趙珺睿 賀英 張嬌嬌

天津紅日藥業(yè)股份有限公司 天津 301700

超高效液相色譜法（UPLC）是一種應(yīng)用于藥物檢測、食品檢測等檢測領(lǐng)域的一種化學(xué)成分分離技術(shù)，其與高效液相色譜法（HPLC）的原理相同，可對相關(guān)藥物進行快速檢測，具備分離速度快、適用范圍廣、自動化程度準(zhǔn)確度高等特點。在藥物檢驗分析領(lǐng)域，UPLC比HPLC的應(yīng)用優(yōu)勢更加突出，可快速、準(zhǔn)確地分析出藥物的復(fù)雜組分，具備極高的推廣應(yīng)用價值。

1 UPLC的優(yōu)勢

1.1 速度

超高效液相色譜法（UPLC）色譜柱多采用新型全多孔球形1.7μm反相固定相，該固定相是應(yīng)用“雜化顆粒技術(shù)”合成的，并由此制備了高柱效的ACQUITY UPLC色譜柱。這使得在常規(guī)高效液相色譜需要30分鐘時間的樣品分析在超高效液相色譜短短為僅需5分鐘，并呈現(xiàn)出色譜柱柱效達20萬塊/m理論塔板數(shù)的超高柱效[1]。

1.2 靈敏度

我們知道UPLC色譜柱中使用的是1.7μm固定相，分離獲得的色譜峰半蜂寬小于1s，這就對檢測器的要求是極高的。通常情況下，對于光源而言，主要運用可變波長的紫外光或二極管陣列系統(tǒng)。在使用的檢測方法中，這一檢測方法與普通的檢測方法相似。然而，在實際的檢測中，會用到高效微粒固定相檢測法，與此同時，在高壓輸液泵等儀器的共同檢測下，在極大程度上，可以保證檢測結(jié)果的科學(xué)性、合理性。

1.3 自動化

對于UPLC的進樣系統(tǒng)，常規(guī)的手動進樣閥和自動進樣閥都不能滿足系統(tǒng)需求了。在UPLC中為保護色譜柱不受極端高壓力波動的影響，進樣過程應(yīng)當(dāng)相對無壓方波動，進樣系統(tǒng)的死體積必須足夠小，以降低樣品譜帶的擴展。針對這個問題，UPLC的自動化進樣器的設(shè)計有了新突破：針內(nèi)針進樣探頭（XYZZ）為高速進樣機械裝里，可快速進樣。為了降低進樣時的交叉污染，采用一強、一弱的雙溶劑的進樣針清洗步驟，這兩種洗針溶劑需同時得到良好的脫氣。此技術(shù)可保證可靠、重現(xiàn)的進樣；在自動進樣器內(nèi)，可安置96位或384位樣品盤。每個位置可放置2或4mL樣品瓶。新型的樣品組織器可接受21個樣品盤的編程。一般而言，對于快速進樣周期而言，在保證UPLC高樣品容量的情況下，能夠?qū)崿F(xiàn)高速度，與此同時，能夠使無人照管，長時間運行的自動進樣得以實現(xiàn)，還具有極低交叉污染的小體積進樣能力。由于該技術(shù)的分離速度，靈敏度和自動化方面有更大的優(yōu)勢，相信會在各大實驗室得到認(rèn)可[2]。

2 藥物分析現(xiàn)狀

當(dāng)前，UPLC作為一種常用的檢驗分析技術(shù)，已經(jīng)被應(yīng)用于藥品分析、藥物代謝動力學(xué)、中藥成分分析中，其在藥物檢測分析領(lǐng)域取得了良好的應(yīng)用效果。

2.1 應(yīng)用于藥品定性與定量分析

在藥品檢驗分析中，樣品分離難度高、分析時間長一直是藥品檢驗分析的弊端。而應(yīng)用UPLC進行藥品檢驗分析，可彌補上述弊端，提高藥品檢測的靈敏度和藥品分析準(zhǔn)確性。如，利用UPLC可準(zhǔn)確測定人凝血因子VII中枸櫞酸離子含量，從而可以保證精確測量，進而使人體的各項指標(biāo)趨于平穩(wěn)[3]。除此之外，由于UPLC具有高分離度、高速度、高靈敏度的優(yōu)勢，因此，UPLC還被成功應(yīng)用于松乳劑、曲安西隆乳劑等合成藥物，以及中間體、副產(chǎn)物的檢驗分析中，提高了檢測分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.2 應(yīng)用于藥物代謝動力學(xué)

