎng)耗時(shí)（不含配制飼料耗時(shí)）為14.0～24.0 h，可獲得1 000～2 000頭蛹;每月常規(guī)飼養(yǎng)操作耗時(shí)約為84.0～144.0 h。

此外，每月還需完成幼蟲(chóng)及成蟲(chóng)飼養(yǎng)管理相關(guān)的多項(xiàng)其他操作（表3）。以單個(gè)批次接種卵塊4～8瓶，二換時(shí)保留幼蟲(chóng)1 200～2 400頭為例，其他各項(xiàng)相關(guān)操作及具體耗時(shí)如下：（1）養(yǎng)蟲(chóng)室打掃及養(yǎng)蟲(chóng)籠的清理，耗時(shí)約2 h/周;（2）育苗室及養(yǎng)蟲(chóng)室稻苗澆水3次，耗時(shí)約3 h/周;（3）成蟲(chóng)養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)糖水碗、收蛹盒和采卵苗的準(zhǔn)備，耗時(shí)約1 h/周;（4）配制人工飼料所需飼料瓶等用具的清洗、滅菌和烘干，耗時(shí)約3.5～6.0 h/周;（5）浸種、催芽和產(chǎn)卵苗種植等相關(guān)操作，耗時(shí)約2.5 h/周;（6）每月飼養(yǎng)6個(gè)批次需配制3～6次人工飼料：耗時(shí)約4 h/次，即單個(gè)批次飼養(yǎng)全程所需飼料的配制耗時(shí)為2～4 h。故每月其他操作耗時(shí)約為63～86 h。每月常規(guī)飼養(yǎng)操作及其他操作耗時(shí)共計(jì)147～230 h。

3 討論與結(jié)論

二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系通過(guò)劃分幼蟲(chóng)人工飼料用量、規(guī)范各項(xiàng)飼養(yǎng)操作的時(shí)間節(jié)點(diǎn)、加強(qiáng)飼養(yǎng)全程的管理、多批次重疊循環(huán)飼養(yǎng)等方法，使所得種群健康穩(wěn)定，各項(xiàng)適合度指標(biāo)良好，飼養(yǎng)效率亦得到了極大地提高。該體系以每5 d采集到的蟲(chóng)卵作為1個(gè)批次，并進(jìn)行多批次重疊循環(huán)飼養(yǎng)，因此每5 d中有4 d可以收集到蟲(chóng)蛹;且不同批次成蟲(chóng)羽化高峰互相重疊，消除了整個(gè)種群雌雄蟲(chóng)羽化高峰與低谷的時(shí)間限制（表1、表3）。利用這種全新的管理體系進(jìn)行室內(nèi)繼代和規(guī)模化飼養(yǎng)時(shí)，每天均可獲得一定數(shù)量的蛹、羽化成蟲(chóng)、新鮮蟲(chóng)卵及不同齡期的幼蟲(chóng)，可以極大地滿足多類型試驗(yàn)的用蟲(chóng)需求。

筆者所在實(shí)驗(yàn)室已采用該體系連續(xù)飼養(yǎng)二化螟累積超過(guò)150批次。飼養(yǎng)過(guò)程中的各批次適合度指標(biāo)均保持較高水平，且不同批次之間的各項(xiàng)參數(shù)基本一致（表2）。卵孵化率、幼蟲(chóng)存活率、化蛹率、羽化率均高于80%，與已報(bào)道的1～3代人工飼料配方的飼養(yǎng)效果[30，31，35]基本一致。雌、雄蛹質(zhì)量分別為（79.1±0.6）、（60.1±0.5） mg，與尚稚珍等的結(jié)果[30]基本持平，但優(yōu)于其他已報(bào)道的人工飼養(yǎng)方法[31]。單雌產(chǎn)卵量為（206.7±3.6）粒，與戴長(zhǎng)庚等的報(bào)道[4，25]基本一致，但優(yōu)于其他飼養(yǎng)方法[26，30，33，35-36]。因此，本體系在提高室內(nèi)種群各項(xiàng)適合度參數(shù)的綜合效果上，優(yōu)于其他飼養(yǎng)方法，尤其是可以使產(chǎn)卵量和蛹質(zhì)量同時(shí)提高;所得二化螟室內(nèi)種群健康穩(wěn)定，再未出現(xiàn)退化現(xiàn)象;說(shuō)明本飼養(yǎng)管理體系可以很好滿足種群長(zhǎng)期繼代飼養(yǎng)的基本需求。

