高燕婷，趙金艷，王 娟，李 佳，許 雯，李 莉，藺麗慧

（上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200080）

急性髓細(xì)胞性白血病（acute myeloid leukemia，AML）是一種侵襲性血液系統(tǒng)惡性腫瘤，以造血系統(tǒng)的克隆性增殖和異常分化及病態(tài)細(xì)胞浸潤骨髓、血液和其他組織為特征[1]。2015 年發(fā)表的研究數(shù)據(jù)顯示，AML 已成為成年人中發(fā)病率和死亡率最高的白血病類型[2-3]。多種因素與成人AML 發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，如前期血液病、治療性和非治療性電離輻射暴露、化學(xué)物質(zhì)和某些化療藥物及化學(xué)制劑接觸等[4]，這些因素均會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)獲得性染色體異?；蚧蛲蛔兊燃?xì)胞遺傳學(xué)改變，且后者與患者的預(yù)后密切相關(guān)。

美國國家癌癥研究所的數(shù)據(jù)顯示，化療和干細(xì)胞移植仍是目前AML 患者的主要治療方法，患者的5 年相對生存率為28.7%（2010 年至2016 年）[5]。近年來，由于單克隆抗體、免疫治療及嵌合抗原受體T 細(xì)胞免疫療法的發(fā)展及應(yīng)用，急性淋巴細(xì)胞白血病患者的生存率已獲得顯著提高，2010 年至2016 年的研究顯示，其5 年相對生存率達(dá)68.8%[5]，可見，積極探尋監(jiān)測、治療AML 的新方法具有十分重要的意義。相關(guān)研究已發(fā)現(xiàn)，AML 患者白血病細(xì)胞與機(jī)體免疫系統(tǒng)間存在密切的相互作用。初發(fā)AML 患者外周血中的自然殺傷（natural killer,NK）細(xì)胞及T 淋巴細(xì)胞絕對數(shù)量增加，但T 淋巴細(xì)胞異常的活化模式使其無法與白血病細(xì)胞間建立有效的免疫突觸[6]。此外，白血病干細(xì)胞間通過下調(diào)其表面NKG2D 配體，使其無法被NK 細(xì)胞識別，從而逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視[7-8]?；熀?，AML 患者的B 細(xì)胞功能受損，體液免疫恢復(fù)較慢，也為疾病復(fù)發(fā)提供了機(jī)會(huì)[9]?，F(xiàn)有研究多關(guān)注于AML 患者外周血淋巴細(xì)胞亞群，而鮮有骨髓中淋巴細(xì)胞亞群變化的報(bào)道。因此，本研究關(guān)注AML 患者骨髓淋巴細(xì)胞亞群的免疫功能，比較健康者與不同疾病狀態(tài)及不同預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)AML 患者的骨髓中淋巴細(xì)胞群體分布百分比，這可能較外周血更直接反映AML 發(fā)生、發(fā)展過程中機(jī)體免疫功能狀態(tài)的改變，可為臨床開展免疫相關(guān)治療提供有效依據(jù)。

資料與方法

一、資料

本研究回顧性分析2018 年6 月至2019 年12 月期間在上海市第一人民醫(yī)院確診并收治的131 例AML 患者 （包括初診未治療原發(fā)AML 患者、繼發(fā)AML 患者及化療緩解后首次復(fù)發(fā)AML 患者，排除急性早幼粒細(xì)胞白血病患者），同時(shí)對復(fù)發(fā)AML 患者進(jìn)行病史信息追溯，收集其初發(fā)AML 時(shí)的骨髓淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果。本研究納入的AML 患者年齡為17～78 歲，中位年齡為49 歲，其中男性患者82 例，女性患者49 例，男性多于女性。

另納入Oetjen 等[16]公布至Flow Repository 數(shù)據(jù)平臺的20 例健康志愿者骨髓樣本流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果數(shù)據(jù)資料作為對照。男性及女性各10 例，年齡為24～84 歲，中位年齡為52 歲，健康者與納入的AML 患者間的性別（P=0.33）及年齡（P=0.58）差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

二、方法

本研究中細(xì)胞遺傳學(xué)重排和基因突變檢測采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 及第二代測序方法[10-13]。AML診斷及危險(xiǎn)度分層參照2016 版世界衛(wèi)生組織發(fā)布的骨髓惡性腫瘤和急性白血病分類標(biāo)準(zhǔn)[14]及歐洲白血病網(wǎng) （European Leukemia Net，ELN） 發(fā)布的2017 版成人AML 診斷及治療建議[15]。經(jīng)患者知情同意后，采集骨髓樣本用于流式細(xì)胞術(shù)檢測及分析。

