楊一平，陳偉國，孫海燕，林蔚紅，戴建忠，錢秋杰

（海寧市經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)服務(wù)站，浙江 嘉興 314400）

噻蟲胺（clothianidin）是拜耳公司和日本Takeda（武田）公司共同開發(fā)的具有噻唑環(huán)的新煙堿類殺蟲劑，具有卓越的內(nèi)吸和滲透作用，主要作用于煙堿乙酰膽堿受體（nAChR），是nAChR的激動劑，可以選擇性抑制昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)的nAChR，使ACh無法與AChR結(jié)合，進(jìn)而阻斷昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)信號的正常傳導(dǎo)，造成昆蟲麻痹而死亡。噻蟲胺與有機(jī)磷、氨基甲酸酯類和擬除蟲菊酯類等殺蟲劑無交互抗性，是替代高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的又一品種。主要用于水稻、蔬菜、棉花、果樹及其他作物防治蚜蟲、薊馬、飛虱等半翅目、鞘翅目、雙翅目和某些鱗翅目類害蟲［1～3］。根據(jù)中國農(nóng)藥信息網(wǎng)登記公告［4］，至2019年11月，噻蟲胺原藥登記11個(gè)，單劑登記52個(gè)，復(fù)配劑登記36個(gè)。僅2018年新增登記72個(gè)產(chǎn)品，表明噻蟲胺在國內(nèi)登記呈迅速上升趨勢［5］。浙江省從2016年起推薦30%吡蚜·噻蟲胺懸浮劑用于防治水稻灰飛虱［6］。本試驗(yàn)測定了30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的食下、熏蒸、內(nèi)吸等多種毒性，為該藥在蠶桑地區(qū)的安全使用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試農(nóng)藥

30%噻蟲胺懸浮劑，河北博嘉農(nóng)業(yè)有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20170709；77.5%敵敵畏乳油，南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD85105-2。

1.1.2 供試家蠶品種

白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 供試桑園及桑樹品種

海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站試驗(yàn)桑園，育71-1，10年生，中干樹型養(yǎng)成，每667 m2桑園栽植1000株。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的急性毒性測定

經(jīng)預(yù)備試驗(yàn)，將30%噻蟲胺懸浮劑按質(zhì)量分?jǐn)?shù)稀釋成5～7個(gè)濃度梯度，取適齡桑葉分別浸入不同濃度的稀釋藥液中1 min，取出后自然晾干，放置于保鮮盒內(nèi)備用。每個(gè)濃度處理小區(qū)給入20頭3齡起蠶供試，以清水處理為空白對照，每個(gè)處理重復(fù)3次，在溫度（26.5±1.0）℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)，24 h后改用新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡起蠶，每天調(diào)查幼蟲中毒死亡率。采用DPS（15.10版）統(tǒng)計(jì)軟件對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進(jìn)行線性回歸分析［7］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的熏蒸毒性測定

將30%噻蟲胺懸浮劑稀釋成100倍、1000倍和10000倍液（即噻蟲胺3000 mg/L、300 mg/L、30 mg/L），以77.5%敵敵畏乳油10000倍液（即敵敵畏77.5 mg/L）為農(nóng)藥對照，以清水為空白對照，分別取配制好的各種農(nóng)藥稀釋液1 mL均勻涂于直徑10 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，把涂有農(nóng)藥稀釋液的直徑10 cm的培養(yǎng)皿放入容積為60 L（高60 cm、直徑36 cm）的聚乙烯塑料桶底部，在距桶底40 cm高處放入裝有30頭2齡起蠶直徑10 cm的培養(yǎng)皿（不加蓋）進(jìn)行熏蒸毒性試驗(yàn)，并喂以新鮮無毒桑葉，每個(gè)處理重復(fù)3次。塑料桶用雙層蓋密封后放置于（30±1.0）℃的恒溫室內(nèi)，熏蒸24 h后取出，調(diào)查中毒死亡蠶頭數(shù)，更換新鮮無毒桑葉后繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡第1天結(jié)束，每24 h調(diào)查中毒死亡蠶頭數(shù)并計(jì)算中毒死亡率。

