向盈盈，皮 婷，宋 飛，楊向紅，魏云林，季秀玲

（1）昆明市延安醫(yī)院口腔科；2）藥學(xué)部，云南昆明 650051；3）昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院微創(chuàng)介入科，云南昆明 650106；4）昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650500）

口腔微生態(tài)系統(tǒng)是微生物群落與宿主共生形成的生態(tài)系統(tǒng)，相互之間可進(jìn)行能量、物質(zhì)以及遺傳信息的交換[1-2]?？谇晃⑸鷳B(tài)中的理化環(huán)境，如溫度、濕度、pH 值，是口腔微生物生存的重要微環(huán)境。不僅外界環(huán)境可影響口腔微生物的定植，口腔內(nèi)結(jié)構(gòu)形態(tài)的改變同樣也會(huì)影響口腔微生物的定植?？谇晃⑸锵嗷タ?fàn)帲嗷ミm應(yīng)，使口腔微生物不斷地變遷、進(jìn)化、成熟[1-2]。

1 口腔生理生化特性

1.1 唾液

唾液是由唾液腺分泌的混合液體，無(wú)色無(wú)味，正常成人每日分泌量1.0～1.5 L，其中水分約占99%，其余成份主要是粘蛋白、球蛋白、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、溶菌酶等有機(jī)物和少量無(wú)機(jī)鹽（主要為鈣鹽、銨鹽等）[1]。唾液中的溶菌酶及無(wú)機(jī)鹽可以抑制細(xì)菌及菌膜的形成，增強(qiáng)牙齒的抗酸能力，減少溶解度。唾液晝夜分泌量相差極大，白天咀嚼食物時(shí)唾液分泌量增加，動(dòng)態(tài)分泌流率峰值達(dá)2.27 mL/min，不僅有助于清除口腔中的食物殘?jiān)沂箍谇粌?nèi)的細(xì)菌暫時(shí)減少，保持口腔清潔，起到保護(hù)口腔作用。夜間唾液分泌總量減少，但靜態(tài)分泌流率峰值達(dá)0.57 mL/min，較清晨及上午增高，夜間唾液靜態(tài)分泌流率的增高，除保持口腔濕潤(rùn)外，還可以維持一定量的唾液抑制致病菌，特別是鏈球菌（Streptococcus）、乳酸桿菌（Lactobacillus）這類產(chǎn)酸菌，減少齲病的發(fā)生。

1.2 pH 值

正常成年人的口腔pH 值近中性，約為6.6～7.1?？谇籶H 變化與睡眠、體位、年齡和飲食生活習(xí)慣有關(guān)。白天，進(jìn)食后大量分泌的唾液、談話、直立重力因素等共同調(diào)節(jié)口腔pH 值。夜晚，唾液不是調(diào)節(jié)口腔內(nèi)pH 值的主要因素，而是與人體的食管下段括約肌（lowesophageal sphincter，LES）有關(guān)。在未進(jìn)食情況下，縱行的食管粘膜皺襞造成食管腔的封閉狀態(tài)，這種狀態(tài)產(chǎn)生的“毛細(xì)管現(xiàn)象”使胃液通過(guò)食管進(jìn)入口腔，從而降低口腔pH 值，發(fā)育成熟的LES 可以阻止胃內(nèi)容逆流。在嬰幼兒階段，由于LES 發(fā)育不成熟以及胃呈水平態(tài)，導(dǎo)致胃內(nèi)容逆流，口腔pH 值明顯較成人低，但是隨著年齡增加，口腔pH 值也逐漸升高到正常值?，F(xiàn)代人在飲食上多偏向于肉類、辛辣飲食、并且有抽煙等不良生活習(xí)慣，導(dǎo)致口腔內(nèi)毒素及酸性物質(zhì)堆積過(guò)多，使pH 下降，口腔環(huán)境變?yōu)樗嵝原h(huán)境，從而產(chǎn)生多種口腔疾病。