1.儀器及試劑：本研究采用的儀器包括三激光十色流式細(xì)胞儀[貝克曼庫爾特Navios 商貿(mào)（中國）有限公司]、低溫低速水平離心機(jī)（賽默飛世爾科技公司）。淋巴細(xì)胞亞群標(biāo)記采用直接標(biāo)記熒光抗體，包括CD45-KO、CD3-PE-Cy7、CD7-APC、CD4-PE-Cy5.5、CD8-PB、CD56-PE、CD19-PE-Cy7、CD20-PB 及CD5-FITC；采用紅細(xì)胞裂解液（Optilyse C）溶解骨髓紅細(xì)胞，以上產(chǎn)品均購自貝克曼庫爾特商貿(mào)（中國）有限公司。

2.檢測：初診患者取初診未治療之前的骨髓樣本；復(fù)發(fā)患者取化療緩解后首次復(fù)發(fā)時(shí)的骨髓樣本。采集患者骨髓樣本1～2 mL，置于肝素抗凝管中，在室溫下儲存，于4 h 內(nèi)進(jìn)行檢測。每份樣本分別進(jìn) 行T 淋巴細(xì)胞及NK 細(xì)胞（CD56、CD4、CD3、CD7、CD8、CD45） 和B 淋巴細(xì)胞（CD5、CD19、CD20、CD45）標(biāo)記。向流式細(xì)胞儀檢測管中分別加入熒光抗體各5 μL 和骨髓細(xì)胞5×106個(gè)/管，混勻后在室溫下避光孵育20 min；加入500 μL 紅細(xì)胞裂解液溶解骨髓紅細(xì)胞15 min；加入磷酸鹽緩沖液2 mL 洗滌細(xì)胞碎片，800×g 離心5 min 后，用500 μL 重懸細(xì)胞，并上機(jī)檢測。每檢測管獲取淋巴細(xì)胞10 000 個(gè)。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用貝克曼庫爾特Kaluza 2.3分析軟件，對健康者及AML 患者骨髓樣本淋巴細(xì)胞亞群流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果進(jìn)行設(shè)門分析。選取CD45+側(cè)向角散射光低的淋巴細(xì)胞群，分析CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T 淋巴細(xì)胞、CD8+T 淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞及CD19+B 淋巴細(xì)胞占總淋巴細(xì)胞群體的百分比。采用R 3.5.2 進(jìn)行數(shù)據(jù)資料處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。AML 組與健康對照組間性別比較采用Fisher確切概率，年齡比較采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)；2 組間淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果呈正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較，采用t 檢驗(yàn)；多組間比較，正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用ANOVA 單因素方差分析；配對樣本間比較，正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用配對樣本t 檢驗(yàn)。非正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)；P＜0.05 認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、一般臨床資料

131 例AML 患者的臨床信息及預(yù)后相關(guān)的細(xì)胞遺傳學(xué)異常見表1。本組包括AML 初診患者94 例，繼發(fā)患者18 例（包括骨髓增生異常綜合征轉(zhuǎn)化的AML 患者8 例，治療相關(guān)的AML 患者10 例），復(fù)發(fā)患者19 例。根據(jù)2017 年ELN 發(fā)布的遺傳學(xué)風(fēng)險(xiǎn)分層對94 例初診患者進(jìn)行預(yù)后分組，其中伴有融合基因 RUNX1-RUNX1T1、CBFB-MYH11、NPM1 突變不伴或伴低水平FLT3-ITD、CEBPA 雙突變的患者風(fēng)險(xiǎn)分類為良好，納入低危組，共36 例；伴有融合基因KMT2A 重排、野生型NPM1 伴高水平FLT3-ITD、RUNX1 突變（不伴有預(yù)后良好的融合基因及突變）、ASXL1 突變（不伴有預(yù)后良好的融合基因及突變）、TP53 突變的患者風(fēng)險(xiǎn)分類為不良，納入高危組，共31 例；NPM1 突變伴高水平FLT3-ITD、野生型NPM1 不伴或伴低水平FLT3-ITD、既非良好也非不良的細(xì)胞遺傳學(xué)異?；颊唢L(fēng)險(xiǎn)分類為中等，納入中危組，共27 例。各組間比較，性別（P=0.26）及年齡（P=0.19）差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、健康者及AML 患者的淋巴細(xì)胞亞群分布比較

