喻立紅

（湖南省汨羅市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局動(dòng)物疫病預(yù)防中心 414400）

豬偽狂犬病毒（PRV）屬皰疹病毒科，為雙鏈DNA 病毒，感染仔豬可導(dǎo)致病畜出現(xiàn)呼吸困難、神經(jīng)癥狀和腹瀉等[1]；豬瘟病毒（CSFV）屬于黃病毒科，為RNA 病毒，感染豬群所引發(fā)的臨床癥狀可分為最急性型、急性型、慢性型和溫和型，其中最急性型發(fā)病豬群突然死亡，而急性型仔豬群出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如磨牙、轉(zhuǎn)圈甚至昏迷等，慢性型為急性型轉(zhuǎn)變而來(lái)，但死亡率極高，而溫和型豬群臨床癥狀不明顯，且部分豬群可耐過(guò)[2]。PRV 和CSFV 持續(xù)性感染均可導(dǎo)致豬群出現(xiàn)免疫抑制，由此繼發(fā)其他疫?。ㄈ缂?xì)菌?。└腥据^為常見。豬鏈球菌為重要的人畜共患性病原，感染豬群可引發(fā)關(guān)節(jié)炎、腦膜炎和敗血癥等，其中鏈球菌2 型為主要血清型之一[3]。

2019 年12 月，湖南省岳陽(yáng)市汨羅某散養(yǎng)戶爆發(fā)以仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、腹瀉和關(guān)節(jié)腫大等為主要特征的疫病，該場(chǎng)飼養(yǎng)仔豬127 頭，共有82 頭仔豬發(fā)病，死亡率約40%。通過(guò)對(duì)3頭瀕臨死亡仔豬進(jìn)行剖檢與實(shí)驗(yàn)室診斷，最終確診為PRV、CSFV 和豬鏈球菌混合感染所致，通過(guò)采取針對(duì)性治療與防控措施，最終使疫情得到有效控制。本文將該案例的診斷與防控過(guò)程進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。

1 豬場(chǎng)發(fā)病情況

2019 年12 月初，岳陽(yáng)市汨羅某散養(yǎng)豬場(chǎng)爆發(fā)疫病，該場(chǎng)運(yùn)營(yíng)模式為自繁自養(yǎng)結(jié)合外購(gòu)仔豬。飼養(yǎng)繁殖母豬8 頭，仔豬127 頭（其中43 頭仔豬為新購(gòu)，未知疫苗接種情況），育肥豬為46 頭。本次發(fā)病豬群主要為仔豬，發(fā)病初期主要表現(xiàn)為腹瀉和神經(jīng)癥狀，其后養(yǎng)殖戶對(duì)發(fā)病豬群肌肉注射磺胺甲氧嘧啶，并在飼料中添加黃芪多糖，但效果較差，且發(fā)病豬群持續(xù)死亡，發(fā)病后期部分仔豬出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫大和腦膜炎等，繁殖母豬也出現(xiàn)流產(chǎn)等癥狀，至12 月20 日，已有約80 頭仔豬發(fā)病，死亡率約40%。

2 臨床癥狀

發(fā)病仔豬極度消瘦，懶散不愿活動(dòng)，磨牙，體溫升高至42℃左右，且出現(xiàn)稽留熱。部分發(fā)病仔豬眼角潮紅，腹瀉或便秘、咳嗽且呼吸困難，前肢或后肢腫大。此外，神經(jīng)癥狀如角弓反張、后身麻痹等在少數(shù)發(fā)病豬群也可見到。

2.1 病理變化

對(duì)3 頭瀕臨死亡的仔豬進(jìn)行剖檢發(fā)現(xiàn)，發(fā)病仔豬腹股溝和頜下淋巴結(jié)腫大且充血（3/3），甚至發(fā)黑（2/3），肺臟有氣腫和肉變（2/3），且胸部腹水增多（3/3）；腎臟表面有大量的出血點(diǎn)（3/3），且脾臟邊緣梗死（3/3），部分病豬胃底黏膜也有出血點(diǎn)（1/3）及關(guān)節(jié)腔內(nèi)有積液（2/3），此外，所有剖檢仔豬回盲口初有紐扣狀壞死灶，且腦膜不同程度充血、出血。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

3.1 腸道寄生蟲檢測(cè)

采用飽和蔗糖漂浮法和水洗沉淀法對(duì)糞便中蟲卵進(jìn)行檢測(cè)，取適量新鮮糞便與蒸餾水?dāng)嚢杌靹?，混合液用糞篩過(guò)濾后取濾液低速離心，棄去上清后向取適量沉渣在光學(xué)顯微鏡下鏡檢；同時(shí)在剩余沉淀物加入適量飽和蔗糖溶液，攪拌后低速離心，取上層液膜至載玻片，加上蓋玻片后以光學(xué)顯微鏡下鏡檢。結(jié)果發(fā)病仔豬糞便內(nèi)未發(fā)現(xiàn)寄生蟲。

3.2 細(xì)菌病原檢測(cè)及藥敏試驗(yàn)