目前，在醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域中，針對藥物代謝動力學(xué)方面的研究主要集中在以下幾個方面：藥物在體內(nèi)的分布情況、藥物在人體內(nèi)的吸收、代謝和排泄。研究內(nèi)容包括藥物分析測定、藥物代謝和基質(zhì)分離、代謝物定量分析等。相關(guān)研究結(jié)果表明，UPLC在藥物代謝產(chǎn)物檢測中的分離效率較高，不僅如此，UPLC還能對樣品進行定量分析。利用UPLC-MS/MS系統(tǒng)可以測定人體血漿當(dāng)中的喹那普利和喹那普利拉的含量。UPLC檢驗分析過程的耗時較短且準(zhǔn)確度高，便可測定出血清中氯氮平及去甲可待因的含量，從而計算出人體血漿中洛匹那韋和利托那韋的濃度，進而給后期的檢測工作奠定良好的基礎(chǔ)。綜上，在藥物代謝動力學(xué)的研究中，應(yīng)用UPLC能夠使檢測分析結(jié)果更加精確[4]。

2.3 藥物分析在藥品研究的重要性

一般而言，藥物自身的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)至關(guān)重要，通常情況下，能夠說成藥物結(jié)構(gòu)影響了藥效，除此之外，還可以影響藥物在體內(nèi)的吸收、分布過程。然而，因為人體在一定程度上，對藥物有具體的處理方式，并不是具有活性部位的分子都可以做藥物使用。藥物發(fā)揮藥理活性的僅僅是它結(jié)構(gòu)的一部分，為了能發(fā)揮這種活性，還需要另外一些輔助結(jié)構(gòu)保證該分子能經(jīng)受人體的處理而到達靶部位[5]。

3 超高效液相色譜法在藥物成分分析中的應(yīng)用

3.1 中藥制劑

對于中藥制劑來講，因為其所含成分相對較多，同時伴隨著目標(biāo)檢測物的含量較低，以及加上相似物較多，因此，在實際的工作中，進行定量分析有一定的難度。但是，對于這一方法而言，其具有一定的優(yōu)勢，如：可以解決相應(yīng)的難題，并且在具體的鑒定中，有顯著的成效。再者，其在復(fù)方中藥制劑中，也有顯著的成效，進而可以給藥品質(zhì)量控制，帶來科學(xué)、有效的檢測方法。除此之外，其在化學(xué)藥物，生物制劑等領(lǐng)域也有所運用。

3.2 中藥材質(zhì)量分析

根據(jù)相關(guān)的研究表明，這一方法在實際的分析中，擁有顯著的效果，與此同時，就有相關(guān)人士使用這一方法，對相應(yīng)的成分進行有效的檢測。通常情況下，中藥指紋譜圖是首要的方法之一，并且有相關(guān)人士使用這一方法，制作了黃芪的指紋圖譜，再者，建立超高效液相色譜指紋圖譜，這一方法在實際的應(yīng)用中，具有顯著的成效[6]。

3.3 檢測制藥廢水中的應(yīng)用

一般而言，在制藥廢水中擁有許多殘留藥物成分，其會給環(huán)境帶來嚴(yán)重的危害，基于這一現(xiàn)狀，對于廢水的治理成為當(dāng)今首要的任務(wù)。高效液相色譜儀可同時測定制藥廢水中的交沙霉素、茶堿和撲熱息痛的含量，通過檢測制藥廢水，尋找合適的方法去除制藥廢水中對環(huán)境有害的物質(zhì)[7]。

4 結(jié)語

超高效液相色譜法在高速和高壓環(huán)境下可實現(xiàn)高效分離，保證藥物檢驗質(zhì)量。而高效液相色譜法對檢驗環(huán)境的限制條件相對較多，一旦面臨檢驗環(huán)境變化，就會降低樣品分離效率，影響藥物檢驗分析質(zhì)量?，F(xiàn)階段，隨著這一技術(shù)的不斷應(yīng)用，與此同時，能夠給市場監(jiān)管帶來有效的輔助功能。特別是在相似藥品的檢測中，能夠有顯著的鑒別作用，希望通過本文的研究能夠給相關(guān)人士帶來一定的借鑒意義[8]。