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        秦嶺美味系獼猴桃快繁體系建立試驗(yàn)

        2020-12-28 02:32:59行冰玉
        鄉(xiāng)村科技 2020年32期

        行冰玉

        [摘 要] 本研究以秦嶺美味系獼猴桃為對(duì)象,對(duì)其腋芽和葉片進(jìn)行組織培養(yǎng),通過探討不同消毒條件和培養(yǎng)基的最佳激素配比,以找到分化培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)條件,建立秦嶺美味系獼猴桃的高效再生體系。

        [關(guān)鍵詞] 獼猴桃;植物組織培養(yǎng);快繁體系

        [中圖分類號(hào)] S663.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1674-7909(2020)32-88-2

        傳統(tǒng)獼猴桃育種方法周期長(zhǎng)、工作量大、工作效率低,難以滿足當(dāng)今社會(huì)發(fā)展和人們的需求。本文在獼猴桃培育過程中,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),通過快速繁殖苗木,對(duì)秦嶺美味系獼猴桃組培快繁過程中的誘導(dǎo)分化、增殖快繁等初步培養(yǎng)技術(shù)環(huán)節(jié)進(jìn)行研究[1],并利用莖尖剝離培養(yǎng)提高脫毒效果,不僅可縮短獼猴桃生長(zhǎng)周期,提高繁殖速度,優(yōu)化品種,還能增加經(jīng)濟(jì)效益。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        試驗(yàn)材料取自陜西省西安市周至縣風(fēng)和日麗園藝站的秦嶺美味系獼猴桃,以莖尖或?yàn)橥庵搀w進(jìn)行本次試驗(yàn)。

        1.2 試驗(yàn)方法

        以MS+蔗糖(30 g/L)+瓊脂(7 g/L)為基本培養(yǎng)基,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)采用TDZ(噻苯隆)、IBA(吲哚丁酸)、α-NAA(α-萘乙酸)[2];美味系獼猴桃分化期溫度為22~28 ℃,濕度為50%~70%,光周期時(shí)間設(shè)置為24 h(光/暗,14 h/10 h)。4—5月春季萌芽期取材,選取無(wú)病害、生長(zhǎng)健壯的美味系獼猴桃新稍莖尖,將所選取的大葉去掉,并剪成短枝,用自來(lái)水沖洗4~5 h,將表面絨毛的灰塵細(xì)菌等初步清理干凈;然后將材料移至超凈工作臺(tái)用70%的酒精浸泡30 s,期間不停搖晃,后用0.1%次氯酸鈉消毒液浸泡12~18 min,接著用無(wú)菌水沖洗3~5遍;將消毒好的莖尖在解剖顯微鏡下用解剖針剝離并切取,用濾紙吸干表面水分后培養(yǎng),切取材料的大小為0.5~1.0 cm[3]。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同消毒時(shí)間對(duì)外植體的影響

        在外植體取材后,必須要對(duì)其進(jìn)行消毒處理,選取合適的消毒液種類和設(shè)置合適的消毒時(shí)間對(duì)外植體的存活率和污染率有很大影響[4]。本試驗(yàn)中,采摘的外植體用洗潔精浸泡3 min后,流水沖洗6 h,紫外線照射20 min,酒精滅菌30 s后,采用1∶5的次氯酸鈉對(duì)獼猴桃腋芽和葉片進(jìn)行消毒,設(shè)置若干個(gè)不同消毒時(shí)間的處理,7 d后統(tǒng)計(jì)莖尖存活率和污染率。

        據(jù)表1、表2可知,腋芽和葉片處理時(shí)間與消毒效果成正相關(guān),即處理時(shí)間越長(zhǎng),污染率越低,消毒效果越好,但與存活率呈負(fù)相關(guān),即處理時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。因此,綜合分析不同處理可知,選取3號(hào)處理即對(duì)腋芽消毒16 min為最佳外植體消毒時(shí)間;選取3號(hào)處理即對(duì)葉片消毒12 min為最佳外植體消毒時(shí)間。

        2.2 分化培養(yǎng)基的篩選

        以MS+蔗糖(30 g/L)+瓊脂(7 g/L)為基本培養(yǎng)基,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)采用TDZ(噻苯?。?、IBA(吲哚丁酸)、α-NAA(α-萘乙酸)[5]。以腋芽為外植體的再生過程中,需每天觀察莖尖的形態(tài)變化及再生情況。操作大約30 d后,統(tǒng)計(jì)不同處理下腋芽的再生頻率和每個(gè)外植體再生的不定芽個(gè)數(shù)。計(jì)算公式如下:不定芽再生頻率/%=再生出不定芽的外植體數(shù)/接種的外植體總數(shù)×100%;每外植體再生芽數(shù)=外植體再生出的不定芽總數(shù)/再生出不定芽的外植體數(shù)×100%。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel2003軟件進(jìn)行分析,應(yīng)用SAS8.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行差異顯著性(P<0.05)分析。

        不同濃度的激素配比對(duì)本試驗(yàn)中美味系獼猴桃莖尖分化的影響如表3所示,在15種激素組合中,激素配比為0.6 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA的8號(hào)處理組合對(duì)外植體美味系獼猴桃莖尖的再生效果最好,再生率達(dá)到了58.26%,其再生效果顯著高于其他處理組合水平,每個(gè)莖尖的平均再生芽數(shù)高達(dá)3.59個(gè)。

        3 結(jié)論

        本試驗(yàn)表明美味系獼猴桃莖尖組培快繁的最佳消毒時(shí)間為用1∶5的次氯酸鈉對(duì)腋芽消毒16 min,對(duì)葉片消毒12 min;最佳分化培養(yǎng)基為MS+0.6 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA。

        參考文獻(xiàn)

        [1]李強(qiáng).軟棗獼猴桃組培快繁體系的建立[J].遼寧林業(yè)科技,2018(4):34-35.

        [2]衣瑞東,杜顯龍,王建萍.“海沃德”獼猴桃組培快繁技術(shù)[J].煙臺(tái)果樹,2020(3):17-18.

        [3]趙春莉,湯昊,姚思揚(yáng),等.響應(yīng)面法優(yōu)化軟棗獼猴桃組培增殖培養(yǎng)基[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,2019(2):64-66.

        [4]董穎蘋,黃萍,李裕榮,等.獼猴桃組培中控制細(xì)菌污染的研究[J].貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所,2001(3):32-34.

        [5]畢海林,吳永斌,楊洪濤,等.硬齒獼猴桃組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)研究[J].云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所,2019(5):23-27.

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