如表3所示，本飼養(yǎng)管理體系下單個(gè)批次常規(guī)飼養(yǎng)耗時(shí)為14～24 h，對(duì)應(yīng)用量的飼料配制耗時(shí)為2～4 h，可獲得1 000～2 000頭蛹，與胡陽(yáng)等所述飼養(yǎng)耗時(shí)[31]基本一致。說(shuō)明本體系有效地降低了人工耗時(shí)，提高了飼養(yǎng)效率，并且能夠保證正常的室內(nèi)繼代和規(guī)?；曫B(yǎng)。通過(guò)在飼養(yǎng)過(guò)程中設(shè)置相關(guān)操作的時(shí)間節(jié)點(diǎn)，可使日常管理更加規(guī)范化;多批次重疊循環(huán)飼養(yǎng)不僅使每日的飼養(yǎng)工作量均勻分散，避免了單個(gè)批次大量飼養(yǎng)時(shí)某項(xiàng)操作（如二換、一蛹）的工作量過(guò)分集中的問(wèn)題，而且有利于室內(nèi)種群的健康穩(wěn)定發(fā)展。在幼蟲(chóng)飼養(yǎng)過(guò)程中，通過(guò)改變卵塊采集與接種（1 d）、分瓶（10 d）、二換（20 d）這3個(gè)步驟的初始蟲(chóng)量，可以隨時(shí)擴(kuò)大繁殖量，僅需很短的等待周期（1～5 d），便可滿足不同蟲(chóng)齡的大規(guī)模用蟲(chóng)需求。

在幼蟲(chóng)期飼養(yǎng)管理方面，由于28 ℃下二化螟的卵塊在被產(chǎn)下后的5～6 d進(jìn)入黑頭期[22-23]，故本飼養(yǎng)管理體系以5 d為間隔周期新建批次，保證了在幼蟲(chóng)孵化前完成卵塊的采集和接種，有效地避免了蟲(chóng)量損失。本體系所采用的罐頭瓶飼養(yǎng)法操作相對(duì)簡(jiǎn)單，單瓶處理蟲(chóng)量明顯大于指形管飼養(yǎng)法[35-36]，幼蟲(chóng)飼養(yǎng)前期（即卵塊接種至分瓶）和后期（即分瓶至二換）單個(gè)容器的處理蟲(chóng)量分別擴(kuò)大了10～60倍和12～25倍，極大地節(jié)約了人工耗時(shí);且本體系對(duì)初孵幼蟲(chóng)及2～3齡幼蟲(chóng)的干擾極小，有效地避免了單頭轉(zhuǎn)移可能帶來(lái)的幼蟲(chóng)身體損傷和疾病感染等風(fēng)險(xiǎn)[31]。此外，與接入蟲(chóng)卵后第14～15 d更換1次飼料的指形管飼養(yǎng)法相比，本體系在幼蟲(chóng)飼養(yǎng)全程的第10、20 d更換2次飼料，更能保證人工飼料的新鮮度，因而有效地提高了蛹質(zhì)量與存活率[30]。

