黃小瓊,嚴(yán)家榮,鄭佳琳,武昕,譚巧燕,饒子亮,王諾,王剛

（廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心，佛山528248）

傳遞窗紫外線燈消毒是動物實驗屏障設(shè)施傳遞實驗物品常用消毒方法，主要是對空氣及物體表面進(jìn)行消毒，我們在使用過程中發(fā)現(xiàn),在紫外線消毒使用上存在一些認(rèn)識誤區(qū)、潛在隱患和浪費等現(xiàn)象,使紫外線燈殺菌效果受到很大影響,[1]造成屏障設(shè)施的交叉污染和資源浪費，如何正確使用傳遞窗紫外線消毒是確保物品、空氣消毒效果和節(jié)能并延長紫外燈壽命的關(guān)鍵。因此本研究選擇不同物品處理及不同作用時間對其消毒效果進(jìn)行對比試驗，對傳遞窗紫外燈最佳照射時間和方法進(jìn)行探討，綜合考慮消毒成本、穩(wěn)定性、消毒效果和安全性等多方面因素，達(dá)到紫外燈在實際應(yīng)用中延長壽命、節(jié)省成本、防止交叉污染的目的，同時為實際工作中的消毒滅菌工作提供科學(xué)有效、經(jīng)濟(jì)安全的參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 檢測物品：消毒藥瓶、紙張、眼鏡和簽字筆。

1.2 主要實驗儀器與試劑

1.2.1 主要實驗儀器：

1.2.1.1 ZSZ15W 直管型石英紫外線低壓汞消毒燈（石英殺菌燈）：啟東市海聯(lián)有限公司生產(chǎn)。批號：2007，衛(wèi)消字（2002）第0103 號。

1.2.1.2 JJ1006 型電子天平，中國雙杰集團(tuán)有限公司；SW-CJ-2FD 型超凈工作臺，蘇州凈化有限公司；PHX 型生化培養(yǎng)箱，寧波萊福科技有限公司產(chǎn)品；BHC-1300ⅡA/B3 型生物安全柜，蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司產(chǎn)品；LMQ.C 型全自動滅菌器，山東新華醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品；DK-8AD型電熱恒溫水槽，上海一恒科技有限公司產(chǎn)品；MS3 型迷你振蕩器，德國IKA 公司產(chǎn)品。

1.2.2 主要試劑：氯化鈉，批號130316，廣州市中南化工儀器有限公司產(chǎn)品，有效期至20180315；血平板，批號BAP-140414D，廣州市迪景微生物科技有限公司產(chǎn)品，有效期至20140601；營養(yǎng)瓊脂，批號3102441，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司產(chǎn)品，有效期至20160801；平板計數(shù)瓊脂，批號3102275，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司產(chǎn)品，有效期至20160602；甘露醇，批號5101420，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司產(chǎn)品，有效期至20150519；凍干血漿，批號1301101P，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司產(chǎn)品，有效期至20141011。

1.3 實驗方法[2]

1.3.1 培養(yǎng)基的配制

1.3.1.1 營養(yǎng)瓊脂平板：準(zhǔn)確稱取16.5 g 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，溶于500 mL 去離子水中，攪拌加熱煮沸至完全溶解，調(diào)PH 值為7.2，121℃高壓滅菌15min，冷卻至45℃左右傾倒平板，每皿20mL 左右，備用。

1.3.1.2 平板計數(shù)瓊脂：準(zhǔn)確稱取16.5 g 平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，溶于500 mL 去離子水中，攪拌加熱煮沸至完全溶解，調(diào)PH 值為7.2，121℃高壓滅菌15min，至46℃水浴中備用。

1.3.2 檢測地點：傳遞窗1：傳遞窗1 四個方向各安裝1 支直管型石英紫外線低壓汞消毒燈，共安裝4 支。已經(jīng)使用時間：1730min，傳遞窗2：傳遞窗1 四個方向各安裝1 支直管型石英紫外線低壓汞消毒燈，共安裝4 支，為新購買的紫外燈（使用時間為0min）。照射強(qiáng)度為2537°A。

