張黎明，馮勝男，肖紅志

（山東省榮成市大疃鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，山東威海 264302）

近年來，蘋果病毒日漸嚴(yán)重，減慢了蘋果產(chǎn)業(yè)發(fā)展步伐。當(dāng)蘋果植株侵染病毒后，長勢逐漸減弱，植株生長機(jī)理遭受嚴(yán)重破壞，不僅對產(chǎn)量造成了嚴(yán)重影響，而且還會降低蘋果品質(zhì)[1]。目前，蘋果病毒病種類較多，表現(xiàn)出不同病狀。作者根據(jù)多年經(jīng)驗(yàn)積累，總結(jié)了一些蘋果植株上病毒發(fā)病癥狀、特點(diǎn)及防治技術(shù)[2]。本文以褪綠葉斑病毒為例，對蘋果病毒病危害進(jìn)行深入探究，針對不同部位，制定防治方案。

1 常見的蘋果病毒病種類及病狀

1.1 常見的蘋果病毒病種類

目前，蘋果產(chǎn)區(qū)常見的病毒主要有褪綠葉斑病毒（ACLSV）、荊痘病毒、銹果病毒、花葉病毒、莖溝病毒6種類型。其中，花葉病毒、銹果病毒2種病毒癥狀最為明顯，屬于非潛隱性病毒，通過觀察蘋果植株生長情況，能夠及時發(fā)現(xiàn)病毒侵染問題[3]。而褪綠葉斑病毒屬于潛隱性病毒，很難從植株表面觀察出問題，當(dāng)種植人員發(fā)現(xiàn)植株異常時，感染此類病毒的時間已經(jīng)很久，如何防治褪綠葉斑病毒是改善蘋果植株長勢需要解決的重要問題[4]。

1.2 病毒病病狀

各種蘋果病毒病的病狀各有特點(diǎn)，本文以褪綠葉斑病毒為例，分析該蘋果病毒病病狀。該類病毒外觀為纖維狀質(zhì)粒，彎曲幅度較大，總長度大約600nm，落選對稱，距離大約3.8nm。

褪綠葉斑病毒生理生化特性，隨著環(huán)境溫度的變化，存活期發(fā)生改變。當(dāng)環(huán)境溫度為4℃時，存活時間為10天；當(dāng)環(huán)境溫度為20℃時，存活時間為1天；當(dāng)環(huán)境溫度達(dá)到45℃時，病毒進(jìn)入半衰期，存活時間大約12min；當(dāng)環(huán)境溫度提升至52-55℃時，病毒僅能存活10min左右[5]。

發(fā)病部位及傳播方式：蘋果植株花瓣中分布的病毒偏多，葉片、枝條等部位分布病毒較少。通常情況下，褪綠葉斑病毒通過嫁接傳播。

危害病狀：蘋果植株在5月中下旬以后容易感染褪綠葉斑病毒，通常情況下，葉片的一側(cè)出現(xiàn)褪綠斑點(diǎn)，形成不規(guī)則形狀，極少數(shù)葉片兩側(cè)同時出現(xiàn)褪綠斑點(diǎn)[6]。與未感染病毒植株相比，感染病毒后的植株葉片更小一些，部分植株葉片呈匙形。病毒潛入已久的植株頂端枯死。

2 常用的蘋果病毒防治技術(shù)

2.1 加強(qiáng)檢疫

加強(qiáng)蘋果植株培育管理，定期檢測各個蘋果園區(qū)植株是否感染病毒，一旦發(fā)現(xiàn)植株感染病毒，立即隔離此園區(qū)，并檢測相鄰園區(qū)是否感染此類病毒[7]?？紤]到疫區(qū)植株病毒治理不徹底，所以，設(shè)定疫區(qū)為非調(diào)購園區(qū)，即該園區(qū)植株不可以作為嫁接材料，或者售賣到其他區(qū)域，以免病毒傳播。

2.2 構(gòu)建無病毒苗木繁育基地

為了保證蘋果植株得以健康繁殖，設(shè)立無病毒苗木基地，用來繁育健康植株。在開展繁育工作時，根據(jù)蘋果植株生長需求，結(jié)合病毒特點(diǎn)，設(shè)定植株繁育指標(biāo)，將其作為繁育考察依據(jù)，選取各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)標(biāo)的植株作為果樹繁育植株，從而保證繁育植株的健康性。

2.3 增加蘋果樹對病毒的抗性

從施肥改善土壤環(huán)境層面出發(fā)，改善蘋果植株生長環(huán)境，使得植株自身抗病毒性能得以提升[8]。其中，利用肥料提升植株抗病毒性能方法是向植株生長土壤中施加有機(jī)肥，使得土壤肥力得以提升，為蘋果植株創(chuàng)造良好生長環(huán)境。