在化蛹管理方面，與需要單獨(dú)收集老熟幼蟲(chóng)的三角瓶收蛹法[30]相比，本飼養(yǎng)管理體系在一蛹至四蛹的整個(gè)化蛹過(guò)程中所選用的飼養(yǎng)容器廣口罐頭瓶更易操作，且僅需每隔4 d集中收集瓶?jī)?nèi)及瓶蓋墊紙上已經(jīng)成形的蛹，減少了對(duì)幼蟲(chóng)化蛹的人為干擾，簡(jiǎn)化了操作步驟，節(jié)約了人工耗時(shí)。由于現(xiàn)有二化螟人工飼養(yǎng)方法中對(duì)化蛹管理的描述不夠細(xì)致，或觀察和收集蟲(chóng)蛹的時(shí)間間隔不明確[23，35]，本體系首次將收集蟲(chóng)蛹的時(shí)間固定為卵塊接種后第24～36 d，間隔為4 d。其中間隔4 d的方法，既保證了蟲(chóng)蛹不會(huì)在飼料瓶?jī)?nèi)羽化，也在一定程度上避免了少量老熟幼蟲(chóng)化蛹前取食蟲(chóng)蛹造成的損失。此外，到第36天的“四蛹”時(shí)，已經(jīng)可以收集到足夠的蛹（化蛹率>80%），可充分保證室內(nèi)種群的正常繁衍。因此，本體系中單個(gè)批次幼蟲(chóng)飼養(yǎng)時(shí)間截止于第36日。

在成蟲(chóng)的羽化管理方面，由于二化螟室內(nèi)人工飼養(yǎng)中雌雄蛹發(fā)育進(jìn)度不一致，故單個(gè)批次持續(xù)飼養(yǎng)時(shí)通常需要對(duì)雌雄蛹分別進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)，使兩性羽化高峰一致，以提高交配及產(chǎn)卵質(zhì)量[35]。而本研究的循環(huán)飼養(yǎng)與交配方法（即多批次重疊循環(huán)飼養(yǎng)法），消除了雌雄蟲(chóng)羽化高峰與低谷的時(shí)間限制，因此節(jié)約了單個(gè)批次持續(xù)飼養(yǎng)時(shí)溫度調(diào)節(jié)、雌雄蛹區(qū)分等相關(guān)操作的人工耗時(shí)，避免了種群生活力衰退的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)保證了種群基因庫(kù)的完整[23，29-30]。因此，本體系更利于二化螟室內(nèi)種群的健康穩(wěn)定發(fā)展。

在滅菌管理方面，本研究不僅將飼養(yǎng)相關(guān)的飼料瓶、黑布等用具進(jìn)行滅菌，也注意常規(guī)飼養(yǎng)和飼料配制中使用工具的滅菌，以及被污染物的及時(shí)處理和養(yǎng)蟲(chóng)室的定期清潔。此外，由于本研究所述卵塊接種至化蛹的飼養(yǎng)全過(guò)程均在無(wú)菌操作臺(tái)上完成，很好地避免了病原菌的傳播和感染風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系通過(guò)區(qū)分幼蟲(chóng)人工飼料用量、規(guī)范各項(xiàng)飼養(yǎng)操作的時(shí)間節(jié)點(diǎn)、加強(qiáng)飼養(yǎng)全程的管理、多批次重疊循環(huán)飼養(yǎng)等方法，所得二化螟種群健康穩(wěn)定，各項(xiàng)生物學(xué)指標(biāo)良好。該體系可使飼養(yǎng)工作量均勻分散，避免了單批次飼養(yǎng)時(shí)工作量過(guò)分集中的問(wèn)題，飼養(yǎng)效率亦得到了極大地提高。二化螟36 d標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)技術(shù)與管理體系具有操作簡(jiǎn)單、管理規(guī)范、實(shí)用性強(qiáng)、節(jié)約人工等優(yōu)點(diǎn)，不僅可以滿足室內(nèi)種群長(zhǎng)期繼代飼養(yǎng)的基本需求，而且可以隨時(shí)擴(kuò)繁，極大方便了各類試驗(yàn)中不同蟲(chóng)齡、不同蟲(chóng)態(tài)的大規(guī)模用蟲(chóng)需求，也可以用于維持二化螟重要種群或品系。該體系是對(duì)現(xiàn)有人工飼養(yǎng)方法的補(bǔ)充完善和改進(jìn)發(fā)展，是一種全新的標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)與管理方法，實(shí)施效果良好，可作為二化螟室內(nèi)人工飼養(yǎng)技術(shù)規(guī)范加以推廣。

致謝：感謝江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院黃水金老師提供二化螟室內(nèi)種群原始蟲(chóng)源，感謝江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所朱鎮(zhèn)老師及江蘇明天種業(yè)科技股份有限公司王平老師提供南梗52水稻種子。

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