薛天星
中圖分類號:S858.31? ? ?文獻標(biāo)識碼:C? ? ?文章編號:1673-1085(2020)9-0027-03
在不采取防控措施的雞群中,腫瘤病不僅發(fā)病率高、死亡率高,而且有多種不同的病毒可誘發(fā)腫瘤。此外,每一種病毒誘發(fā)腫瘤的組織器官分布和細(xì)胞類型還表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)亩鄻有?。在典型病例,不同病毒誘發(fā)的腫瘤有一定的特征,但在現(xiàn)場看到的腫瘤病例,卻常常不那么典型;另一方面,即使是同一種病毒,在不同品種、不同年齡、不同免疫或感染狀態(tài)下不同個體發(fā)生的腫瘤差異也可能非常大。
在雞群中,最常見的致腫瘤性病毒有3種,即馬立克氏病病毒(MDV)、雞白血病病毒(ALV)和雞網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病毒(REV)。此外,由雞戊型肝炎病毒誘發(fā)的肝脾、腺胃腫大以及肝、脾、腎變性或壞死,通稱為雞大肝大牌病,也很容易被雞場的獸醫(yī)技術(shù)人員或飼養(yǎng)員誤判為腫瘤。因此,雞群中腫瘤病的鑒別診斷,一直困擾著禽病診斷實驗室及禽病專家。在雞群中不僅常常存在著這幾種病毒不同組合的二重感染,甚至還可能同時存在這3種病毒。這不僅給鑒別診斷帶來困難,也使預(yù)防控制措施變得更為復(fù)雜。為了確定腫瘤問題的發(fā)生原因及找到解決的方法,必須依賴于準(zhǔn)確的鑒別診斷。
1? 診斷要點
在進行人和大動物腫瘤病的鑒別診斷時,針對的是臨床個例,只要確定腫瘤發(fā)生的器官位置及細(xì)胞類型就可完成診斷目的。但對規(guī)?;曫B(yǎng)的雞群來說,必須要弄清引發(fā)腫瘤的病因,即究竟是哪種病毒引發(fā)的腫瘤。只有這樣才可能闡明究竟在養(yǎng)雞生產(chǎn)的哪一個代次、哪一個環(huán)節(jié)出了問題,從而為預(yù)防下一批雞的腫瘤病提供具體措施。但在雞群中由MDV、REV、ALV誘發(fā)的腫瘤既有差別,又易混淆,因此必須從不同角度收集資料,通過綜合比較才能做出比較客觀、有說服力的結(jié)論。
2? 流行病學(xué)資料
腫瘤開始出現(xiàn)及發(fā)病高峰時病雞的年齡,對于不同病毒引發(fā)雞的腫瘤的鑒別有重要參考價值。一般來說,MDV誘發(fā)的腫瘤可以從2月齡開始,偶爾在1月齡就可出現(xiàn),但腫瘤死亡的高峰多在3~4月齡左右。MDV誘發(fā)的腫瘤發(fā)病率隨MDV疫苗免疫質(zhì)量不同而可能有很大差異。
經(jīng)典的A、B、C、D亞型ALV誘發(fā)的淋巴樣腫瘤多在6月齡以后才會出現(xiàn),但一般死亡率不會太高,國內(nèi)近20年中很少見有5%以上的死亡率。ALV-J引發(fā)的骨髓樣細(xì)胞瘤發(fā)生得較早一點,在開產(chǎn)前的16~18周齡就可開始,但發(fā)病死亡的高峰是在開產(chǎn)后,嚴(yán)重的每周死亡率可達1%,并持續(xù)數(shù)周。
單純由REV引發(fā)腫瘤的自然發(fā)病并不常見,發(fā)病多在6月齡以后,我國雞群中近幾年見到的多因為雛雞接種的弱毒疫苗中污染REV所致。在這種情況下,腫瘤發(fā)生較早,發(fā)病率也高,但究竟是MDV腫瘤還是REV腫瘤還需實驗室檢測。
