王驚夢，王馨，李佩玲 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院，哈爾濱50000；哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院

環(huán)狀RNA(circRNA)是一類特殊類型的非編碼RNA，由前體mRNA形成，結(jié)構(gòu)為單鏈封閉環(huán)狀。上世紀(jì)70年代，circRNA首次在真核生物中被發(fā)現(xiàn)[1]，但直到近幾年隨著高通量測序及其他生物信息類技術(shù)手段的發(fā)展，其分子生物學(xué)功能以及在各系統(tǒng)疾病中的作用才逐漸被挖掘。研究發(fā)現(xiàn)，circRNA可以通過吸附miRNA或與mRNA作用調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯過程，也有少部分circRNA可與蛋白直接作用或編碼短肽而影響疾病進(jìn)程[2～4]。越來越多的證據(jù)顯示，circRNA可能參與了腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及凋亡等生物學(xué)行為，表明circRNA可以作為潛在的腫瘤治療靶點(diǎn)及預(yù)后標(biāo)志物[5,6]。卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤，因早期癥狀不明顯，具有早期診斷困難、預(yù)后較差、病死率高的特點(diǎn)[7]。本研究對circRNA在卵巢癌中的作用作一綜述，為探討卵巢癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制、尋找新型有效的卵巢癌相關(guān)生物標(biāo)志物提供理論依據(jù)。

1 發(fā)揮卵巢癌促進(jìn)因子作用

1.1 Hsa_circ_0049116 Hsa_circ_0049116又名circMUC16，剪接自MUC16基因。該circRNA在卵巢癌患者的癌組織和血清中表達(dá)明顯升高，高表達(dá)的circMUC16與患者腫瘤分期、腫瘤分級均呈正相關(guān)關(guān)系。Gan等[8]發(fā)現(xiàn)，circMUC16通過調(diào)控circMUC16-miR-199a-5p-beclin1/RUNX1軸介導(dǎo)自噬潮，從而加速卵巢癌細(xì)胞的增殖和侵襲。此外，circMUC16的表達(dá)受到下游靶標(biāo)runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1(RUNX1)的轉(zhuǎn)錄促進(jìn)作用。Gan等[8]還發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)RUNX1促進(jìn)了MUC16啟動(dòng)子活性及circMUC16表達(dá)，而沉默RUNX1則抑制了MUC16啟動(dòng)子活性，并導(dǎo)致circMUC16表達(dá)降低。

1.2 Hsa_circ_0001806 Hsa_circ_0001806又名circCSPP1，由中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1(CSPP1)基因產(chǎn)生。與正常卵巢組織相比，circCSPP1在交界性及惡性卵巢癌組織中的表達(dá)上調(diào)，且其表達(dá)與腫瘤分期呈正相關(guān)關(guān)系[9]。Li等[9]研究表明，敲除circCSPP1可以抑制細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，而過表達(dá)circCSPP1可以促進(jìn)癌細(xì)胞生物學(xué)行為。研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌的腫瘤抑制因子miR-1236-3p與卵巢癌細(xì)胞系中的circCSPP1表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，miR-1236-3p能夠通過靶向作用于E盒結(jié)合鋅指蛋白1(ZEB1)來抑制癌細(xì)胞生物學(xué)行為，而circCSPP1被證實(shí)可作為分子海綿吸附miR-1236-3p，抑制其對ZEB1的沉默作用，從而刺激卵巢癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)和卵巢癌進(jìn)展[9, 10]。此外，circCSPP1對卵巢癌組織中致癌蛋白的表達(dá)有正向調(diào)控作用，其調(diào)控因子包括血管內(nèi)皮生長因子A和基質(zhì)金屬蛋白酶2等[9]。

1.3 Hsa_circ_0000479 Hsa_circ_0000479又名circEPSTI1，研究顯示其在三陰性乳腺癌組織中表達(dá)上調(diào)，且其高表達(dá)與患者生存率降低有關(guān)[11]。也有研究證實(shí)，與癌旁組織相比，卵巢癌組織中circEPSTI1表達(dá)顯著上調(diào)；此外，circEPSTI1與卵巢癌荷瘤小鼠的腫瘤體積和肺轉(zhuǎn)移有關(guān)，且circEPSTI1可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖和侵襲、抑制癌細(xì)胞凋亡[12]。此外，circEPSTI1被證明是卵巢癌腫瘤抑制因子miR-942的分子海綿，circEPSTI1對EPSTI1具有潛在影響，而EPSTI1在卵巢癌組織中表達(dá)下調(diào)[12]。