1.2.3 30%噻蟲胺懸浮劑在桑葉上的內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性和殘毒期測定

（1）將30%噻蟲胺懸浮劑稀釋成1000倍、2000倍和4000倍液（即噻蟲胺300 mg/L、150 mg/L、75 mg/L）3種不同濃度的藥液備用。

（2）3種濃度處理各選定10株桑樹，在枝條頂端最大葉位處做好標(biāo)記，防止采摘未噴到藥液的新生桑葉；每株供試桑樹中各選取1～2根枝條，上半部分用透明塑料袋暫時(shí)密封，將上述3種濃度藥液分別均勻噴灑于供試桑樹的桑葉正反葉面，不同處理間隔2行桑樹作保護(hù)行。待葉面的藥液略干后撕開套在枝條上的塑料袋頂部并做好固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染。

（3）噴藥后間隔一定時(shí)間采摘處理桑葉飼養(yǎng)一批蠶，即3種濃度藥液直接噴灑、塑料袋內(nèi)未直接噴藥的桑葉，以新鮮無毒桑葉為對照，共7個(gè)處理區(qū)，每個(gè)處理區(qū)30頭3齡起蠶，重復(fù)3次，每批蠶共21個(gè)飼養(yǎng)小區(qū)，飼養(yǎng)至4齡起蠶結(jié)束，逐日調(diào)查記載各處理區(qū)中毒死亡蠶頭數(shù)，計(jì)算中毒死亡率。

1.2.4 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的中毒癥狀觀察

將30%噻蟲胺懸浮劑稀釋成2000倍（150 mg/L），浸漬桑葉后晾干，飼喂3齡起蠶和5齡起蠶，觀察記錄家蠶中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 30%噻蟲胺懸浮劑對3齡家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定30%噻蟲胺懸浮劑對3齡起蠶的急性食下毒性，添毒24 h的毒力回歸方程為Y=8.0249+3.6235X，相 關(guān) 系 數(shù) r=0.9830，LC50為0.1463mg/L，95%置信限為0.1317 mg/L～0.1617 mg/L。參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第11部分：家蠶急性毒性試驗(yàn)》附錄A“農(nóng)藥對家蠶的毒性等級劃分”［8］，30%噻蟲胺懸浮劑對家的毒性等級為劇毒（LC50≤0.5 mg/L）。30%噻蟲胺懸浮劑防治稻飛虱推薦稀釋濃度為3000倍（100 mg/L）左右，與LC50的毒性比為683.53，對養(yǎng)蠶生產(chǎn)具有極高風(fēng)險(xiǎn)性［9］。

2.2 30%噻蟲胺懸浮劑對2齡家蠶的熏蒸毒性

30%噻蟲胺懸浮劑100倍、1000倍和10000倍3種稀釋藥液熏蒸處理2齡起蠶24 h后，繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡第1天均無中毒癥狀和死亡蠶，發(fā)育進(jìn)度與空白對照無差異；而對照農(nóng)藥77.5%敵敵畏乳油10000倍稀釋液熏蒸處理2齡起蠶，24 h內(nèi)供試家蠶全部中毒死亡，表明30%噻蟲胺懸浮劑在試驗(yàn)濃度下對家蠶無熏蒸毒性。

2.3 30%噻蟲胺懸浮劑在桑葉上的殘毒期和內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性

由表1可見，30%噻蟲胺懸浮劑1000倍稀釋藥液噴于桑樹枝葉，至噴藥后90 d采葉飼喂3齡起蠶，死亡率仍達(dá)100%；30%噻蟲胺懸浮劑2000倍稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后50 d采葉飼喂3齡起蠶的死亡率100%，至噴藥后90 d的桑葉喂蠶死亡率下降到28.89%；30%噻蟲胺懸浮劑4000倍稀釋藥液噴于桑樹枝葉，噴藥后40 d內(nèi)的桑葉喂蠶死亡率100%，噴藥后90 d的桑葉喂蠶死亡率下降到12.22%。結(jié)果表明，30%噻蟲胺懸浮劑在桑葉上的殘毒期極長，3種供試濃度處理的桑葉在藥后90 d對3齡起蠶均有致死作用。