3? 病理剖檢變化
MDV、REV和A、B、C、D亞型ALV誘發(fā)的淋巴樣細(xì)胞瘤,均可出現(xiàn)在不同的臟器,在形態(tài)大小和數(shù)量上也是多種多樣,很難鑒別診斷。但是,由ALV-J引發(fā)的骨髓樣細(xì)胞瘤比較有特征性,大多數(shù)病雞都表現(xiàn)為肝顯著腫大,肝臟上有無數(shù)呈彌漫性分布的針頭或針尖大小的白色腫瘤結(jié)節(jié)。病雞一旦出現(xiàn)這種病理變化,一般就可作出ALV-J引發(fā)骨髓樣細(xì)胞瘤的判斷。因為迄今為止還很少由其他亞型ALV或由MDV和REV引發(fā)腫瘤時會出現(xiàn)這種病理變化。但是,要注意與肝變性引發(fā)的白色斑點相區(qū)別。在ALV-J誘發(fā)的腫瘤病病雞的脾臟也常常腫大并顯出腫瘤結(jié)節(jié)。這時,要注意與雞戊型肝炎引發(fā)的大肝大脾相區(qū)別。后者主要是炎性細(xì)胞浸潤或壞死、充血引起的大肝大脾,嚴(yán)重時還迸發(fā)肝破裂出血。
此外,近幾年,在蛋雞腳爪、翅等處皮膚常發(fā)現(xiàn)一些出血不止的血管瘤,這很可能是由不同亞型的ALV引起的。
4? 病理組織學(xué)觀察
這是腫瘤病鑒別診斷的重要依據(jù)之一,特別是根據(jù)用蘇木素-伊紅染色(H.E染色)的組織切片進行觀察,可初步判斷是否是腫瘤性病變還是其他病變。但是在雞的腫瘤中,由MDV、REV和A、B、C、D亞型ALV誘發(fā)的腫瘤多為淋巴細(xì)胞瘤。MDV誘發(fā)的主要是細(xì)胞大小不均一的T淋巴細(xì)胞瘤,而ALV誘發(fā)的是大小相對均一的B淋巴細(xì)胞瘤,REV誘發(fā)的腫瘤既可以是T淋巴細(xì)胞瘤也可能是B淋巴細(xì)胞瘤。這使得最常見的淋巴細(xì)胞瘤的病因鑒別更為復(fù)雜。相對而言,由ALV-J引發(fā)的骨髓樣細(xì)胞瘤的組織學(xué)病理變化比較有特征性,即可見大量的、單一的骨髓樣細(xì)胞瘤細(xì)胞,這類細(xì)胞形態(tài)較大,其細(xì)胞質(zhì)中有嗜酸性顆粒。雖然A、B、C、D亞型ALV也可能引發(fā)類似的骨髓樣細(xì)胞瘤,但比較少見,在發(fā)病雞群中比例不會很高;另一方面,要注意把骨髓樣細(xì)胞瘤浸潤與中性粒細(xì)胞的炎性細(xì)胞浸潤相區(qū)別。因為中性粒細(xì)胞在形態(tài)大小上與骨髓樣細(xì)胞瘤細(xì)胞非常類似,在細(xì)胞質(zhì)中也有嗜酸性顆粒。例如,在雞戊型肝炎病毒引發(fā)的肝腫大,在一定發(fā)病時期,就可能見到中性粒細(xì)胞的炎性浸潤。
一般來說,骨髓樣細(xì)胞瘤中的細(xì)胞成分很均一,而在炎性浸潤時,除了中性粒細(xì)胞外,還可能有其他不同類型的炎癥細(xì)胞,如淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等。當(dāng)然,在臨床上還可能見到其他不同細(xì)胞類型的腫瘤,但其發(fā)病率不高,很少大批發(fā)生。從生產(chǎn)角度考慮,不大可能也不需要逐一完成鑒別診斷。雖然病理組織學(xué)觀察很重要,也很有鑒別診斷價值,但目前大多數(shù)禽病專家已認(rèn)識到,單一靠HE染色病理組織學(xué)切片的觀察結(jié)果不足以作出確鑿的鑒別診斷。
5? 病理切片的免疫組織化學(xué)法檢測