1.4 Hsa_circ_0051240 Hsa_circ_0051240來自癌胚抗原相關(guān)的細(xì)胞黏附分子5(CEACAM5)基因，同樣是在卵巢癌組織中表達(dá)上調(diào)的circRNA。研究表明，Hsa_circ_0051240可通過靶向miR-637來調(diào)控激肽釋放酶4(KLK4)表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖、侵襲和遷移，并且KLK4被證實(shí)參與了卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展，對癌癥相關(guān)基因及蛋白均具有調(diào)節(jié)作用[13, 14]。

1.5 Hsa_circ_0001387 Hsa_circ_0001387也稱為circWHSC1，來自組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(WHSC1)基因。Zong等[15]研究發(fā)現(xiàn)，circWHSC1在卵巢癌組織中高度表達(dá)，并能夠吸附miR-145和miR-1182，以上調(diào)下游靶點(diǎn)MUC1和人類端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)表達(dá)。MUC1在多種癌癥(包括卵巢癌)組織中高表達(dá)，已證實(shí)其參與腫瘤發(fā)生、EMT及腫瘤轉(zhuǎn)移等過程[16]。hTERT對腫瘤細(xì)胞行為具有重要作用，其異位表達(dá)可通過上調(diào)slug來誘導(dǎo)EMT[17]。此外，Zong等[15]還發(fā)現(xiàn)，circWHSC1可以以外泌體的形式分泌并被腹膜間皮細(xì)胞吸收，促進(jìn)EMT的發(fā)生，從而觸發(fā)腫瘤在腹膜腔內(nèi)的分布，促進(jìn)卵巢癌進(jìn)展。

1.6 Hsa_circ_0061140 Chen等[18]發(fā)現(xiàn)，hsa_circ_0061140在卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)顯著上調(diào)，沉默hsa_circ_0061140可以阻止卵巢癌SKOV3、A2780細(xì)胞增殖、侵襲以及EMT，作用機(jī)制可能與通過miR-370影響叉頭框蛋白M1(FoxM1,一種參與細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖的轉(zhuǎn)錄因子)表達(dá)有關(guān)。研究證實(shí)，miR-370過度表達(dá)可抑制多種癌癥細(xì)胞的增殖和侵襲，包括乳腺癌、膀胱癌等[19, 20]。miR-370在卵巢癌組織中表達(dá)降低，而沉默hsa_circ_0061140可促進(jìn)miR-370表達(dá)。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)oxM1可能是miR-370的下游靶點(diǎn)，miR-370介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞遷移及EMT抑制作用可能與FoxM1過度表達(dá)有關(guān)[18]。因此，hsa_circ_0061140通過與miR-370結(jié)合而上調(diào)FoxM1表達(dá)，這一機(jī)制可作為卵巢癌潛在的治療靶點(diǎn)。

1.7 Hsa_circ_0003141 Hsa_circ_0003141又稱circUBAP2。Sheng等[21]發(fā)現(xiàn)，circUBAP2在卵巢癌組織中高表達(dá)，且其表達(dá)與患者病理分期及5年生存率均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。過表達(dá)circUBAP2可顯著促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的增殖和遷移能力，circUBAP2可與miRNA-144結(jié)合，并負(fù)向調(diào)控miRNA-144表達(dá)，而過表達(dá)miRNA-144可逆轉(zhuǎn)circUBAP2對卵巢癌細(xì)胞的促進(jìn)作用[21]。在卵巢癌細(xì)胞中，miRNA-144負(fù)向調(diào)控鈣離子依賴性細(xì)胞黏附分子CHD2表達(dá)，因此推測circUBAP2可能通過與miRNA-144結(jié)合而調(diào)控CHD2表達(dá)，從而參與卵巢癌的進(jìn)展。

2 發(fā)揮卵巢癌抑制因子作用

2.1 Hsa_circ_101057 Hsa_circ_101057也稱為circLARP4，來源于染色體12q13.12的LARP4位點(diǎn)的第9、10外顯子。Lin等[22]發(fā)現(xiàn)，Hsa_circ_101057在卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)明顯降低。此外，circLARP4可以通過海綿作用吸附miR-513b-5p，在轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)其宿主基因LARP4表達(dá)，從而抑制細(xì)胞增殖和遷移，推測circLARP4通過miR-513b-5p/LARP4軸抑制卵巢癌進(jìn)展。