采摘枝條上部塑料袋內(nèi)未直接噴藥處理的桑葉飼喂3齡起蠶（表2），30%噻蟲胺懸浮劑1000倍處理區(qū)噴藥后50 d死亡率仍高達(dá)100%；30%噻蟲胺懸浮劑2000倍處理區(qū)噴藥后20 d死亡率100%，藥后40 d死亡率下降到24.44%，藥后50 d無死亡和中毒蠶；30%噻蟲胺懸浮劑4000倍處理區(qū)噴藥后1 d的桑葉未見中毒癥狀和死亡蠶，藥后5 d的死亡率20.00%，藥后10 d的死亡率5.56%，藥后20 d無死亡和中毒蠶。試驗(yàn)結(jié)果表明噻蟲胺可以通過桑葉內(nèi)吸并向上傳導(dǎo)，未噴藥桑葉及噴藥后新生長的桑葉也會帶毒，1000倍高濃度時(shí)表現(xiàn)的傳導(dǎo)毒性極強(qiáng)，殘留期很長；4000倍低濃度時(shí)，藥后1 d上部未噴藥的桑葉未見毒性表現(xiàn)，藥后5 d死亡率達(dá)到最高；說明內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性與施藥濃度相關(guān)，濃度越低，桑樹本身的生物稀釋效應(yīng)越強(qiáng)，表現(xiàn)的毒性越小、毒性殘留時(shí)間越短。

2.4 30%噻蟲胺懸浮劑對家蠶的中毒癥狀

30%噻蟲胺懸浮劑2000倍（150 mg/L）稀釋藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶，約30 min后停止食桑，胸部膨大明顯，吐液，側(cè)倒；約1 h后，腹部縮短縮小，抽搐顫動，尾部上翹呈“S”形；24 h左右死亡后仍保持“S”形。

飼喂5齡蠶約30 min，食桑減緩或停止，頭胸昂起搖擺，吐液；約1 h后，胸部膨大，吐液增多，亂爬翻滾，尾部上翹呈“S”形；約2 h后，胸部青色，吐液停止，側(cè)倒，間有扭動抽搐；24 h左右死亡。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明：30%噻蟲胺懸浮劑對3齡起蠶的LC50為0.1463 mg/L，毒性等級為劇毒（LC50≤0.5 mg/L）：30%噻蟲胺懸浮劑防治稻飛虱推薦濃度（100 mg/L）與LC50的毒性比為683.53，對養(yǎng)蠶生產(chǎn)具有極高風(fēng)險(xiǎn)性。崔新倩等［10］測定1%噻蟲胺乳油對2齡起蠶的 LC50為 0.0651 mg/L，吳若函等［11］測定 30%吡蚜酮·噻蟲胺懸浮劑（吡蚜酮25%、噻蟲胺5%）對2齡起蠶的LC50為0.0033 mg/L，均表明噻蟲胺對家蠶的毒性極強(qiáng)。

30%噻蟲胺懸浮劑稀釋1000倍、2000倍和4000倍藥液噴灑桑葉，噴藥90 d后采葉飼喂3齡起蠶均有致死作用，表明噻蟲胺在桑葉上的毒性殘留時(shí)間極長。30%噻蟲胺懸浮劑稀釋100倍對2齡起蠶未見直接熏蒸毒性，但噻蟲胺可通過桑葉內(nèi)吸并向上傳導(dǎo)，使枝條上部未噴藥的桑葉帶毒。噻蟲胺對家蠶的毒性反應(yīng)很快，中毒癥狀主要表現(xiàn)為拒食，胸部膨大，吐液，身體縮短，呈“S”形等，與其他新煙堿類殺蟲劑的癥狀相似。因此，嚴(yán)禁在桑園中使用噻蟲胺及其復(fù)配制劑，桑園附近大田中必須使用時(shí)應(yīng)注意風(fēng)向、風(fēng)力和間隔距離，并選用適宜的噴霧器械，防止藥液飄移到桑園而造成養(yǎng)蠶中毒損失。