與健康者相比，AML 患者骨髓中總T（CD3+）淋巴細(xì)胞百分比、CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比及NK 細(xì)胞百分比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而AML 患者骨髓中CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比則較健康者顯著升高[（31.73%±12.38%比21.40%±7.33%）]（P ＜0.001），CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比較健康者顯著降低（中位數(shù)9.62%比14.03%）（P＜0.01），CD4+/CD8+比值較健康者顯著降低（1.04 比1.48）（P＜0.05），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（見圖1）。根據(jù)發(fā)病原因及樣本采集時(shí)的疾病階段，將AML分類為初診、繼發(fā)和復(fù)發(fā)狀態(tài)。與健康者、初診AML 患者及繼發(fā)AML 患者比較，復(fù)發(fā)AML 患者骨髓中的CD3+T 細(xì)胞百分比、NK 細(xì)胞百分比有升高趨勢，CD4+T 細(xì)胞百分比有降低趨勢，但差異尚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。復(fù)發(fā)患者骨髓中的CD8+T細(xì)胞百分比顯著高于健康者 （P＜0.001）、初診患者（41.56%±11.64%比29.86%±12.20%）（P＜0.001） 及繼發(fā)AML 患者（P＜0.05）；初診AML 患者的CD8+T細(xì)胞百分比顯著高于健康者（P＜0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與健康者相比，初診組、繼發(fā)組及復(fù)發(fā)組AML 患者的CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比依次減低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；復(fù)發(fā)組的CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比顯著低于初診組（中位數(shù)4.18%比11.82%）（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。復(fù)發(fā)組的CD4/CD8 比值顯著低于健康組（P＜0.01）及初診組（0.59 比1.12）（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見圖2）。

表1 131 例AML 患者的細(xì)胞遺傳學(xué)異常[n（%）]

圖1 健康者與AML 患者骨髓樣本中淋巴細(xì)胞亞群比較

根據(jù)患者存在的細(xì)胞遺傳學(xué)異常，將初診AML 患者進(jìn)一步分為低危、中危及高危3 個(gè)不同預(yù)后組，3 組間的淋巴細(xì)胞亞群分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。復(fù)發(fā)患者骨髓中CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比均較不同預(yù)后的初診組顯著增高（見圖3），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。預(yù)后良好的初診低危組患者骨髓中CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比顯著高于復(fù)發(fā)患者 （P＜0.01），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。低危及高危的初診患者CD4+/CD8+比值顯著高于復(fù)發(fā)患者（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖2 健康者與不同疾病階段AML 患者骨髓樣本中淋巴細(xì)胞亞群比較

圖3 不同危險(xiǎn)度分層的初診AML 與繼發(fā)、復(fù)發(fā)患者骨髓中淋巴細(xì)胞亞群比較

三、復(fù)發(fā)AML 患者初發(fā)與復(fù)發(fā)狀態(tài)的骨髓淋巴細(xì)胞亞群分布配對比較

回顧性分析19 例復(fù)發(fā)AML 患者初診時(shí)的臨床資料，其中15 例患者可進(jìn)行配對淋巴細(xì)胞亞群比較分析。結(jié)果顯示，CD19+B 淋巴細(xì)胞在AML 復(fù)發(fā)時(shí)顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （2.40%比12.41%，P＜0.05）（見圖4）；初發(fā)與復(fù)發(fā)狀態(tài)配對比較，T 淋巴細(xì)胞百分比及NK 細(xì)胞百分比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖4 15 對AML 患者初發(fā)與復(fù)發(fā)骨髓樣本中淋巴細(xì)胞亞群配對比較

討 論

一、AML 患者骨髓中淋巴細(xì)胞亞群分析的重要性

外周血淋巴細(xì)胞亞群分析已廣泛用于臨床，以評價(jià)自身免疫性疾病、過敏及腫瘤等患者的機(jī)體免疫功能狀態(tài)。在總T 細(xì)胞中，CD4+T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)輔助細(xì)胞及體液免疫功能，CD8+T 細(xì)胞發(fā)揮抑制或殺傷功能效應(yīng)，CD19+B 細(xì)胞主要負(fù)責(zé)體液免疫，產(chǎn)生抗原特異性抗體，NK 細(xì)胞則發(fā)揮非特異性細(xì)胞毒性效應(yīng)?，F(xiàn)已有較多研究關(guān)注AML 患者外周血中淋巴細(xì)胞亞群的變化，結(jié)果顯示新發(fā)AML 患者外周血中的淋巴細(xì)胞CD3+T 淋巴細(xì)胞百分比、CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值均較健康者顯著降低[17-19]。但至今鮮有針對AML 患者骨髓中淋巴細(xì)胞變化的相關(guān)研究。本文研究結(jié)果顯示，初診AML 患者骨髓中的CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比較健康者顯著增高，而CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值則較健康人顯著降低，表明AML 患者骨髓中的淋巴細(xì)胞亞群變化模式與外周血雖有一致的趨勢，但并不完全同步，有必要進(jìn)一步研究。骨髓是人體重要的免疫器官，T、B 系祖細(xì)胞均來源于骨髓，除T 淋巴細(xì)胞外，B 淋巴細(xì)胞和部分NK細(xì)胞在骨髓中分化、發(fā)育、成熟后釋放至外周。另一方面，髓系白血病發(fā)生、發(fā)展過程中患者的骨髓微環(huán)境也發(fā)生相應(yīng)的改變，可能會(huì)影響淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生及功能狀態(tài)。因此，相較于外周血，分析骨髓淋巴細(xì)胞亞群分布可以更準(zhǔn)確地反映患者疾病狀態(tài)與免疫功能間的相關(guān)性。

