姜麗瓊, 李文俊, 肖前剛, 陳文靈, 徐志萍, 浣杰, 楊洪燕, 楊敏
成都市農(nóng)林科學院,四川 成都 611130
重樓(Paris polyphylla)是百合科(Liliaceae)重樓屬(Paris)多年生草本植物的統(tǒng)稱[1],藥用價值較高,具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚的功效[2]?;瘜W成分主要包括甾體皂苷類、植物蛻皮激素類、植物甾醇類、黃酮類等,兼具抗腫瘤、抗氧化、抗菌等藥理作用,可用于治療瘡癰腫痛、咽喉腫痛、蛇蟲咬傷、跌撲傷痛、驚風抽搐等癥[3]。重樓資源分布廣蘊藏量大,歷來為區(qū)域內(nèi)漢、彝、白、苗、傈僳、納西等各民族人民重要的習用藥材[4],成都地區(qū)在龍門山脈(包括都江堰、彭州、大邑等)一帶均有分布。重樓生長慢、成藥期長都地區(qū)在龍門山脈(包括都江堰、彭州、大邑等)一帶均有分布。重樓生長慢、成藥期長[5],藥用需求大,中國重樓的消費量遠遠大于野生儲存量的總和[6],并且隨著重樓市場價格持續(xù)上漲,導(dǎo)致中、低海拔的野生重樓資源遭到掠奪式采挖,重樓資源瀕臨枯竭[7]。
重樓的繁殖方式主要有種子繁殖和地下莖切割繁殖兩種。地下莖切塊繁殖是最為常用、成熟的種苗繁殖方式,但該方法存在損耗大、種苗成本高、繁殖系數(shù)低、種苗退化,與藥材市場爭奪根莖原料等問題,并且隨著野生資源越來越少,莖切割繁殖不能滿足生產(chǎn)需要[8];相比之下重樓種子繁殖具有繁殖系數(shù)大,能夠有效獲得大量種苗的優(yōu)勢。重樓果實為蒴果或漿果狀蒴果,綠色果皮近球形,成熟時果皮自然開裂,光滑或具棱,果實含種子,種子數(shù)量不一,少則數(shù)粒、多則上百粒。種子由種皮、胚、胚乳3個主要部分組成。重樓種子的休眠類型為綜合性休眠,在果實成熟后胚發(fā)育還不完全,且種皮和胚乳中存在萌發(fā)抑制物[9],有“二次休眠”特性,種子發(fā)芽周期長,發(fā)芽率低,并且出苗時間不一致,出苗不整齊,在自然條件下,需要兩冬一夏才能萌發(fā)[10]。針對重樓種子育苗周期長,出苗率低,出苗不整齊的技術(shù)問題,開展了重樓種子育苗技術(shù)研究,以期解決重樓種子育苗周期長,出苗率低,出苗不整齊的技術(shù)問題,為重樓種子育苗提供參考依據(jù)。
1.1.1 采種
待蒴果開裂后種皮變成深紅色時采收,一般在9—10月份進行采收。
1.1.2 選種與預(yù)處理
種子采收后,盡快去掉綠色果皮,取出紅色種子,在清水中浸泡24 h后,與少量沙子混合搓洗掉深紅色的外種皮,選飽滿、成熟、無病蟲害、無霉變和損傷的重樓種子做種,將種子放在500倍的多菌靈液中浸種60 min后放在通風陰涼處晾干種子表面水分備用。
育苗盤50 cm×50 cm,育苗基質(zhì)統(tǒng)一使用腐殖土,除特殊育苗基質(zhì)處理方案除外。把準備好的基質(zhì)放入50 cm×50 cm育苗盤中,裝至2/3處,處理好的種子用點播的方式播種在盤中,播種密度為150?!けP?1,種子點播后覆蓋一層基質(zhì),基質(zhì)厚度為種子的2至3倍,加蓋稻草,500 mg·L?1的多菌靈水澆灌,進行日常管理。
1.2.1 雙低雙高法催芽處理
重樓常規(guī)種子育苗需要兩冬一夏才能萌發(fā)的特點,采用雙高雙低法即通過高低溫度交替的方式對種子進行催芽,打破休眠,促進種子萌發(fā)。本試驗將種子與沙按1∶2的比例混合均勻,濕度達到30%~40%,捏起成團,松開及散的狀態(tài),并用通風透氣的布袋裝好,依次放在4 ℃的冰箱中60 d、18~20 ℃中培養(yǎng)90 d、4 ℃的冰箱中45 d、18~20 ℃中培養(yǎng)45 d后進行播種,觀測其出苗率。每隔7~10 d對種子進行翻轉(zhuǎn),檢查沙子濕度,查看是否有霉變,控制濕度在30%~40%之間。本試驗設(shè)置5個重復(fù)組和1個對照組(種子預(yù)處理后直接播種)。
1.2.2 沙藏法催芽處理
沙藏法是利用層積催芽的方式解除種子休眠,沙與種子按5∶1的比例混合均勻,濕度達到30%~40%(即捏起成團,松開及散的狀態(tài)),置于18~22 ℃的環(huán)境中培養(yǎng),大部分種子胚根長出1 cm左右后播種,觀測其出苗率。并周期性的檢查并保持沙子的濕度。本試驗設(shè)置3個重復(fù)組與1個對照組(種子預(yù)處理后直接播種)。
1.2.3 赤霉素催芽處理
重樓種子在萌發(fā)的過程中,種子的內(nèi)源激素會發(fā)生變化,因此可以用激素促進種子萌發(fā)[8]。本試驗分別用0 mg·L?1、50 mg·L?1、100 mg·L?1、200 mg·L?1、300 mg·L?1赤霉素對種子進行24 h的處理,后用通風透氣的布袋裝好,放在4 ℃的冰箱中120 d后進行播種,觀測其出苗率。
1.2.4 不同育苗基質(zhì)和赤霉素處理
分 別 用0 mg·L?1、50 mg·L?1、100 mg·L?1、200 mg·L?1、300 mg·L?1赤霉素對種子進行24 h的處理后,播種于腐殖土、腐殖土+沙、園土+沙、腐殖土+椰磚+沙4種不同的基質(zhì)中,觀測其出苗率。
