陳靜

（安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 230091）

1 臨床的早期表現(xiàn)和診斷

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病，發(fā)病率和致死率高達(dá)100%，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重影響。

非洲豬瘟臨床早期診斷直接受基層獸醫(yī)專業(yè)水平的影響，為此，基層獸醫(yī)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)非洲豬瘟疫病的診斷學(xué)習(xí)和總結(jié)，不斷提高臨床診斷技術(shù)。

1.1 3 種類型非洲豬瘟病毒感染的不同表現(xiàn)

強(qiáng)毒株會(huì)引起最急性型和急性型臨床表現(xiàn)。發(fā)病豬的體溫會(huì)升高，升高到41～42℃，同時(shí)出現(xiàn)嘔吐、食欲減退和精神不振的情況，有一部分生豬可能沒有先兆癥狀就突然死亡，死亡率達(dá)100%。

中等毒力的毒株能引起亞急性型癥狀，死亡率有所下降，達(dá)到30%～70%。主要臨床癥狀有出血和水腫，如果豬抵抗力較強(qiáng)，經(jīng)過3～4 周后康復(fù)，可成為帶毒豬。強(qiáng)毒力和中等毒力的毒株會(huì)引發(fā)母豬流產(chǎn)，胎兒全身和胎盤會(huì)出現(xiàn)出血點(diǎn)。

低毒力的毒株可能會(huì)引起慢性癥狀，病豬沒有出血的表現(xiàn)，在身體某些部位可能出現(xiàn)壞死和紅斑。

1.2 病理變化

1.2.1 最急性型

該類型病豬急性死亡，通過肉眼不能觀察出明顯的變化。

1.2.2 急性型

該類型病豬會(huì)出現(xiàn)肺部水腫而死亡；肝臟、腎臟和胃部會(huì)出現(xiàn)淋巴結(jié)出血；膀胱和心內(nèi)膜等部位有出血點(diǎn)。

1.2.3 亞急性型

該類型病豬始終會(huì)出現(xiàn)心包積液的癥狀；脾臟出現(xiàn)明顯腫大，淋巴結(jié)出現(xiàn)出血癥狀，呈現(xiàn)深紅色血腫。該型病死豬的腎臟出血比急性還要嚴(yán)重。

1.2.4 慢性型

該種類型的非洲豬瘟病變集中在肺部，肺部出現(xiàn)干酪樣肺炎和淋巴網(wǎng)狀組織增生。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷方法

2.1 病原學(xué)診斷

體外擴(kuò)增基因法是目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)ASFV 常用的檢測(cè)方法。普通聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)兩種方法，已被許多國(guó)家使用，通過采集病豬體液的方式能直接檢測(cè)出病毒。特點(diǎn)是特異性和敏感性強(qiáng)，適合各種非洲豬瘟病毒的檢測(cè)。我國(guó)大多數(shù)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)多用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。除了普通聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)診斷方法外，直接免疫熒光試驗(yàn)優(yōu)勢(shì)明顯，快速、經(jīng)濟(jì)和敏感性高，針對(duì)非洲豬瘟的亞急性型和慢性型病例的檢驗(yàn)有比較好的效果，在檢驗(yàn)過程中有些非洲豬瘟病毒毒株能引導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞病變，從而不出現(xiàn)血細(xì)胞吸附現(xiàn)象，影響檢測(cè)效果。

2.2 血清學(xué)診斷

檢測(cè)抗體能應(yīng)用于非洲豬瘟病毒感染豬的診斷，主要的方法有間接免疫熒光試驗(yàn)和間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。其中間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)主要優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高和價(jià)格低廉等，能大批量檢驗(yàn)血清，但該種檢測(cè)方法的不足之處有假陰性和假陽性的出現(xiàn)。

3 討論

3.1 臨床上及時(shí)診斷發(fā)現(xiàn)

在生豬養(yǎng)殖業(yè)過程中的傳染病處理應(yīng)堅(jiān)持早排查、早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早處理的原則，只有及早診斷出結(jié)果，及早發(fā)現(xiàn)，采取科學(xué)的防控措施，才能避免傳染性病的大范圍傳播與蔓延。生豬在感染非洲豬瘟病毒后由于受到多方面因素的影響，如病毒的致病性、豬品種、地區(qū)非洲豬瘟流行情況，在臨床上的表現(xiàn)不全一致。但受種種原因的制約和限制，學(xué)術(shù)界對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬場(chǎng)發(fā)生的非洲豬瘟感染病毒的臨床癥狀研究比較少。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，非洲豬瘟病毒能潛伏4～19d，潛伏的時(shí)間越長(zhǎng)，造成的影響越大?，F(xiàn)階段，國(guó)際上防控非洲豬瘟采用的普遍方式是精準(zhǔn)清除病毒，效果如何直接受處理病毒的影響。在一般情況下不建議進(jìn)行病理剖檢，如果在剖檢過程中因操作不當(dāng)和生物安全處理措施不當(dāng)很容易造成非洲豬瘟病毒的擴(kuò)散和傳播。

3.2 最有效的診斷方式是實(shí)驗(yàn)室診斷

現(xiàn)階段，比較有效的診斷方式是實(shí)驗(yàn)室診斷。利用血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)非洲豬瘟病毒特異性抗體。在接種的第3 天能在血液中分離出非洲豬瘟病毒。如果直接接觸或間接接觸帶毒病豬，經(jīng)過10～13d 能從豬血液中分離出具有傳染性的非洲豬瘟病毒。

3.3 唾液檢測(cè)有一定的研究?jī)r(jià)值

學(xué)術(shù)界對(duì)該種檢測(cè)方式的可靠性和敏感性存在不同的態(tài)度。相關(guān)研究顯示，非洲豬瘟在自然感染情況下，唾液可以早于血液3～20d 檢測(cè)出非瘟病毒。建議豬群一旦出現(xiàn)不吃料、減料、輕微發(fā)熱等疑似發(fā)病癥狀，可立即采集豬的唾液、肛腸拭子等混檢，有助于提早發(fā)現(xiàn)疫情，或使用唾液對(duì)無癥狀豬群定期進(jìn)行排查。需要注意的是，唾液核酸容易降解，要注意保存。早期檢測(cè)唾液樣本，熒光定量PCR 檢測(cè)方法更敏感、更合適，但對(duì)操作的規(guī)范性有很強(qiáng)的要求。相比較而言，鼻腔黏液受到外界干擾比較少。

3.4 實(shí)驗(yàn)室診斷過程中的操作規(guī)范

病毒感染潛伏期在血液中和組織中存在差異，病豬體內(nèi)的扁桃體和唾液中可能會(huì)出現(xiàn)大量病毒，在前期采樣過程中應(yīng)重點(diǎn)采集扁桃體和唾液，避免對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。此外，核酸能否被快速有效的提取直接影響檢測(cè)效率。在提取過程中，如果操作不當(dāng)會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境造成污染，影響檢測(cè)結(jié)果。為此，必須重視操作的規(guī)范性。

3.5 非洲豬瘟病毒檢測(cè)試劑盒的質(zhì)量需要提升

在經(jīng)濟(jì)條件和技術(shù)水平的支持下，我國(guó)已經(jīng)研制出一批高質(zhì)量的非洲豬瘟病毒熒光檢測(cè)試劑盒，對(duì)加快檢測(cè)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。此外，隨著大量試劑盒的快速生產(chǎn)，必須建立科學(xué)的設(shè)計(jì)和質(zhì)量監(jiān)督管理體系，不斷完善質(zhì)量檢驗(yàn)方法，為診斷非洲豬瘟病毒奠定基礎(chǔ)。