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        不同枇杷花提取液抗氧化能力研究

        2020-11-11 07:29:40福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院福州市350002盧慶錚
        石河子科技 2020年5期
        關(guān)鍵詞:無水乙醇枇杷提取液

        (福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福州市,350002) 盧慶錚

        枇杷是薔薇科枇杷屬植物,主要分布在福建、江蘇、廣東、浙江等地區(qū)。枇杷的花期較長,每個花絮上的花較多,最多的花絮上的花超過200 朵[1],為了減少過剩枇杷花對營養(yǎng)的消耗,提高枇杷的產(chǎn)量和質(zhì)量,在生產(chǎn)過程中會對枇杷進(jìn)行大量的疏花處理,枇杷花具有豐富的氨基酸、黃酮類、酚類、三萜類物質(zhì),具有清肺潤喉、提神養(yǎng)氣、化痰止咳等功效[2]。目前已有大量關(guān)于枇杷花的相關(guān)研究,主要集中在枇杷花生物活性成分[3]、功能性成分[4,5]和枇杷花的開發(fā)利用[6]等方面,關(guān)于枇杷花抗氧化活性方面的研究,閆永芳等[7]通過采用DPPH、FRAP ABTS 和福林酚(F-C)方法測定了枇杷花酚類化合物的抗氧化活性;蘆艷等[8]通過ABTS、硫酸鋁比色法、普魯士藍(lán)法、F-C法等對不同花期醇提物的抗氧化活性進(jìn)行研究。目前尚未有枇杷花不同提取液抗氧化能力研究的相關(guān)報道,因此本研究利用水、70%乙醇、無水乙醇三種溶劑對枇杷花進(jìn)行提取,采用DPPH 和ABTS 自由基清除能力法對提取液的抗氧化能力進(jìn)行研究,以期為枇杷花的開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        枇杷花,2019年10月采于福建漳州市。

        1.2 試驗試劑和儀器

        無水乙醇、維生素C(Vc)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、過硫酸鉀。

        電熱鼓風(fēng)干燥箱(DHG-9240A,上海一恒科學(xué)儀器有限公司);電子天平(Denver TP-214,丹佛儀器有限公司);手提式粉碎機(jī)(HK-04A,廣州市旭朗機(jī)械設(shè)備有限公司);紫外-可見分光光度計(T6 新世紀(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 枇杷花提取液制備

        將新鮮枇杷花置于60℃烘箱中烘干至恒重,用手提式粉碎機(jī)打成粉末(80 目),取5g 枇杷花細(xì)粉,按料液比1:10回流2h,選用水、70%乙醇、無水乙醇三種溶劑,抽濾后濃縮,加相應(yīng)溶劑溶解定容至50mL(100mg/mL),用0.45um 的微孔濾膜過濾后保存于-20℃中。實驗時用相應(yīng)溶劑稀釋成10mg/mL、1mg/mL、0.1mg/mL。

        1.3.2 對照品溶液的制備

        取Vc用水稀釋0.1mg/mL。

        1.3.3 清除DPPH自由基試驗

        (1)配制質(zhì)量濃度為39.40μg/mL 的DPPH 自由基無水乙醇溶液;存放冰箱,30天內(nèi)有效。

        (2)取100uLDPPH 溶液和100uL 樣品混合,靜置30min后,于517nm波長檢測吸光度。

        (3)公式:

        式中:A0為DPPH自由基乙醇溶液與純水混合液的吸光度;Ai 分別表示DPPH 自由基乙醇溶液加等體積樣品測得的吸光度;每個樣品重復(fù)3次,取平均值。

        表1 不同枇杷花提取液DPPH自由基清除能力

        表2 不同枇杷花提取液ABTS+自由基清除能力

        1.3.4 清除ABTS自由基試驗

        (1)取76mgABTS和13mg過硫酸鉀,加20mL水溶解,常溫下暗室反應(yīng)16h,將此溶液稀釋50 倍待用。

        (2)將待測溶液和配置好的ABTS 自由基溶液等體積混合,靜置30min后,于734nm波長測其吸光度。

        (3)公式:

        式中:A0 為ABTS 自由基溶液與等體積純水等體積混合液的吸光度;Ai 分別表示ABTS 自由基溶液加等體積測試液;每個樣品重復(fù)3次,取平均值。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同枇杷花提取液DPPH自由基清除能力

        通過對不同枇杷花提取液的DPPH自由基清除能力進(jìn)行測定,得到表1。由表1可以看出,枇杷花不同溶劑提取液均具有清除DPPH 自由基的能力。且在枇杷花提取液濃度為10mg/mL 和1mg/mL 時,清除DPPH自由基的能力為:無水乙醇提取液>70%乙醇提取液>水提取液;在枇杷花提取液濃度為0.1mg/mL時,清除DPPH自由基的能力為:70%乙醇提取液>無水乙醇提取液>水提取液。

        2.2 不同枇杷花提取液ABTS自由基清除能力

        通過對不同枇杷花提取液的ABTS自由基清除能力進(jìn)行測定,得到表2。由表2可以看出,枇杷花不同溶劑提取液均具有清除ABTS 自由基的能力。且在枇杷花提取液濃度為10mg/mL 和1mg/mL 時,清除ABTS自由基的能力為:無水乙醇提取液>70%乙醇提取液>水提取液;在枇杷花提取液濃度為0.1mg/mL時,清除ABTS自由基的能力為:70%乙醇提取液>無水乙醇提取液>水提取液。

        3 討論與結(jié)論

        枇杷花中酚類、黃酮類物質(zhì)都具有良好的抗氧化能力,酚類物質(zhì)能夠預(yù)防癌癥、心血管疾病和神經(jīng)性疾病等,黃酮類化合物具有保護(hù)血管、活化大腦、疏通微循環(huán)、預(yù)防動脈硬化等多種功能[9],本研究的結(jié)果也表明不同枇杷花提取液均具有一定的抗氧化能力。

        不同提取溶劑和不同濃度提取的枇杷花提取液抗氧化能力也不同,閆永芳等[7]的研究結(jié)果表明枇杷花提取物抗氧化能力測試中DPPH 法和ABTS法測得的實驗結(jié)果總體趨勢非常相似,這與本研究得出的結(jié)果一致。本研究結(jié)果表明在枇杷花提取濃度為 10mg/mL 和 1mg/mL 時,清除 DPPH 和 ABTS自由基的能力為:無水乙醇提取液>70%乙醇提取液>水提取液;在枇杷花提取液濃度為0.1mg/mL時,清除DPPH和ABTS自由基的能力為:70%乙醇提取液>無水乙醇提取液>水提取液。

        因此,可以根據(jù)枇杷花提取物的功效作用開發(fā)出特色產(chǎn)品,比如枇杷花茶、枇杷花酒等等,充分利用生產(chǎn)中剩余的枇杷花,創(chuàng)造附加價值。本研究為枇杷花的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

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