口腔中的pH 的高低與齲齒的形成密切相關(guān)[2]。唾液pH 值越高者齲齒率越低，反之，pH 值低，齲齒發(fā)生率則高，牙菌斑生物膜是導(dǎo)致牙齲產(chǎn)生的直接原因。唾液中的酸性物質(zhì)使牙釉質(zhì)表面pH值降低，引起局部脫鈣，糖蛋白與牙釉質(zhì)表面形成鈣化蛋白絡(luò)合物構(gòu)成牙菌斑的基質(zhì)，牙菌斑形成后細(xì)菌產(chǎn)酸，分解無(wú)機(jī)物而形成齲壞。在唾液pH 值升高時(shí)，唾液成分中的鈣鹽能夠沉淀析出，并在菌斑內(nèi)沉積，使菌斑發(fā)生鈣化，從而抑制齲壞[3]。

1.3 口腔中氧含量

人體口腔中分布有大量的厭氧和需氧菌屬微生物，它們均為條件致病菌。厭氧菌是口腔內(nèi)的主要病原菌，是人體正常菌群的重要組成部分，其數(shù)量遠(yuǎn)高于需氧菌，約占總菌屬的90%。厭氧菌中以產(chǎn)黑色素厭氧菌、消化鏈球菌（Peptostreptococcus）、普氏菌屬（Prevotella）、放線菌（Actinomycetes）、CO2噬纖維素菌（CO2Cytophagacea）、梭桿菌（Fusobacterium）和優(yōu)桿菌屬（Eubacterium）的微生物為主，需氧和兼性厭氧菌以口腔鏈球菌（Streptococcus）、表型葡萄球菌（S.epidermidis）、嗜血菌屬（Haemophilus winslow）和奈瑟氏菌屬（Neisseria）為主[4]。所以口腔中的氧含量對(duì)細(xì)菌活動(dòng)會(huì)產(chǎn)生重要影響?？谇粌?nèi)的氧含量隨外界環(huán)境及人類活動(dòng)時(shí)刻變化，白天由于人類談話及進(jìn)食活動(dòng)，口腔內(nèi)的氧含量明顯增多，需氧菌活躍，抑制厭氧菌活動(dòng)。夜間口腔內(nèi)的氧含量下降，厭氧菌代謝增加，大量增殖[5]，口腔厭氧菌總數(shù)可以達(dá)到日間細(xì)菌總數(shù)的7 倍[6]。在缺氧環(huán)境下，細(xì)菌分解代謝及無(wú)氧代謝增加，產(chǎn)生大量的有機(jī)酸、硫化物、氨、牙垢等破壞牙釉質(zhì)。同時(shí)，夜間季也蒙假絲酵母 （Candida guilliermind）、白色假絲酵母（Monilia albican）等真菌數(shù)量也會(huì)增加，因此夜間是形成口腔異味及齲齒等口腔疾病最為主要的時(shí)期。

2 口腔不同部位的微生物分布及演化

2.1 口腔不同部位的微生物分布

由于口腔中定植位點(diǎn)的不同以及氧含量、營(yíng)養(yǎng)成分、溫度及宿主免疫體系的不同，口腔微生物形成了復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)。在健康個(gè)體中，牙齒鄰面微生物多樣性最高，頰部微生物多樣性最低[7]，在軟組織、唾液、舌部及齦上菌斑中，以革蘭陽(yáng)性菌為優(yōu)勢(shì)菌，包括血鏈球菌、變異鏈球菌（Streptococcus mutans）、緩癥鏈球菌、唾液鏈球菌和乳桿菌，其中齦上菌斑中鏈球菌屬占有主要比例。放線菌屬在齦上及齦下菌斑中具有非常高的數(shù)量占比。嗜乳酸桿菌（Lactobacillus acidophilus）及革蘭陰性桿菌更多的存在于舌部[8]?？谇恢羞€定植有全身致病菌，如金黃色釀膿葡萄球菌（Streptococcus pyogenes）、糞腸球菌（Enterococcus faecalis）及綠膿假單胞菌 （Pesudomonas pyocyaneum）的定植[9]。齦下菌斑則主要由革蘭陰性厭氧菌構(gòu)成，如放線桿菌（Actinomycesbovis）、伴放線放線桿菌 （Actinobacillus actinomycetemcomitans）、福賽斯坦納菌（Tannerella forsythia）、彎曲桿菌（Campylobacter）、CO2噬纖維菌、嚙蝕艾肯菌（Eikenella corrodens）、具核梭桿菌（Fusobacterium nucleatum）、牙齦卟啉單胞菌（Porphyromonas gingivalis）、中間普雷沃菌（Prevotella intermedia），以及口腔螺旋體如齒垢密螺旋體（Treponmadnticola）等，它們都是牙周病的主要致病菌[10]。