2.2 Hsa_circ_0001095 Hsa_circ_0001095也稱為circPLEKHM3，是從2號染色體反向鏈上的PLEKHM3外顯子剪接而成的。卵巢癌組織中circPLEKHM3表達(dá)明顯下調(diào)，并提示患者預(yù)后不良。研究發(fā)現(xiàn)，circPLEKHM3通過吸附miR-9，使AKT1和典型Wnt/β-catenin信號通路失調(diào)，并調(diào)節(jié)KLF4、DNAJB6和BRCA1表達(dá)，從而抑制卵巢癌細(xì)胞增殖和遷移。此外，Zhang等[23]發(fā)現(xiàn)，Akt抑制劑MK-2206與紫杉醇聯(lián)合應(yīng)用可減少卵巢癌細(xì)胞circPLEKHM3表達(dá)，在卵巢癌患者的治療中發(fā)揮協(xié)同作用，為circRNA參與藥物治療提供可能的依據(jù)。

2.3 circITCH 研究表明，miR-10a是位于17號染色體上的一種非編碼miRNA，能夠促進(jìn)多種癌癥的進(jìn)展。Luo等[24]研究顯示，卵巢癌細(xì)胞系中circITCH表達(dá)低于人正常卵巢上皮細(xì)胞系，過度表達(dá)的circITCH通過與miR-10a的直接作用，顯著抑制癌細(xì)胞生長并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。此外，Hu等[25]證實(shí)，circITCH可上調(diào)RASA1表達(dá)，在體外和體內(nèi)通過調(diào)節(jié)circITCH/miR-145/RASA1信號通路來抑制卵巢癌細(xì)胞增殖、遷移等。因此，circITCH可能通過作用于不同的miRNA來抑制卵巢癌進(jìn)展，其下游基因還需要進(jìn)一步研究來確定。

3 作為卵巢癌診斷、預(yù)后標(biāo)志物

3.1 作為卵巢癌診斷標(biāo)志物 從血液中提取外周循環(huán)circRNA進(jìn)行診斷識別，是目前生物標(biāo)志物研究的熱點(diǎn)。已有研究證實(shí)，circBNC2可能是區(qū)分早期卵巢癌患者與良性或健康人群的特異性診斷標(biāo)志物[26]。循環(huán)circABCB10、circMAN1A2也可作為潛在的卵巢癌診斷標(biāo)志物[27, 28]。此外，Ning等[29]證明，circBNC2、circEXOC6B、circFAM13B、circN4BP2L2、circRHOBTB3和circCELSR1在卵巢癌組織中的表達(dá)發(fā)生明顯改變，可能是卵巢癌的潛在診斷標(biāo)志物。

3.2 作為卵巢癌預(yù)后標(biāo)志物 卵巢癌患者預(yù)后較差，預(yù)后評估對臨床醫(yī)生和患者均至關(guān)重要。卵巢癌患者癌組織circABCB10陽性表達(dá)與生存期呈負(fù)相關(guān)關(guān)系[28]，circEXOC6B和circN4BP2L2低表達(dá)也與患者預(yù)后密切相關(guān)[29]。circRNA1656在高級別卵巢漿液性癌(HGSOC)組織和卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)下調(diào)，并與疾病分期相關(guān)，表明其可能成為HGSOC的新型腫瘤標(biāo)記物[30]。circHIPK3在卵巢癌組織中的表達(dá)高于癌旁組織，且circHIPK3表達(dá)升高與卵巢癌患者的疾病分期、無瘤生存期及總生存期降低均有關(guān)[31]。此外，卵巢癌組織中has_circ_001567表達(dá)升高，其表達(dá)水平與腫瘤分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[32]。

綜上所述，circRNA已成為腫瘤研究的一個(gè)新的前沿領(lǐng)域，特征性circRNA在卵巢癌的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用；circRNA不僅可以作為卵巢癌治療的新靶點(diǎn)，還可能在臨床中作為早期診斷及預(yù)后預(yù)測標(biāo)志物?，F(xiàn)有的circRNA作用機(jī)制研究主要揭示其作為miRNA海綿的功能，而對于其他方面的機(jī)制有待深入研究。在卵巢癌的相關(guān)研究中，主要闡釋了circRNA在腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等方面的作用，而對于circRNA調(diào)控腫瘤特征，如免疫逃避、血管新生及細(xì)胞自噬等的相關(guān)研究，可能為進(jìn)一步研究circRNA提供新的思路。