1.3.3 物體表面消毒效果測定：

1.3.3.1 采樣：分別設(shè)陽性對照組 （未作任何處理）、試驗組0（照射前）、試驗組1（紫外線燈照射15min）、試驗組2（紫外線燈照射20min）、試驗組3（紫外線燈照射30 min）、試驗組4（紫外線燈照射60min），每組設(shè)兩個平行管。將經(jīng)過0.17%百毒殺消毒液擦拭的簽字筆、百毒殺瓶，0.1%新潔而滅浸泡3 分鐘的眼鏡和不做處理的紙等待測物品置傳遞窗照射相應(yīng)時間后，用沾濕生理鹽水的無菌棉拭子對物體表面作涂抹采樣，百毒殺瓶采樣面積3.5cm×14cm、筆11cm×2cm、紙7cm×21cm 和眼鏡3cm×5cm、每支采樣2 個點。

1.3.3.2 物體表面菌落總數(shù)測定：將已采樣的棉拭子無菌操作剪下棉拭子頭，放入10mL 生理鹽水中洗脫，充分振蕩混勻，取洗脫液適當(dāng)稀釋。選擇合適稀釋度的洗脫液勻液，取1mL 置無菌平皿，每個稀釋度做兩個平行，傾入冷卻至45℃左右的平板計數(shù)瓊脂，混勻，待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置36℃培養(yǎng)48h。

1.3.3.3 物體表面金黃色葡萄球菌檢測：用含轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基的棉拭子，對物體表面進(jìn)行涂抹采樣。用棉拭子在血平板上進(jìn)行劃線接種，置36℃培養(yǎng)24h。觀察菌落特征，金黃色葡萄球菌在血平板上菌落呈金黃色或白色，突起，圓形，不透明，表面光滑，β 溶血；革蘭氏染色鏡檢觀察到菌體為革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽胞與莢膜。挑取可疑菌落劃線接種于血平板，置36℃培養(yǎng)24h。挑取可疑的分純菌落接種甘露醇培養(yǎng)基，置36℃培養(yǎng)24h，發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽性。于0.5 mL 1：4 兔血漿加入待檢菌24h 肉湯培養(yǎng)物0.5 mL，搖勻，同時用已知的血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0.5 mL 作為陽性與陰性對照。置36℃培養(yǎng)箱內(nèi)，每30min 觀察一次，若24h 內(nèi)，陰性菌未出現(xiàn)凝塊，已知的陽性菌株和待檢菌株均出現(xiàn)凝固時或有凝塊時，可判斷為陽性。

1.3.3.4 結(jié)果判定：根據(jù)細(xì)菌消亡率對消毒效果進(jìn)行評價。消亡率＝〔（消毒前菌落數(shù)－消毒后菌落數(shù)）/消毒前菌落數(shù)〕×100%[3－5]。

2 統(tǒng)計方法

采用Excel 軟件統(tǒng)計數(shù)據(jù)。

3 結(jié)果

檢測結(jié)果表明（見表1），簽字筆、眼鏡、百毒殺瓶和A4 紙張在四面有紫外燈管的傳遞窗中照射消毒15 分鐘，細(xì)菌消亡率均可達(dá)到100%。符合消毒合格標(biāo)準(zhǔn)。表1傳遞窗紫外燈不同照射時間消毒效果

表1 傳遞窗紫外燈不同照射時間消毒效果

4 討論

紫外線(ultraviolet radiation，UV)消毒經(jīng)濟(jì)實用、安全方便、效果確切、無殘留毒性。是空氣和物品表面消毒的首選。但UV 輻照能量低，穿透力弱，不能透過紙張、普通玻璃和有機(jī)玻璃;易被粗糙表面、有機(jī)物和塵埃所吸收，對一般塑料透過率極低，照射距離等反光罩材質(zhì)、燈管清潔度、消毒物體表面性質(zhì)和環(huán)境溫濕度因素影響[6]。屏障設(shè)施傳遞窗紫外燈的如何使用可達(dá)到消毒合格，防止交叉污染又可延長紫外燈壽命、節(jié)約成本的目的。選擇最佳照射時間是關(guān)鍵。

本研究檢測了紫外燈照射15min、20min、30min 和60min 照射實驗物品表面的細(xì)菌消亡率。檢測結(jié)果表明（見表1），簽字筆、眼鏡、百毒殺瓶和A4 紙張在四面有紫外燈管的傳遞窗中照射消毒15 分鐘，細(xì)菌消亡率均可達(dá)到100%。符合消毒合格標(biāo)準(zhǔn)。為實際工作中的消毒滅菌工作提供科學(xué)有效、經(jīng)濟(jì)安全的參考依據(jù)。但如何做好紫外燈的日常維護(hù)，使影響因素降到最低，延長紫外燈管壽命。同時為了防止交叉污染，如何對紫外燈管的壽命進(jìn)行日常監(jiān)測有待進(jìn)一步研究[7]。