近年來，越來越多的研究顯示，抗-CTLA4、抗PD-1 等免疫檢查點(diǎn)抑制劑可活化抑制性T 細(xì)胞，顯著改善實(shí)體腫瘤患者的生存期，表明充分調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫監(jiān)視功能，可有效識別和清除體內(nèi)的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞，為臨床抗腫瘤治療提供新的思路和有效手段[20]。與實(shí)體腫瘤不同，白血病患者的病變部位主要在骨髓和外周血，病變細(xì)胞與淋巴細(xì)胞在空間上有著更加緊密、直接的接觸及相互作用，并且造血干細(xì)胞移植、供者淋巴細(xì)胞輸注介導(dǎo)移植物抗腫瘤效應(yīng)更體現(xiàn)出免疫治療在血液系統(tǒng)腫瘤治療中的應(yīng)用價(jià)值。因此，分析和比較AML 發(fā)生、發(fā)展過程中患者骨髓淋巴細(xì)胞亞群分布情況，了解機(jī)體免疫狀態(tài)，對于AML 治療有一定的指導(dǎo)意義。

二、AML 患者骨髓淋巴細(xì)胞亞群的變化及意義

Williams 等[21]在骨髓免疫組化研究中發(fā)現(xiàn)，AML患者骨髓中總T 淋巴細(xì)胞絕對數(shù)及所占淋巴細(xì)胞的比例與健康者相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但采用流式細(xì)胞儀分析骨髓CD45+側(cè)向角散射光低的細(xì)胞群后發(fā)現(xiàn)，AML 患者的總T 淋巴細(xì)胞比例較健康者顯著增高。本研究結(jié)果顯示，與健康者相比，AML 患者骨髓中的總T 淋巴細(xì)胞和NK 細(xì)胞在淋巴細(xì)胞中的百分比雖有增高趨勢，但差異尚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而AML 患者骨髓中的B 淋巴細(xì)胞百分比較健康者顯著降低。筆者推測其原因可能是由于B系祖細(xì)胞由骨髓造血干細(xì)胞分化而來，發(fā)生AML時(shí)，白血病細(xì)胞克隆性增殖抑制了骨髓的正常造血，阻礙了B 淋巴細(xì)胞的分化、發(fā)育和成熟，而T 淋巴細(xì)胞則在胸腺分化發(fā)育成熟后通過淋巴及血循環(huán)遷移至全身免疫器官和組織，因此其比例分布較少受到骨髓白血病細(xì)胞的影響。NK 細(xì)胞由NK 前體細(xì)胞分化而來，在骨髓中造血干細(xì)胞可分化為NK 前體細(xì)胞，進(jìn)而發(fā)育為成熟NK[22]。此外，胸腺中的胸腺前體細(xì)胞亦可分化為NK 前體細(xì)胞[23-24]，周圍淋巴器官如脾臟、淋巴結(jié)、扁桃體等中也存在NK前體細(xì)胞[25]，提示這些組織器官均可能是NK 細(xì)胞發(fā)育分化的場所。因此，NK 細(xì)胞亦較少受到病變骨髓微環(huán)境的影響。本研究結(jié)果顯示，與健康人相比，AML 患者骨髓中CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比顯著增高，導(dǎo)致CD4+/CD8+比值顯著下降，這與Williams 等[21]報(bào)道的結(jié)果一致。研究顯示，占比增高的CD8+T 淋巴細(xì)胞表面表達(dá)高水平的免疫檢查點(diǎn)分子OX40及PD-1，因此增高的CD8+T 淋巴細(xì)胞處于免疫抑制狀態(tài)，無法發(fā)揮正常的識別和殺傷白血病細(xì)胞效應(yīng)[26]。Knaus 等[27]發(fā)現(xiàn)，將來源于AML 患者的外周血CD8+T 淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)，給予OX40 配體或PD-1 抗體，可以部分逆轉(zhuǎn)其細(xì)胞毒性功能。