2.2 不同生長(zhǎng)時(shí)期口腔微生物的演化

新生兒口腔一般是無(wú)菌的，出生后嬰兒就開始不斷發(fā)生人與人或人與環(huán)境之間的緊密接觸，從而與微生物之間建立起超級(jí)生物體（Superorganism）。出生時(shí)嬰兒口腔內(nèi)早期檢出的乳酸桿菌和糞腸球菌可能來(lái)源于母親分娩時(shí)陰道內(nèi)的正常菌群。嬰兒在出生1 d 以后，新生兒的口腔即出現(xiàn)大量微生物定植，特別是唾液鏈球菌（Streptococcus salivarius）、緩癥鏈球菌和表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）等早期定植細(xì)菌。表皮葡萄球菌是人類皮膚上的正常需氧菌，在多數(shù)健康嬰兒口腔檢出的原因可能與母乳喂養(yǎng)時(shí)嬰兒口腔接觸母親乳房和嬰兒喜歡吮指有關(guān)。新生兒口腔中最早定植的厭氧菌主要為韋榮氏球菌（Verllonella），主要分布于新生兒口腔中的舌乳頭間的少氧區(qū)。嬰兒1 個(gè)月左右在無(wú)牙口腔中還可檢出溶齒放線菌（Actinomyces odontolyticus）與白色念珠菌（Monilia albican）等微生物，說(shuō)明新生兒期預(yù)防念珠菌感染也非常重要[11]。Cephas 等[12]發(fā)現(xiàn)在無(wú)牙頜兒童口腔中微生物主要由厚壁菌門、變異菌門、放線菌門、梭桿菌門、螺旋體門及擬桿菌門6 個(gè)門構(gòu)成，其中厚壁菌門、變異菌門、放線菌門及梭桿菌門均為優(yōu)勢(shì)菌門。從嬰兒到成年的過(guò)程中，口腔內(nèi)微生物的豐度增加，但微生物種群的多樣性則降低了。

幼兒期乳牙的萌出為細(xì)菌定植提供新的生態(tài)位點(diǎn)，口腔中微生物的數(shù)量及種類發(fā)生了重大改變。Ling 等[13]對(duì)乳牙期兒童唾液進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)5個(gè)門：厚壁菌門、變異菌門、放線菌門、梭桿菌門及擬桿菌門，包括7 個(gè)屬：纖毛菌屬（Leptotrichia Trevisan）、鏈球菌屬（Streptococcus）、放線菌屬 （Actinomyces）、普雷沃菌屬（Prevotella）、卟啉單胞菌屬（Porphyromonas）、奈瑟菌屬（Neisseria）及韋榮球菌屬（Veillonella），其中鏈球菌屬、不動(dòng)桿菌屬，莫拉菌屬，水棲菌屬等的豐度要高于兒童其他時(shí)期。Milnes[14]調(diào)查了學(xué)齡前兒童牙齒上的正常菌群，發(fā)現(xiàn)在門齒、磨牙的唇面和舌面（除下門齒外），鏈球菌屬是優(yōu)勢(shì)菌屬，特別是變異鏈球菌的感染率明顯增加，提示齲齒發(fā)生率可能會(huì)增高。下門齒上的優(yōu)勢(shì)菌屬是放線菌屬，在所有牙齒表面上奈瑟氏球菌屬多于韋榮氏菌屬。另外，還發(fā)現(xiàn)了革蘭氏陰性桿菌和絲狀菌，主要包括了嗜血菌 （Haemophilus influenzae）、梭桿菌（Fusobacterium）、槌殼噬纖維菌（Capnocy-tophaga）、纖毛菌（Leptotrichia）和紅牛肝單胞菌屬（Porphyromonas）的微生物。