將肺臟、淋巴結(jié)、腎臟和腸道組織和關(guān)節(jié)滲出液進(jìn)行混勻并研磨，適量稀釋后取濾液接種于普通瓊脂培養(yǎng)基和鮮血瓊脂培養(yǎng)基，37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)36h，觀察培養(yǎng)基表面是否有菌落形成。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)有灰白色且半透明的菌落，直徑約2mm。進(jìn)一步革蘭氏染色鏡檢發(fā)現(xiàn)其為球形菌，且為成對(duì)排列或長(zhǎng)鏈排列的革蘭氏陽(yáng)性菌，根據(jù)其形態(tài)學(xué)特征可判定為豬鏈球菌。

挑取單一菌落進(jìn)行增菌培養(yǎng)，適度稀釋至0.5 麥?zhǔn)蠁挝粷舛?，涂板于鮮血瓊脂培養(yǎng)基表明，反面靜置約10min，貼含有抗生素的藥敏紙片，每個(gè)平板貼4 種不同的藥敏紙片，置于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h，其后觀察抑菌圈大小，結(jié)果按照杭州微生物試劑有限公司藥敏紙片說(shuō)明書進(jìn)行判定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)本次試驗(yàn)獲得的菌株對(duì)頭孢喹肟、頭孢拉定和利福平等敏感，對(duì)恩諾沙星、多環(huán)西素、克林霉素等中度敏感，對(duì)卡那霉素、磺胺甲氧嘧啶、氟苯尼考和阿莫西林等耐藥。

3.3 病毒性病原檢測(cè)

將剖檢仔豬適量病變組織（淋巴結(jié)、肺臟、脾臟、腎臟、小腸和腦組織等）與生理鹽水混合并研磨，反復(fù)凍融后去上清提取核酸（DNA 與RNA 混合物），按照試劑盒說(shuō)明書將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，其后以DNA 或cDNA 為模板，分別檢測(cè)常見DNA （豬圓環(huán)病毒二型、PRV）和RNA 病毒（CSFV、豬藍(lán)耳病毒、豬流行性腹瀉病毒、傳染性胃腸炎病毒、豬德塔冠狀病毒等），結(jié)果發(fā)現(xiàn)被檢樣品為CSFV 和PRV 陽(yáng)性。

經(jīng)過(guò)以上診斷結(jié)果，最終判定該豬場(chǎng)發(fā)生CSFV、PRV 和豬鏈球菌混合感染。

4 防控措施

為了對(duì)此次疫病進(jìn)行有效防控，我們迅速采取以下措施：（1）將發(fā)病豬群進(jìn)行隔離，對(duì)豬群緊急免疫豬瘟弱毒疫苗和偽狂犬基因缺失弱毒疫苗（HB-98 株）；（2）對(duì)全場(chǎng)病豬肌肉注射頭孢噻呋；（3）提供全價(jià)飼料，在飼料中添加適量抗病毒藥物（如黃芪多糖和魚腥草等）和抗生素（恩諾沙星）；（4）提高衛(wèi)生管理水平，及時(shí)對(duì)糞污進(jìn)行清除，并定期消毒。實(shí)施以上措施兩周后，疫情有所好轉(zhuǎn)，豬場(chǎng)的生產(chǎn)成績(jī)逐漸恢復(fù)穩(wěn)定；（5）對(duì)發(fā)病豬群進(jìn)行針對(duì)性治療，如退燒止咳等。兩周后電話回訪得知疫情得到有效控制，豬群生長(zhǎng)成績(jī)逐漸恢復(fù)。

5 討論

對(duì)于感染豬群的病毒性疫?。ㄈ缲i瘟、偽狂和藍(lán)耳病等）而言，目前暫無(wú)有效的藥物進(jìn)行治療，對(duì)該類疫病防控只能依靠疫苗免疫接種與提高飼養(yǎng)管理水平。通過(guò)對(duì)疫病進(jìn)行監(jiān)測(cè)，不斷淘汰帶毒豬群，最終可使成功凈化該類傳染性疫病。若豬群已經(jīng)爆發(fā)疫病，則通過(guò)診斷技術(shù)確診病原，通過(guò)緊急免疫接種相應(yīng)疫苗，同時(shí)進(jìn)行對(duì)癥治療，提高機(jī)體免疫力，最終可使部分發(fā)病較輕的豬群耐過(guò)。對(duì)細(xì)菌性疫病的主要防控措施是通過(guò)提高飼養(yǎng)水平和藥物防治。當(dāng)豬群發(fā)生此類疫病，應(yīng)及時(shí)分離菌株，開展藥物敏感試驗(yàn)，選擇中敏或高敏藥物進(jìn)行治療與防控，但需要注意交叉用藥，以免造成菌株耐藥性。

本文中豬場(chǎng)爆發(fā)CSFV、PRV 和豬鏈球菌混合感染，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)和臨床診斷迅速確定病因，開展針對(duì)性治療與防控，最終使疫情在短時(shí)間內(nèi)得到控制，減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失。