郭 飛 劉韶娜 張 斌 方 晨 趙智勇 沙 茜 趙素梅 趙彥光*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明650201；2.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明650224）

我國地方豬種具有抗逆性強(qiáng)、肉質(zhì)優(yōu)良等特點(diǎn)，不同地方豬種抗逆能力也有差異，主要表現(xiàn)在耐寒、耐熱、耐粗飼、對饑餓的耐受力、抗病力等方面[1]。目前對于地方豬的抗逆能力描述多是概念性的，未見相應(yīng)量化研究報(bào)道。迪慶藏豬和滇南小耳豬均為云南特有的地方豬種資源，且具有較強(qiáng)抗逆能力，可作為抗逆性研究理想模型。在豬的生長階段中，哺乳期因消化器官不發(fā)達(dá)、消化機(jī)能不完善、缺乏先天免疫力等因素，導(dǎo)致其體溫調(diào)節(jié)能力差，仔豬腹瀉率、死亡率明顯高于其他生理階段，抵抗疾病能力較差[2]，此階段可作為驗(yàn)證抗逆特性最好的生理階段。為探討豬的抗逆能力的品種差異，以及通過營養(yǎng)手段進(jìn)行干預(yù)的可行性，本試驗(yàn)人為設(shè)置了一些應(yīng)激條件，通過飼養(yǎng)試驗(yàn)，測定哺乳仔豬的平均日采食量、體增重、腹瀉頻率和死亡率，初步對豬的抗逆能力進(jìn)行量化比較研究，試圖挖掘地方豬種的抗逆潛力，并探究營養(yǎng)等手段干預(yù)豬抗逆能力的可行性，從而為豬抗逆性的相關(guān)研究提供一定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

以杜洛克為父本，滇南小耳豬和迪慶藏豬分別為母本進(jìn)行雜交，根據(jù)血緣、體重相近（0.9±0.23）kg、公母各半原則，從產(chǎn)期相近的12窩雜交F1代（滇南小耳豬和迪慶藏豬血緣各占50%，杜洛克血緣占50%，分別簡稱杜滇和杜藏）發(fā)育正常且健康的初生仔豬中，每窩選取4頭，共48頭為試驗(yàn)動物。

1.2 高能低蛋白代乳粉日糧設(shè)計(jì)

參照肉脂型地方豬5～8 kg 飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 65—2004）設(shè)計(jì)高能低蛋白代乳粉日糧配方，配方組成及營養(yǎng)水平見表1，采購優(yōu)質(zhì)原料，按相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)配制代乳粉。所需添加的復(fù)合益生菌由云南畜牧獸醫(yī)科學(xué)院養(yǎng)豬與動物營養(yǎng)研究所提供，詳見表2。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用雙因素交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將仔豬分為3組，設(shè)置母乳飼喂（母乳組）和人工飼喂（代乳粉組）、益生菌組，每個處理的杜藏、杜滇仔豬各8 頭，公母各半，具體分組見表3。人工飼喂的仔豬采取群養(yǎng)單飼。試驗(yàn)于仔豬5 日齡斷奶后進(jìn)行分組預(yù)飼，7 日齡開始正式試驗(yàn)，28日齡結(jié)束，試驗(yàn)期22 d。

表1 代乳粉組成和營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 益生菌組所用益生菌的添加量

表3 試驗(yàn)動物分組情況

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)仔豬飼養(yǎng)于同一豬舍，舍內(nèi)設(shè)有保溫?zé)?，平均溫度保持?7～32 ℃之間。母乳組通過寄養(yǎng)的方式由母豬哺育（母豬哺育能力為8～10頭）。人工飼喂需要對代乳粉進(jìn)行調(diào)制。代乳粉的調(diào)制方法：將代乳粉與50～65 ℃的溫開水按1∶6 的比例沖調(diào)配制成代乳粉液，冷卻至40 ℃左右飼喂，益生菌組在每天飼喂前添加益生菌。代乳粉組和益生菌組的仔豬5 日齡斷奶后進(jìn)行群養(yǎng)單飼，配好代乳粉，利用豬用奶瓶單頭進(jìn)行人工飼喂。5～7日齡進(jìn)行預(yù)飼和教食，少量多喂并觀察每頭仔豬的采食情況，7 日齡時試驗(yàn)正式開始。試驗(yàn)的第1～2 d每日每頭次飼喂6次，第3～4 d飼喂5 次，第5 d 開始每天每頭次飼喂4 次至21 日齡，21 日齡后減少至每天3 次，每次飼喂仔豬自由采食，記錄每頭仔豬代乳粉的日采食量。從21 日齡開始，對3個組的仔豬定量補(bǔ)伺少許乳豬料。試驗(yàn)期間，除飼喂方式不同外，其余飼養(yǎng)管理方式均相同。

