趙芳娟,王 琦,尚書鳳,王楊科
(陜西理工大學(xué) 生物科學(xué)與工程學(xué)院, 陜西 漢中 723000)
如今隨著生活的精細(xì)化,以及污染物的多元化,人們已經(jīng)不像過去幾十年,只關(guān)注在環(huán)境中長時(shí)間大量存在并有急性毒性或者致癌作用的污染物,具有潛在風(fēng)險(xiǎn)的環(huán)境污染物已經(jīng)引起了人們的關(guān)注。
二氯苯氧氯酚[1](triclosan,TCS),廣譜抗菌劑,可以殺滅和抑制多種細(xì)菌及病毒,同時(shí)也能保護(hù)有益細(xì)菌,廣泛應(yīng)用于香皂、洗衣液、消毒洗手液等個人護(hù)理品中。由于應(yīng)用范圍廣闊,其對于水體的污染也越來越多地受到重視。最初研究的主要是TCS在環(huán)境中的分布及殘留風(fēng)險(xiǎn)[2]。近年來在地表水、湖底沉積物、污水和污泥中檢測出TCS的報(bào)道越來越多,河魚體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了TCS的積累[3]。甚至是在人類女性的乳汁中也檢測出了TCS[4]。在對中國五大水系中TCS污染研究時(shí)發(fā)現(xiàn)水體中的質(zhì)量濃度為0.48 μg/L,底泥中的質(zhì)量濃度為2.7 μg/L[5]。水環(huán)境中TCS的含量逐年增加[6]。目前發(fā)現(xiàn)水環(huán)境中的TCS會對一些敏感的物種產(chǎn)生危害,主要研究方向集中在魚類,發(fā)現(xiàn)TCS對于某些魚類的生殖和發(fā)育有很強(qiáng)的毒性。同時(shí)對兩棲類也有相關(guān)研究,比如董玉瑛等[7]研究發(fā)現(xiàn),二氯苯氧氯酚使蝌蚪體內(nèi)的過氧化氫酶活性顯著升高,馬玥等[8]研究認(rèn)為TCS可通過食品包裝、日化用品等,危害人體的健康。
十二烷基苯磺酸鈉[9](sodium dodecyl benzene sulfonate,SDBS),是一種陰離子表面活性劑,由于其去污性好,價(jià)格低廉,廣泛應(yīng)用于一些洗滌用品中。SDBS排放在水中難以降解,影響水的氧氣交換,使水體富氧化速率提升,產(chǎn)生生物毒性。SDBS的產(chǎn)量逐年增加,在環(huán)境中分布廣泛[10]。地表水中SDBS的含量達(dá)到50 μg/L,河床沉積物中也達(dá)到1 mg/kg[11]。有研究發(fā)現(xiàn)[12],過量的SDBS會造成人體皮膚過敏,還可產(chǎn)生腹瀉等現(xiàn)象。陳清香等[13]發(fā)現(xiàn)SDBS能影響安氏偽鏢水藻的生殖。余坦健等[14]研究表明,SDBS使奧尼羅非魚的免疫功能得到明顯的抑制。葉遼遼等[15]發(fā)現(xiàn)當(dāng)SDBS≥2.5 mg/L時(shí),大鱗副泥鰍受精卵的培育周期及孵化周期延長,同時(shí)孵化率降低,鰍苗畸形率升高。
蝌蚪生活范圍廣闊,易于捕捉,因其特殊的軀體結(jié)構(gòu)、生理特點(diǎn)和生活史特征,對農(nóng)藥等環(huán)境污染物的影響極為敏感,是良好的實(shí)驗(yàn)材料。因此在生態(tài)毒理學(xué)研究中,兩棲動物常被用作模式生物,相關(guān)的研究正成為生態(tài)毒理學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)[16]。
雖然對于TCS和SDBS的研究較多,但是在環(huán)境中,污染物從來都不是單一存在的,目前對于TCS和SDBS的聯(lián)合實(shí)驗(yàn)還沒有相關(guān)報(bào)道。探討TCS聯(lián)合SDBS對蝌蚪生長發(fā)育的影響,可以為洗滌用品和個人護(hù)理品的使用提出相關(guān)參考,為治理水體污染及環(huán)境保護(hù)提供建議,為研制新型洗滌用品和個人護(hù)理用品提供依據(jù)。
蝌蚪捕撈于陜西理工大學(xué)校園內(nèi)的天漢湖,經(jīng)顯微鏡鑒定為中華蟾蜍(Bufogargarizans),發(fā)育時(shí)期大體為30期。把蝌蚪分為兩批,一批蝌蚪用曝氣自來水馴養(yǎng)一周,喂食雞蛋黃和青菜汁,馴養(yǎng)期間每隔兩天進(jìn)行喂食換水及清理蝌蚪排泄物,用于急性毒性實(shí)驗(yàn)[17]。另一批蝌蚪用湖里的水進(jìn)行飼養(yǎng),用于后期實(shí)驗(yàn)。
顯微鏡(重慶中顯光電儀器有限公司),電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司),雙筒解剖鏡(泰克儀器有限公司),SDBS(天津市百世化工有限公司),TCS(山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司),二甲基亞砜(天津市大茂化學(xué)試劑廠),香柏油(人造,中國上海懿洋儀器有限公司),Giemsa染液。