2.4 高接換種

蘋果植株感染花葉病毒后，如果不將其徹底根除，則會感染周圍其他植株。針對此情況，可以引入高接換種技術(shù)，改變蘋果品種利用品種間抗病性的差異，從而減輕果實(shí)花臉程度。根據(jù)多年培育經(jīng)驗(yàn)，將遭受此類病毒的植株改成嘎啦品種可降低發(fā)病概率[9]。

2.5 合理負(fù)載

為了避免蘋果大小年情況發(fā)生，可以根據(jù)果樹枝干實(shí)際生長情況，合理修剪，以增強(qiáng)果園內(nèi)通風(fēng)透光性，為果樹創(chuàng)造最佳生長環(huán)境，使得自身抗病毒能力得以提升。

2.6 消毒及藥劑治療

為了避免果樹遭受病毒侵害，在園區(qū)工具應(yīng)用方面進(jìn)行管控，購買兩套修剪工具，一套用于正常生長植株修剪，另外一套備用[10]。一旦發(fā)現(xiàn)修剪過的植株發(fā)病，將此套工具送往消毒，使用備用工具進(jìn)行修剪，杜絕未經(jīng)消毒的工具用于果樹修剪。

根據(jù)蘋果植株生長特性，分別在不同時期施加藥物防治，避免植株遭受病毒侵染。選取病毒特500倍液作為防治藥劑，分別在不同時期灌入植株根部。第一次灌根：春季發(fā)芽前期灌根，施加1次藥物；第二次灌根：發(fā)芽后期灌根，施加1次藥物；第三次灌根：開花前期灌根，施加1次藥物；第四次灌根：開花后期灌根，施加1次藥物。另外，各個階段在果樹上連續(xù)噴灑兩次藥物。

2.7 刨除病株

當(dāng)植株遭受病毒侵害后，為了避免該植株病毒侵染其他植株，需要將這些植株隔離。該項(xiàng)工作的開展關(guān)鍵步驟為病株的刨除，此環(huán)節(jié)使用的工具會沾染植株病毒，如果處理不好，在使用工具處理其他植株時，會傳播此類病毒。針對此問題，每一次刨除植株后，將工具放置在陽光下暴曬2h，而后采取消毒處理。

以上為常見的幾種蘋果植株病毒防治技術(shù)，每一種病毒特性不同，需要對癥下藥，才能夠有效防治病毒。如何合理選取防治技術(shù)，將其有效應(yīng)用至蘋果褪綠葉斑病毒防治中是研究難點(diǎn)。本文將通過開展試驗(yàn)，對褪綠葉斑病毒危害進(jìn)行分析，根據(jù)病毒分布特征，為蘋果植株不同部位，擬定相應(yīng)防治方案。

3 蘋果褪綠葉斑病毒危害試驗(yàn)分析

3.1 試驗(yàn)材料

本次試驗(yàn)以褪綠葉斑病毒（ACLSV）為例，探究7年生“紅富士”蘋果樹感染病毒分布特點(diǎn)，將其作為病毒危害防治策略制定參考依據(jù)。該試驗(yàn)選取nad-5基因?yàn)閰⒄战M，利用RT-PCR引物分別檢測不同組織部位病毒含量。

3.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及數(shù)據(jù)分析

本試驗(yàn)選取葉、芽、花、一年生枝皮、二年生枝皮作為病毒采集部位，從2018年9月起開始采集各個部位ACLSV含量，至2019年4月截止，對比各個部位ACLSV含量，明確病毒侵染情況，為防治工作開展提供參考依據(jù)。其中，枝皮占據(jù)面積較大，每一個方位分布ACLSV含量可能存在差異，所以本次試驗(yàn)在探究枝皮部位ACLSV含量時，分別從東南西北4個不同方位測量ACLSV含量，使得蘋果植株侵染病毒分布探究更加深入。

為了提高數(shù)據(jù)精準(zhǔn)度，每一項(xiàng)測試均取3次重復(fù)試驗(yàn)均值。另外，采用△Ct法計(jì)算nad-5參照組數(shù)值。

3.3 結(jié)果分析

按照試驗(yàn)方法，分別測試各個部位ACLSV含量，結(jié)果如圖1所示。

圖1 不同采集部位ACLSV含量檢測結(jié)果

通過觀察圖1中ACLSV含量可知，蘋果樹花部位ACLSV含量最高，是參照組的2.7倍，其次為植株葉部位和二年生枝皮部位，ACLSV相對含量大約為0.85、1.1，一年生枝皮部位ACLSV相對含量超過了0.5，含量值大約為0.7。整體來看，蘋果植株芽部位ACLSV相對含量最低，大約含量0.5。

經(jīng)過上述分析，蘋果植株ACLSV主要集中在花部位，但是其他部位均有所分布。從整體來看，蘋果植株ACLSV分布較為分散，在制定防治策略時，需要全面分析，為每一個部位制定相應(yīng)防治策略，根據(jù)ACLSV相對含量大小，制定有主次的防治工作開展策略。