1.5 指標(biāo)測定與方法

1.5.1 采食量

對照組因母豬哺育，無法收集母乳采食量數(shù)據(jù)。試驗(yàn)組每頭仔豬代乳粉采食量依據(jù)公式（1）計(jì)算，并按照代乳粉∶水為1∶6的配制比例折算為代乳粉采食量。

1.5.2 增重

分別在7、21、28 日齡早晨8 點(diǎn)進(jìn)行稱重，記錄每頭仔豬體重，按階段計(jì)算仔豬體重變化。

1.5.3 腹瀉指標(biāo)

每天觀察試驗(yàn)仔豬的健康情況，統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)階段的腹瀉仔豬頭次數(shù)，作為仔豬腹瀉頻率。同時記錄仔豬死亡情況，計(jì)算死淘率，具體見公式（2）。

1.5.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Exel 2010 統(tǒng)計(jì)，結(jié)果以”平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤“表示。所有數(shù)據(jù)利用SPSS 22.0 進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用General Linear Model進(jìn)行分析，并以LSD 進(jìn)行多重比較，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用Kruskal-Wallis 多樣本秩和檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析，P＜0.05視為差異顯著。腹瀉頻率為次數(shù)資料，利用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 品種與飼喂方式對新生仔豬平均日采食量的影響（見表4）

表4所示，品種對7～20日齡仔豬平均日采食量無顯著影響（P＞0.05），對21～28、7～28 日齡仔豬平均日采食量具有顯著影響（P＜0.05）；飼喂方式對7～20、21～28 日齡和7～28 日齡仔豬平均日采食量影響顯著（P＜0.05），益生菌組與代乳粉組相比，7～20、21～28日齡及7～28 日齡的仔豬平均日采食量分別提高了7.64、14.10、10.36 g；品種與飼喂方式互作對不同日齡仔豬平均日采食量均有顯著影響（P＜0.05）。

表4 品種與飼喂方式對新生仔豬平均日采食量的影響(g)

2.2 品種與飼喂方式對新生仔豬體增重的影響（見表5）

如表5 所示，在7～20、21～28、7～28 日齡各階段，杜藏仔豬的體增重均高于杜滇仔豬，但差異不顯著（P＞0.05）；飼喂方式顯著影響仔豬體增重（P＜0.05），母乳組仔豬體增重顯著高于代乳粉組和益生菌組（P＜0.05），代乳粉組與益生菌組7～20 日齡仔豬的體增重呈負(fù)增長，但益生菌組的負(fù)增長值小于代乳粉組。

表5 品種與飼喂方式對新生仔豬體增重的影響(kg)

2.3 品種與飼喂方式對新生仔豬腹瀉及死淘率的影響（見表6）

如表6 所示，仔豬的腹瀉頻率與品種顯著相關(guān)（P＜0.05），在7～20、21～28、7～28 日齡階段的杜滇仔豬腹瀉頻率均高于杜藏仔豬，7～20 日齡時杜滇仔豬和杜藏仔豬腹瀉最嚴(yán)重，杜滇仔豬較杜藏仔豬高13.7 個百分點(diǎn)；杜滇仔豬的死淘率為25%，杜藏仔豬無死亡。仔豬的腹瀉頻率與飼養(yǎng)方式顯著相關(guān)（P＜0.05），7～20、21～28、7～28 日齡仔豬的腹瀉頻率表現(xiàn)為代乳粉組＞益生菌組＞母乳組；代乳粉組與益生菌組的死淘率均為12.5%，母乳組無仔豬死亡。