利用MDV、REV或ALV特異性的單克隆抗體或單因子血清,對腫瘤組織切片免疫組化染色顯示病毒特異性抗原有助于判斷引發(fā)腫瘤的病因。但這一方法的技術(shù)難度較大,目前還沒有普遍采用;另一方面,利用腫瘤細(xì)胞特定的細(xì)胞類型的表面標(biāo)志蛋白的特異性抗體做免疫組化,也是正在研究中的新方法。
6? 病毒的分離鑒定
將腫瘤組織懸液或疑似腫瘤病雞血漿接種雞胚成纖維細(xì)胞分離病毒,是確定患有腫瘤的雞群中有哪種腫瘤性病毒感染的最直接依據(jù)。
如果我們對一群雞檢測了一定數(shù)量的個體和樣品,如果某腫瘤病病毒的檢出率比較高,可判斷為該群雞發(fā)生腫瘤的主要傳染性病原。
7? 作出判定
以上5個方面的資料和結(jié)果只是為鑒別診斷提供了客觀的科學(xué)依據(jù),而最終的結(jié)論還是由禽病專家根據(jù)個人經(jīng)驗和國內(nèi)外學(xué)術(shù)界的普遍接受的學(xué)術(shù)觀點作出判斷。這里特別要強調(diào)的一點是:對雞的腫瘤病,我們面對的是一個群體,而且是一個動態(tài)的群體。由于在雞群中可能存在著MDV、REV和ALV不同病毒組合的二重感染甚至三重感染,在同一群體個體與個體間是不盡相同的。我們不能僅憑一、兩只病雞的樣品的觀察或檢測結(jié)果就對全群作出結(jié)論性的判斷。對一群雞在一個發(fā)病時期內(nèi)至少要全面檢測6~10只雞的相關(guān)樣品,必須根據(jù)檢出的比例關(guān)系作出判斷。
8? 防治措施
在雞常見的這3種病毒性腫瘤病中,MDV主要是由孵化廳或雞場的早期橫向感染引起,而REV和ALV則主要是由種雞的垂直傳播及早期橫向感染引起(特別是在出殼后1~2 d運輸過程中發(fā)生,也可能由接種了污染有REV或ALV的弱毒疫苗特別是馬立克氏病疫苗或禽痘疫苗引起)。
目前市場上提供的液氮保存的CV1988/ Rispens株細(xì)胞結(jié)合苗對我國雞場中現(xiàn)行的MD流行毒株的保護性免疫效果應(yīng)該是很好的。如果仍然出現(xiàn)MDV引發(fā)的腫瘤問題,則有以下3種可能性:①疫苗中有外源性病毒特別是REV污染;②雛雞中有免疫抑制性病毒(如REV、ALV或傳染性貧血病毒)早期感染。這兩種可能都會抑制疫苗的效果;③疫苗的保管使用中存在問題。顯然,在對這3種病毒性腫瘤的預(yù)防控制實際上是相互關(guān)聯(lián)的。
對REV和ALV感染目前還沒有疫苗預(yù)防,主要靠凈化種源來減少感染,但這一點恰恰是我國養(yǎng)雞業(yè)最忽視的一個方面。目前,我國自繁自養(yǎng)的種雞群(包括各種地方品系的肉用型雞,也包括一部分多年前引進、現(xiàn)自繁自養(yǎng)的蛋用型雞)中,幾乎都存在著不同程度的REV和不同亞型ALV的感染。雖然多數(shù)種雞場發(fā)生垂直感染的比例很低,但病毒垂直感染的發(fā)生是不均勻的。有些種群的特定批次,可能會出現(xiàn)很高的垂直感染率。少量的垂直感染在運輸用的包裝箱中可引起很高的橫向感染率。近幾十年中、國際大型種雞公司,一直長期堅持對種雞群的外源性ALV的檢測和凈化工作。因此,直接進口的種雞,不論蛋用型和肉用型雞,其外源性ALV感染率是很低的。我國自繁自養(yǎng)的種雞群也必須盡快實施對ALV的檢測和凈化,對REV的垂直感染,現(xiàn)在沒有達到種群凈化的水平最重要的是控制弱毒疫苗的污染。