以上分析部位中，枝皮占據(jù)植株面積較大，加大了防治工作開展難度。為了細(xì)化防治策略，減少防治工作量，本文針對蘋果植株不同方位枝條樹皮組織ACLSV含量進(jìn)行測定。如果測得結(jié)果中，每個方位枝條ACLSV含量存在顯著差異，那么就可以根據(jù)植株生長時期不同，開展具有側(cè)重點(diǎn)的枝條防治工作，從而達(dá)到減少防治工作量的目的。本次測試以一年生枝條樹皮組織為例進(jìn)行測試，采集數(shù)據(jù)如表1所示。

表1 不同方位蘋果植株一年生枝條樹皮組織ACLSV含量數(shù)據(jù)采集結(jié)果

通過觀察表1中的數(shù)據(jù)可知，植株各個生長時期南向ACLSV含量較高，均在0.8以上，隨著植株生長時期的變化，發(fā)生較大幅度的變化。其次為東向，該方位ACLSV含量變化較小，除了2019年3月以外，其他時期ACLSV含量均為1.0。西向和北向ACLSV含量相對較低，各個生長時期ACLSV含量變化幅度較大。

基于上述分析，ACLSV含量在蘋果植株不同部位分布差異性較大，花部位分布量最大，在制定防治方案時需要突出。另外，植株枝條方向不同，ACLSV含量差異較大，在探究ACLSV防治策略時，應(yīng)該考慮方位問題。

4 基于蘋果褪綠葉斑病毒分布的防治方案

4.1 日常檢測

由于蘋果ACLSV為潛隱性病毒，蘋果植株感染初期很難發(fā)覺，所以需要經(jīng)常檢測植株各個部位是否感染病毒，一旦發(fā)現(xiàn)感染病毒，立即將此植株轉(zhuǎn)移至疫病區(qū)，與其他植株隔離開來。依據(jù)蘋果植株不同部位ACLSV相對含量測量結(jié)果，以花期作為重點(diǎn)檢測期段，檢測時間間隔設(shè)置為1天。植株葉和二年生枝皮檢測時間設(shè)置為3天，芽和一年生枝皮檢測時間設(shè)置為4天。按照此檢測時間間隔設(shè)置方案，分別對蘋果植株各個部位ACLSV含量進(jìn)行測量，將測得結(jié)果與對照組比對，判斷當(dāng)前植株感染病毒狀況，根據(jù)病毒含量大小，為其安置隔離園區(qū)。另外，對于枝皮組織病毒含量的檢測，按照方位不同展開檢測工作，以南部檢測為主，其次為東向，9月、10月、11月、4月，南向和東向檢測時間間隔設(shè)置為2天，12月、1月、2月、3月，南向檢測時間間隔設(shè)置為1天，東向檢測時間間隔不變。關(guān)于北向枝條病毒檢測在12月、1月、2月設(shè)置為2天，其他時段檢測時間間隔設(shè)置為3天。西向檢測時間間隔設(shè)置為4天。

4.2 病株隔離

依據(jù)檢測結(jié)果，將感染ACLSV的蘋果植株隔離開來。采用刨除病株方法、高接換種法進(jìn)行防治。第一，利用刨除病株方法防御未感染病毒蘋果植株遭受病毒侵害，刨開病株，將此處泥土翻開暴曬，空置7天左右，再用藥劑給土壤消毒，以免通過土壤傳播病毒。另外，使用的工具在陽光下暴曬2h，并利用藥劑消毒。第二，針對花和葉部位感染病毒的植株，如果病毒含量未達(dá)到1.0，則采用高接換種法，將原有蘋果植株品種改為嘎啦品種，通過改變蘋果品種，去除感染病毒植株部位，阻斷病毒傳播。病毒含量達(dá)到1.0以上，則采用上述第一介紹的辦法處理。

4.3 藥劑治療

除了上述兩種防治策略以外，在不同時期噴灑藥物，防御植株侵染病毒。根據(jù)蘋果植株ACLSV分布情況，應(yīng)該增加花期藥物噴灑?；ㄆ趪姙⑺幬?次，其他時期噴灑藥物2次。如果蘋果植株已經(jīng)感染ACLSV，則根據(jù)病毒感染分布情況，在不同部位分撒不同藥量，具體藥量設(shè)置及品種的選取需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。

5 總結(jié)

本文圍繞蘋果病毒病危害問題展開研究，通過查閱文獻(xiàn)資料，結(jié)合自身工作經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)了一些蘋果病毒病類型。本文以ACLSV為例，分析該病毒病發(fā)病特點(diǎn)，開展ACLSV相對含量分布試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明，ACLSV相對含量在植株不同部位分布差異性較大，并且枝條病毒含量不同方位分布同樣存在較大差異。本文依據(jù)病毒分布情況，提出具有側(cè)重點(diǎn)的防治策略。