表6 品種與飼喂方式對新生仔豬腹瀉及死淘率的影響

3 討論

3.1 品種對仔豬抗逆能力的影響

滇南小耳豬與迪慶藏豬是云南特有的地方豬種，前者主要分布在熱帶、亞熱帶低海拔地區(qū)，具有耐高溫潮濕、抗逆性強(qiáng)的種質(zhì)特性[3]；后者主要分布在寒冷、干燥、低氧的高原地區(qū)，長期以來形成了四肢結(jié)實(shí)、抗逆性強(qiáng)、抗病力強(qiáng)、耐粗飼等適應(yīng)高原生態(tài)環(huán)境的種質(zhì)特性[4]。本研究發(fā)現(xiàn)，含有50%迪慶藏豬血緣的杜藏仔豬對人為設(shè)置的應(yīng)激條件的抵抗能力比具有50%滇南小耳豬血緣的杜滇仔豬強(qiáng)，不同日齡階段杜藏仔豬平均日采食量、體增重、腹瀉頻率、死淘率均優(yōu)于杜滇仔豬，表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗逆性，這可能與作為母本的迪慶藏豬、滇南小耳豬的影響息息相關(guān)。線粒體遺傳遵循嚴(yán)格的母系遺傳，當(dāng)前許多動物對惡劣環(huán)境的適應(yīng)性研究也是從線粒體基因組角度入手[5]，線粒體微衛(wèi)星（mitochondrial microsatellite, mtMs）豐富的變異和特有結(jié)構(gòu)與動物的長期適應(yīng)性進(jìn)化有關(guān)，有研究發(fā)現(xiàn)，與多個豬種相比，藏豬的mtMs復(fù)合結(jié)構(gòu)多達(dá)8 個，且RARCRE為藏豬特有mtMs，藏豬在長期進(jìn)化中可能擁有適應(yīng)高海拔和高寒環(huán)境的mtDNA 遺傳基礎(chǔ)[6]。此外，有研究表明，母體乳汁、腸道、產(chǎn)道、糞便等母源微生物會通過垂直傳遞影響新生仔豬腸道黏膜微生物的定植[7]，白浩男[8]通過藏豬盲腸內(nèi)容物的16S rDNA高通量測序發(fā)現(xiàn)，相比于其他豬種，藏豬的擬桿菌門、螺旋體門細(xì)菌物種相對豐度較高而厚壁菌門、腸桿菌科細(xì)菌較低，這一獨(dú)特的菌群結(jié)構(gòu)可能與藏豬草食、抗病、抗逆的種質(zhì)特性密切相關(guān)；李卓君[9]通過藏豬腸道菌群功能預(yù)測分析表明，藏豬群體特有的微生物或許與藏豬的抗逆、抗病和耐粗等種質(zhì)特性相關(guān)。總之，作為母本的迪慶藏豬可能通過線粒體遺傳、母源微生物的垂直傳遞等方式影響杜藏仔豬的抗逆能力，但具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

3.2 不同飼喂方式對仔豬抗逆能力的影響

有研究指出，在日糧中添加的益生菌可通過競爭抑制作用、刺激宿主免疫系統(tǒng)提高宿主免疫功能，通過有機(jī)酸、多種消化酶及生物活性物質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)宿主的營養(yǎng)消化吸收，通過改善腸道微生態(tài)環(huán)境促進(jìn)宿主的腸道健康[10]。本研究中的益生菌組仔豬日糧是在代乳粉組配方的基礎(chǔ)上添加了益生菌，在不同日齡階段，益生菌組平均日采食量顯著高于代乳粉組，腹瀉頻率較代乳粉組低，表明仔豬飼糧中添加益生菌可提高仔豬采食量，降低腹瀉頻率，改善仔豬抗逆能力。曾秀玲等[11]、陳寶劍等[12]研究也指出益生菌對仔豬的生長具有顯著的益生作用。此外，本研究中人為設(shè)置的應(yīng)激因素包括兩個方面，一方面是仔豬過早斷奶產(chǎn)生的斷奶應(yīng)激，另一方面是代乳粉取代母乳的營養(yǎng)應(yīng)激。無論是斷奶應(yīng)激和營養(yǎng)應(yīng)激均會對仔豬造成諸多不利影響[13-14]。本研究發(fā)現(xiàn)，與母乳組相比，在仔豬早期階段代乳粉組和益生菌組的仔豬體增重呈負(fù)值，但益生菌組的負(fù)增長值小于代乳粉組，體增重呈負(fù)值可能是由于仔豬需要適應(yīng)試驗(yàn)中人為設(shè)置的應(yīng)激因素，但益生菌的添加可減緩應(yīng)激對仔豬的影響。總之，添加益生菌可以改善仔豬的抗逆能力，這也意味著通過營養(yǎng)手段可以干預(yù)豬抗逆能力。

4 結(jié)論

杜藏仔豬抗逆能力強(qiáng)于杜滇仔豬，這可能與母系的品種差異有關(guān)；添加益生菌提高了仔豬的采食量，降低了仔豬腹瀉頻率，改善了仔豬抗逆能力，表明通過營養(yǎng)手段干預(yù)仔豬抗逆能力的可行性。