三、不同疾病階段及預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)的AML 患者骨髓淋巴細(xì)胞亞群的變化

本研究進(jìn)一步分析患者中初診、繼發(fā)及復(fù)發(fā)AML 患者，發(fā)現(xiàn)相較于健康者及初診AML 患者，復(fù)發(fā)患者CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比進(jìn)一步升高，相反CD4+/CD8+比值、CD19+B 淋巴細(xì)胞進(jìn)一步減低。Williams 等[21]發(fā)現(xiàn)，多次復(fù)發(fā)的AML 患者其骨髓中PD-1+CD8+T 淋巴細(xì)胞比例較初發(fā)或首次復(fù)發(fā)的AML 患者顯著增高，表明復(fù)發(fā)AML 患者的骨髓微環(huán)境處于持續(xù)抑制狀態(tài)，與本研究結(jié)果中復(fù)發(fā)患者CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比顯著升高、B 淋巴細(xì)胞增殖障礙相吻合。Goswami 等[9]的研究發(fā)現(xiàn)，化療后AML 患者外周血中的B 淋巴細(xì)胞比例較健康者顯著降低，且B 淋巴細(xì)胞中具有抗體產(chǎn)生功能的亞群比例較健康者顯著降低，認(rèn)為化療干擾骨髓中B淋巴細(xì)胞的增殖及分化。本研究回顧分析復(fù)發(fā)AML 患者初發(fā)時(shí)的病史信息，明確復(fù)發(fā)的AML 患者均曾接受連續(xù)的鞏固化療。然而，初診AML 患者治療前低、中、高危3 組的骨髓CD19+B 淋巴細(xì)胞中位百分比逐漸降低，繼發(fā)和復(fù)發(fā)AML 患者的骨髓CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比則進(jìn)一步降低，提示隨著預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)的增加，骨髓中CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比存在下降趨勢（見圖3）。因此，AML 復(fù)發(fā)與骨髓中CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比下降間的關(guān)系有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

四、本研究的特色及不足之處

在臨床上，骨髓穿刺術(shù)采集患者骨髓液屬于侵入性有創(chuàng)操作，故極少采集健康者骨髓樣本。因此，目前在檢測和分析患者骨髓免疫功能狀態(tài)時(shí)，缺乏健康對照組進(jìn)行比較分析。本研究選取Oetjen 等[16]發(fā)布共享的20 例健康志愿者骨髓流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果數(shù)據(jù)，經(jīng)分析顯示，該組健康者性別及年齡分布與本研究患者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故采用與AML 患者相同的設(shè)門策略分析，獲得健康者骨髓淋巴細(xì)胞亞群數(shù)據(jù)。此方法既充分利用了共享的稀缺樣本資源，又完善了比較分析。

本研究也有一些不足之處。首先，由于臨床上健康骨髓樣本難以采集，且現(xiàn)有公共數(shù)據(jù)平臺中缺乏中國人群健康骨髓樣本信息，故本研究采用國外健康人數(shù)據(jù)與中國AML 患者進(jìn)行比較，無法避免人種差異帶來的影響；同時(shí)，來自公共數(shù)據(jù)庫的健康者骨髓淋巴細(xì)胞亞群檢測所標(biāo)記的熒光抗體與本研究不同，但該因素對研究結(jié)果的影響較小。其次，本研究僅分析了骨髓淋巴細(xì)胞中T 淋巴細(xì)胞、NK 細(xì)胞及B 淋巴細(xì)胞的相對百分比，缺乏絕對計(jì)數(shù)的比較，也未對各淋巴細(xì)胞群體進(jìn)行功能分析，限制了筆者全面解析AML 患者的骨髓免疫功能狀態(tài)。最后，本研究為回顧性分析，未對患者進(jìn)行跟蹤隨訪，未進(jìn)行骨髓免疫功能狀態(tài)改變與患者預(yù)后的相關(guān)性分析，這將在今后的研究中進(jìn)一步完善。

總之，本研究結(jié)果顯示，AML 患者尤其是復(fù)發(fā)患者的骨髓CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比顯著增高，CD19+B 淋巴細(xì)胞百分比顯著降低，提示在白血病細(xì)胞的作用下，骨髓免疫功能受到顯著抑制，因此分析骨髓淋巴細(xì)胞亞群分布有助于醫(yī)師了解AML患者的骨髓免疫功能狀態(tài)，為免疫相關(guān)治療提供了理論依據(jù)。