1.2.5 種子大小對萌發(fā)率的影響
種子成熟度越高,種子越大越飽滿,種子的發(fā)芽效果越好,但種子過大發(fā)芽需要的水分較多,種子過小營養(yǎng)較少易弱苗。重樓種子按照雙高雙低法處理后,按面積(S=πab)計算法分為5個等級,分別 為S<0.5 cm2、0.5 cm21.0 cm2,播 種,觀測其出苗率,探究種子育苗用種的最佳種子大小。
對萌發(fā)時間、萌發(fā)粒數(shù)和生長情況等試驗數(shù)據(jù)進行收集,并對收集的試驗數(shù)據(jù)進行整理,得出重樓播種育苗最佳的技術(shù)方法。
通過雙低雙高法,交替高低溫處理重樓種子,結(jié)果表明,重樓種子經(jīng)過雙低雙高法處理后播種,種子大約110 d左右開始萌發(fā),對照則需要224 d,明顯提前了約110 d。并且萌發(fā)率較高,平均達75.47%,最高可以達到82.00%,而對照僅為38%(見表1)。
沙與種子混合,利用層積催芽的方式,促使種子萌發(fā),結(jié)果表明:沙與重樓種子5∶1混合處理后,種子的萌發(fā)時間在140 d左右,明顯要高于對照的210 d,但萌芽率較低,平均40%,與對照30.95%差別不顯著(見表2)。
重樓種子經(jīng)過赤霉素處理后,其萌發(fā)時間稍有提前,從227 d提前至200 d左右,但效果不明顯;萌芽率也有所提高,但與對照相比效果不明顯(見表3)。
表1 雙低雙高處理種子萌發(fā)情況Tab.1Seed germination under double-low and double-high alternate temperature treatment
表2 沙藏法處理種子萌發(fā)情況Tab.2Seed germination under sand storage method treatment
表3 不同赤霉素濃度處理種子萌發(fā)情況Tab.3Seed germination under different gibberellin concentrations treatment
從上表可以看出,
分 別 用0 mg·L?1、50 mg·L?1、100 mg·L?1、200 mg·L?1、300 mg·L?1赤霉素處理種子24 h后,分別播種于腐殖土、腐殖土+沙、原土+沙、腐殖土+椰磚+沙4中混合基質(zhì)中,結(jié)果表明:腐殖土+椰磚+沙的效果最好,種子的萌發(fā)時間從210 d提前至172 d,萌芽率為52%,明顯高于對照的30.95%。不同赤霉素濃度的處理上,100 mg·L?1和200 mg·L?1的效果較好,萌發(fā)時間從210 d提前至175 d左右,萌芽率也有明顯提高,從30.95%提高48%,但萌芽率仍然偏低(見表4)。
重樓種子的面積越大其萌芽率反而有所下降,面積S>1.0 cm2時,萌芽率只有55.33%,而面積S為0.5 cm23 小結(jié)與討論
常規(guī)的重樓種子播種育苗,要經(jīng)過1~2個冬天才能陸續(xù)出土成苗,出苗周期較長210 d,不整齊,且出苗率低至30%左右,重樓本身種子產(chǎn)量就非常低,加上傳統(tǒng)種子播種育苗的困難,是重樓種苗一直稀缺的主要原因。針對重樓種子育苗周期長,出苗率低,出苗不整齊的技術(shù)問題,通過本研究,沙藏法和赤霉素處理種子,萌發(fā)時間雖然有所提前,但萌芽率提高不明顯。采用雙低雙高交替溫度催芽法模擬自然萌發(fā)條件處理種子后,以腐殖土+椰磚+沙混合基質(zhì)為育苗基質(zhì)進行播種,育苗效果最佳,能夠提前解除種子休眠,提前萌發(fā),縮短出苗周期,提高出苗率,萌發(fā)時間僅為120 d左右,萌芽率高達82%,出苗時間短,出苗率高,出苗整齊。
表4 不同基質(zhì)和赤霉素(GA3)濃度處理種子萌發(fā)情況Tab.4Seed germination under different substrates and gibberellin (GA3) concentrations treatment
表5 不同種子大小種子萌發(fā)情況Tab.5Seed germination with different seed sizes treatment
重樓果實為蒴果或漿果狀蒴果,要待蒴果開裂成熟后種皮變成深紅色時采收,一般在9—10月份進行采收。采收后去除紅色的外種皮,在播種前用雙低雙高法處理,隨后進行播種,其萌發(fā)時間僅為120 d左右,萌芽率最高可以達到82%,明顯的高于對照的210 d,38%的萌芽率。
通過對幾種基質(zhì)的播種試驗,腐殖土+椰磚+沙的效果較好,萌發(fā)時間為170 d,萌芽率為52%,明顯的高于對照的213 d,30.95%的萌芽率。說明椰磚土增加了土壤的通透性,效果顯著。
重樓種子萌發(fā)周期較長,在這期間,要隨時注意土壤的水分管理,同時要進行弱光培養(yǎng),待種子萌發(fā)后,揭開稻草,并給予一定的光照。在整個培養(yǎng)過程中,要定期的噴灑殺菌劑。