周云，史書源，宋金金，趙松，鄧婷

（安康學院化學化工學院，陜西安康 725000）

蜂蜜是一種含有多種營養(yǎng)成分的天然食品，還具有多種功能，如抗氧化性、促進細胞恢復活力、防止機體衰老等。中蜂蜜中含有黃酮、酚酸、酶類（葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶）、抗壞血酸、美拉德反應產物、類胡蘿卜素、有機酸、氨基酸和蛋白質等抗氧化成分[1]。對大鼠進行灌蜜實驗，可以測定中蜂蜜對大鼠運動能力及抗氧化能力的影響。目前此實驗在生理和藥理方面研究相對廣泛，但其對耐力訓練大鼠運動能力及過氧化氫酶（CAT）活力變化的影響研究不夠詳細。本研究通過建立大鼠強度耐力訓練運動模型（基于Bedford模型[2]）以及對大鼠進行灌蜜實驗，探究中蜂蜜對大鼠清除自由基能力的影響。通過檢測大鼠肝組織內CAT活力變化，反映抗氧化能力的強弱[3]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

24只雄性大鼠，體重140～200 g，購置于西安交通大學醫(yī)學部；蜂蜜于2018年6月19日采自安康寧陜縣新廠村，避光常溫保存。雙縮脲和過氧化氫酶測試盒，由南京建成生物工程研究所提供[4]；乙醚、98%冰醋酸、98%乙醇，分析純，天津市化學試劑六廠。

1.2 儀器

電動跑臺，中國杭州段氏器械公司；TGL-16G臺式高帶冷凍離心機，上海安亭科學儀器廠；721B型分光光度計，上海第三分析儀器廠；751B型紫外分光光度計，上海第三分析儀器廠；DK-98-1A恒溫浴鍋，天津泰斯特有限公司；BCD-203A容聲冰箱，中國科龍電器股份有限公司；Bonso-TCS-2000A電子秤，武漢自動化儀表廠。

1.3 試驗方法

1.3.1 動物分組及給藥

24只大鼠分為3組，安靜組、運動組、運動加蜜組各2籠，每籠4只[5]。大鼠適應性靜養(yǎng)7 d后，運動組、訓練加蜜組按照表1進行每周的運動跑臺（坡度0°）窄道大鼠力竭運動實驗，觀察記錄兩組老鼠在運動跑臺上的表現，并用木棍、刷子、小型電機在其尾部、屁股、四肢進行刺激，促使大鼠在運動跑臺上進行力竭運動。運動加蜜組大鼠每天喂食5 mL蜂蜜水，配制方法為用生理鹽水將2 g蜂蜜定容至5 mL；其余兩組每天喂食5mL生理鹽水。

表1 實驗運動大鼠運動方案

1.3.2 運動樣品制備

在第8周運動組、運動加蜜組訓練結束后，用乙醚對大鼠實行輕度麻醉，用圖釘固定住老鼠的四肢在木板上，并對24只雄性大鼠進行活體取肝。取出后迅速用冰生理鹽水進行沖洗，沖洗3次，用濾紙擦干，放于-40℃冰箱種冷凍保存。剪待測組織0.1～2.0g，用醫(yī)用剪刀剪碎，將其與生理鹽水按1∶9進行配比，生理鹽水配比是分3次倒入小燒杯中，第一次將小燒杯中組織倒入研磨棒，第二次用生理鹽水將小燒杯表面雜質去除，第三次用生理鹽水去除研磨棒上的組織，進行研缽，待組織研缽成勻漿狀態(tài)（液肉分離）后，倒入干凈離心管中分別在2 500r/min、3 000 r/min、3 500 r/min、4 000 r/min條件下離心，時間10～15min，待組織勻漿制備完全后進行測定。

1.3.3 測試方法

CAT活力測試方法：將肝臟組織制備為組織勻漿，通過分光光度計在405 nm處測定其吸光度，帶入公式1可求出CAT的活力。

2 結果與分析

2.1 中蜂蜜對大鼠力竭運動的影響

不同組的力竭運動時間和平均運動距離見圖1和圖2。由圖1和圖2可以得出，運動加蜜組的力竭運動時間大于運動組，且運動加蜜組的運動距離也大于運動組。運動組由于長時間力竭運動，體內自由基無法快速清除，導致機體與細胞損傷，故力竭運動時間會大幅減少。但運動加蜜組大鼠的力竭運動時間比運動組大大增加，說明蜂蜜可以有效提高大鼠的機體運動能力。

圖1 不同組的力竭運動時間

圖2 不同組的平均運動距離

2.2 蜂蜜對各個實驗組大鼠肝組織中CAT活力的影響

運動訓練大鼠肝組織CAT活性見表2。由表2可以得出，運動加蜜組CAT活力數值遠遠大于運動組，即認為蜂蜜能夠有效地促進肝臟組織CAT活力增強，提高實驗大鼠機體的抗氧化性能。

表2 運動訓練大鼠肝組織CAT活性

SAT是催化過氧化氫分解成氧和水的酶[6]，普遍存在于動物體內，特別在動物肝臟中以高濃度存在[7]。過氧化氫是機體運作過程中產生的一種副產物，對機體的生長和恢復有一定的負面作用。為了防止這種侵害，過氧化氫必須被快速地轉化為其他無害或毒性較小的物質，而過氧化氫酶就是分解過氧化氫的一類酶[8]。

大鼠肝臟參與機體的正常代謝，產生的過氧化氫酶能夠留存于其內[9]。短時間的力竭運動會導致耗氧量增大，自由基積聚，從而導致機體中的細胞以及各種結構受到影響。若肝臟中的過氧化氫酶活性能夠大幅增加，則其抗氧化性能（清除自由基能力）也大幅增大[10]。

運動加蜜組的CAT活力較運動組有所提高，能夠直接說明蜂蜜對機體具有明顯的抗氧化性。肝臟內CAT活力大幅增加，結合運動加蜜組大鼠力竭運動時間延長、運動距離增加，說明蜂蜜能夠促進大鼠運動耐力的提高，即過氧化氫酶能發(fā)揮更高效的作用，從而有效清除體內自由基。

3 結論

運動加蜜組大鼠的力竭運動時間和肝臟CAT活力均大于運動組，說明用蜂蜜作為抗氧化性物質能夠明顯增強CAT活力，抑制大鼠由于力竭運動產生的氧化反應，中蜂蜜可以用作保健型產品的研發(fā)和生產。