混合牙列期，健康兒童口腔內(nèi)的核心微生物種屬與健康成人相似，但是牙周可疑致病菌牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體、福賽斯坦納菌（Tannerella forsythia）、直腸彎曲菌（Campylobacter rectus）、中間普雷沃菌（Prevotella intermedia）、侵蝕艾肯菌（Eikenella corrodens）相對(duì)豐度低于成年人，而齲病相關(guān)菌屬如孿生球菌屬（Gemella）、顆粒鏈菌屬（Granulicatella）的相對(duì)豐度要高于健康成人[15]，提示兒童患齲齒的風(fēng)險(xiǎn)較高。Shaw 等[16]等從不同國(guó)家，不同城市，但有共同的飲食習(xí)慣和生活方式中的阿什肯納齊猶太人（Ashkenazi jewish）家族的DNA 和唾液樣本中證實(shí)：家庭環(huán)境是決定唾液微生物相似性的最重要因素，兒童擁有與父母親最相似的核心唾液微生物細(xì)菌組成，包括鏈球菌、羅氏菌（Rothia）、奈瑟氏菌（Neisseria）和普氏菌屬（Prevotella）微生物。日本混合牙列期兒童中未檢出齒垢密螺旋體[17]，而巴西兒童中檢出齒垢密螺旋體比例高達(dá)70%～80%，提示地域或飲食因素也是口腔內(nèi)細(xì)菌定植的重要因素。Lópezd 等[18]認(rèn)為阿拉伯人群中伴放線放線桿菌和中間普氏菌的檢出率較高，原因在于他們?nèi)狈谇恍l(wèi)生習(xí)慣，很少使用抗微生物藥物以及缺乏口腔保健。

3 微生物與口腔腫瘤

目前發(fā)現(xiàn)口腔腫瘤患者內(nèi)的微生物與正常人群具有明顯差異，但是微生物在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尚不清楚[19]。腫瘤組織的形成改變了細(xì)菌的定植?？谇击[癌中厭氧菌種類及數(shù)量增多，可能與腫瘤內(nèi)部氧化還原電位降低有關(guān)。在鱗狀細(xì)胞癌樣本 中 已 經(jīng) 發(fā) 現(xiàn) 口 炎 消 化 鏈 球 菌（Peptostreptococcus）、唾液鏈球菌、格氏鏈球菌（Streptococcus gordonii）、溶血孿生球菌（Gemella haemolysans）、麻疹孿生球菌 （Geotrichum candidum）、約翰森菌（Actinomyces johnsonii）、副血鏈球菌Ⅰ型（Streptococcus parasanguis）[19]、黃色植物桿菌（Plantibacter?flavus）、密執(zhí)安棒狀桿菌（Clavibacter michiganensis）和棲熱菌（Thermus）[20-21]等增多。同時(shí)厭氧菌普雷沃菌屬、韋榮菌屬、卟啉單胞菌屬和CO2噬纖維菌的數(shù)量也有明顯增加[22-23]。念珠菌感染與口腔惡性腫瘤相關(guān)[24]，伴有念珠菌感染的口腔白斑有更高的惡變率[25-26]。牙齦卟啉單胞菌的豐度增高與口腔癌相關(guān)[27]。

4 小結(jié)

人類微生物組（Microbiome）系指與人們共生共棲并在一定條件下導(dǎo)致各種疾病的微生物遺傳信息的總和。美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院于2007 年底啟動(dòng)了人類微生物組項(xiàng)目（human microbiomeproject，HMP）[28]，口腔微生物組被列為HMP 計(jì)劃的研究重點(diǎn)之一?？谇晃⑸锝M特指包括細(xì)菌、古細(xì)菌、真菌和病毒等人類口腔中微生物的總和[29]?？谇晃⑸锸侨梭w各種微生物群落中最復(fù)雜的一種，這些微生物常以群體的方式導(dǎo)致各種口腔疾病[30]。群體中的每一個(gè)個(gè)體均參與了疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，即使是低豐度的成員依然可能作為復(fù)雜的群落行為表現(xiàn)的關(guān)鍵物種[31]。

口腔是一個(gè)天然開放系統(tǒng)，是微生物在人體上的重要棲息地，口腔環(huán)境為微生物的持續(xù)培養(yǎng)提供相對(duì)恒定的條件[32]。深入研究口腔微生態(tài)有助于我們更準(zhǔn)確地認(rèn)識(shí)口腔微環(huán)境和口腔疾病的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸，為口腔健康保駕護(hù)航。