張明蘇，劉文文，高云云，徐建偉，張念華*

(1.山東第一醫(yī)科大學(xué)，山東 泰安；2.泰安市腫瘤防治院放射科，山東 泰安)

0 引言

人乳頭瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)具有100 多個型，其中HPV-3 和HPV-10 引起扁平疣，常感染青少年，感染后多分布于顏面、胳膊及手背等，影響美觀，危害青少年的心理健康。該病毒需在4 類細胞內(nèi)完成增殖過程，它在皮膚的基底層和棘層合成大部分早期蛋白、顆粒層合成小部分早期蛋白和晚期蛋白、角質(zhì)層裝配釋放出完整的病毒體[1-2]。目前常采用的治療方法有抗病毒藥物、激光、冷凍、手術(shù)、微波、免疫調(diào)節(jié)等[3-4]，這些方法對于巨大、范圍廣泛及特殊部位的皮損難以或不能施治，且有其獨有的缺點，使用藥物治療時若單純外敷，藥物不好到達基底層和棘層，口服藥物，藥物難以到達顆粒層和角質(zhì)層，導(dǎo)致病毒難以根除；若口服和外敷并用，藥物對發(fā)育中的青少年有一定的副作用。激光、冷凍、手術(shù)等對于多處疣患者會引起皮膚的損傷，帶來一定的痛苦，同樣存在難以根治的問題。微波治療的效果更差一些。免疫調(diào)節(jié)方法的治愈率有局限性，免疫細胞和免疫因子難以到達皮膚的顆粒層和角質(zhì)層，這兩層細胞里的病毒清除不了。所以需要尋找能克服以上缺點的治療疣的新的有效方法。本課題試圖運用藥食兩用植物無花果葉和大蒜治療人乳頭瘤病毒引起的扁平疣。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗儀器

棉棒購自安徽漢諾醫(yī)療科技有限公司、濾菌器購自鄭州歐諾儀器有限公司、醫(yī)用無菌一次性注射器購自江蘇宇陽醫(yī)療器械有限公司、熒光定量PCR 儀ABI 7500 購自上海巴玖實業(yè)有限公司。

1.1.2 主要試劑

0.9 % 生理鹽水購自安徽漢諾醫(yī)療科技有限公司、75%酒精購自江西鑫隆醫(yī)藥保健品有限公司、病毒DNA 提取試劑盒購自濟南檸檬生物技術(shù)有限公司、熒光定量PCR 試劑盒購自濟南檸檬生物技術(shù)有限公司、無花果葉濾液；大蒜濾液均自制、熒光定量PCR 引物定自上海生物工程有限公司。HPV-3 引物序列PF：5-AACTCTAATATAGCACATG-3，PR: 5-CACGTACGTTGGCAAATAT-3；HPV-10 引 物序 列 PF：5-ATGTCCATGGGTGCACAGGAA-3，PR:5-CTGTGGGATGCGGACCGTGCA-3。

1.1.3 研究對象

從某醫(yī)院收集扁平疣病例有多處扁平疣者，排除其它因素引起的疣，確定由HPV-3 和HPV-10 感染引起。征得患者同意，并通過學(xué)校倫理委員會批準。

1.2 實驗方法

1.2.1 熒光定量PCR 檢測

采集扁平疣標本，提取病毒的DNA。熒光定量PCR 反應(yīng) 體 系 為25μL：ddH2O 9.5μL，Primer PF(5μM) lμL，Primer PR(5μM) lμL，rTaq 酶(5U/μL) 12.5μL，DNA 模板1.0μL。熒光定量PCR 程序：95℃，預(yù)變性2min，進入循環(huán)95℃，30 s，50-60℃，30 s，72℃，30s，35 個循環(huán)，72℃ 延伸 5min。通過熒光定量PCR 確定HPV-3 和HPV-10 感染。

1.2.2 外敷治療

摘取無花果葉，清洗、晾干，無菌條件下研磨，濾菌器過濾除菌。大蒜去皮，清洗、晾干，無菌條件下研磨，濾菌器過濾除菌。選取扁平疣小于0.5 毫米，前7 天，每天3 次涂抹患處，有多處扁平疣者：①處涂抹生理鹽水；②處涂抹無花果葉濾液；③處涂抹大蒜濾液。第8 天到15 天，①處改為涂抹無花果濾液，其它按原計劃?？偗煶虨?5 天。最后①處繼續(xù)治療1 周。

2 結(jié)果

治療前3 天，涂抹生理鹽水處、無花果葉濾液處、大蒜濾液處，大小變化沒有差異，治療第7 天開始，涂抹無花果葉和大蒜濾液處開始縮小，涂抹生理鹽水處有所增大。第8 天開始涂抹生理鹽水處改為涂抹無花果濾液處。療程滿15 天，無花果葉濾液處和大蒜濾液處疣消失：處疣明顯縮小；處疣繼續(xù)治療1 周；處疣消失。

3 討論

目前臨床上治療扁平疣的常用方法有藥物治療和外科手術(shù)治療，HPV-3 和HPV-10 引起扁平疣運用抗病毒藥物治療后，由于病毒沒有完全根除，有復(fù)發(fā)的可能性；外科手術(shù)存在治療不徹底的問題，同樣存在復(fù)發(fā)的可能。本實驗使用中藥中的無花果葉濾液和食材中的大蒜濾液進行外敷治療。

無花果是藥食兩用植物，具有健胃清腸、消腫解毒功效，可治療腸炎、痢疾、便秘、痔瘡、喉痛、癰痛、疥癬、糖尿病等疾病。無花果中的成分有糖類、酯類、醇類、維生素、果膠、生長激素、糖化酸、蛋白酶、多種氨基酸、鐵、鋅、鎂、鈣以及多種微量元素等。主要為醇提取物、脂提取物、水提取物等[5-9]。近來發(fā)現(xiàn)無花果在抗腫瘤、抗病毒、細菌等方面具有顯著的效用。現(xiàn)有的研究顯示無花果提取物能抑制人單純皰疹病毒等的增殖[10-14]；并通過體外抑制腫瘤細胞的蛋白質(zhì)合成，進而抑制細胞的增殖，體內(nèi)試驗證實無花果葉提取物能抑制小鼠肉瘤和大鼠腦膠質(zhì)瘤發(fā)展[15-16]。人乳頭瘤病毒感染引起的皮膚疣既有病毒感染又有細胞非正常增殖，無花果葉成分既能抗病毒又能抑制非正常細胞增殖。目前無花果葉治療疣的研究很少，無花果葉屬于小毒中藥，適合于治療該病。

大蒜作為藥食兩用植物，主要成分包括有機硫化物、氨基酸類、苷類、糖類和微量元素等。有機硫化物有二烯丙基硫醚、二烯丙基三硫、乙基硫代磺酸乙酯、丙烯基醛二硫醚等；氨基酸類有蒜氨酸；酶類有蒜酶、糖苷酶、水解酶、裂解酶；苷類有皂角苷、大蒜總苷；糖類包括果糖、葡萄糖、半乳糖；微量元素包括鍺、硒、鐵、銅、鋅等。大蒜能通五臟、達諸竅、去寒濕、避邪惡、消臃腫、化積食，具有抗腫瘤、抗病毒、抗細菌、抗真菌等作用。大蒜中豐富的鍺可刺激干擾素的產(chǎn)生，提高人體免疫力，進而發(fā)揮抗腫瘤作用。干擾素是廣譜性的抗病毒藥，所大蒜同時具有抗病毒效用[17]。目前還未見運用大蒜治療人乳頭瘤病毒引起疣的研究。推測無花果葉濾液和大蒜濾液，既抑制病毒的增殖，又能抑制細胞的異常增殖。

本實驗運用無花果葉濾液和大蒜濾液治療扁平疣，發(fā)現(xiàn)二者均有治療扁平疣的效果?，F(xiàn)在，我國一年四季都有大蒜，大蒜治療與無花果濾液治療相比沒有季節(jié)限制，但大蒜對于年幼的兒童具有一定的刺激性，無花果葉的使用沒有刺激性。但無花果樹通常在冬天落葉，有季節(jié)的局限性，限制其使用。鑒于此，二者可相互補充使用。作為藥食兩用材料，大大降低了治療成本。比抗病毒藥物使用和外科手術(shù)，副作用低?？傊驹囼灋榕R床上使用無花果葉濾液和大蒜濾液治療人乳頭病毒引起的扁平疣奠定了基礎(chǔ)，找到副作用小成本低的治療扁平疣的方案，具有一定的推廣應(yīng)用價值。