以曝氣自來水為溶劑配出具有一定濃度梯度的TCS和SDBS溶液,在裝有1000 mL溶液的1 L燒杯中放入大小均勻的8只蝌蚪。每隔兩天換掉50%的溶液,保證溶液濃度不變,預(yù)實(shí)驗(yàn)找出TCS和SDBS對處于30期蝌蚪100%致死極限濃度和零致死極限濃度。100%致死極限濃度分別為0.8 mg/L和700 mg/L以及零致死極限濃度分別為0.25 mg/L和350 mg/L。急性毒性實(shí)驗(yàn)按照預(yù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)置濃度組6組,3個平行組。TCS濃度分別為0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55 mg/L,SDBS濃度分別為400、450、500、550、600、650 mg/L。實(shí)驗(yàn)期間不喂食,實(shí)驗(yàn)開始連續(xù)觀察8 h,然后每12 h觀察一次,統(tǒng)計(jì)蝌蚪死亡數(shù),使用SPSS計(jì)算24、48、72、96 h的半致死濃度。對于評價(jià)安全濃度目前主要有以下兩種方法:安全濃度(Sc)和最大容許濃度(MPC),評價(jià)公式分別為[18]
Sc=0.1×96 hLC50,
MPC=0.01×96 hLC50。
實(shí)驗(yàn)前挑選發(fā)育時(shí)期均在36期的蝌蚪,測量每一組的體長、體重。采用半靜態(tài)養(yǎng)殖法,依據(jù)蝌蚪急性毒性實(shí)驗(yàn)的半致死濃度各設(shè)置4個實(shí)驗(yàn)組和3個平行組。依據(jù)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果,TCS的濃度間距設(shè)置為:0(對照組)、0.06、0.18、0.54 mg/L,SDBS的濃度間距設(shè)置為:0(對照組)、60、180、540 mg/L。根據(jù)單一毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行TCS與SDBS的聯(lián)合毒性實(shí)驗(yàn),其濃度間距設(shè)置為:0(對照組)、0.06 mg/L+60 mg/L、0.18 mg/L+180 mg/L、0.54 mg/L+540 mg/L。為短時(shí)間內(nèi)研究兩種藥物對蝌蚪生長發(fā)育的影響,排除其他污染物對實(shí)驗(yàn)造成的干擾,實(shí)驗(yàn)期間不喂食,實(shí)驗(yàn)時(shí)間為15 d,每兩天換掉50%的溶液,保證溶液濃度不變,及時(shí)處理掉蝌蚪排泄物,觀察方法同急性毒性實(shí)驗(yàn)。
發(fā)育時(shí)期觀察:將蝌蚪置于培養(yǎng)皿中,在雙筒解剖鏡下用玻璃分針撥動蝌蚪,依據(jù)趙爾宓[19]對蝌蚪發(fā)育分期的鑒定方法結(jié)合蝌蚪的特征,對蝌蚪的發(fā)育時(shí)期進(jìn)行鑒定并記錄。
體長測量:將鑒定完發(fā)育時(shí)期的蝌蚪放在濾紙上,用玻璃分針將其身體舒展成一條直線,用分度值為0.5 mm的直尺進(jìn)行測量并記錄。
體重稱量:測量完體長的蝌蚪,小心的用玻璃分針撥動在濾紙上濾干水分,將蝌蚪放在已經(jīng)調(diào)好的電子天平上,待讀數(shù)穩(wěn)定后進(jìn)行讀數(shù)并記錄。
將稱量完體重的蝌蚪放培養(yǎng)皿中,使其腹部朝上放在雙筒解剖鏡下,小心剖開胸部,找到心臟取血,將血滴加到標(biāo)有對應(yīng)濃度標(biāo)簽的載玻片上,以30°角用另一干凈的載玻片推動使血液在載玻片上分布均勻,制成血涂片。用吹風(fēng)機(jī)吹干血涂片,在血膜處滴加適量的甲醇溶液固定15 min,吹干。后用Giemsa染液(pH 6.8)染色15 min,水沖洗,吹干。每只蝌蚪做一張血涂片。在本實(shí)驗(yàn)中核異常是指蝌蚪紅細(xì)胞的異常核數(shù)和微核數(shù),核異常率=核異常數(shù)/觀察的總細(xì)胞數(shù)×100%。
單一毒性和聯(lián)合毒性完成之后,依據(jù)核異常率用SPSS軟件進(jìn)行回歸分析計(jì)算得到LC50[20]。根據(jù)修瑞琴[21]水生毒理聯(lián)合效應(yīng)相加指數(shù)法計(jì)算出AI值。當(dāng)AI>0為協(xié)同作用,AI=0為相加作用,AI<0為拮抗作用。
采用SPSS 20.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,半致死濃度(LC50)及其95%置信區(qū)間的計(jì)算采用概率單位法用Regression進(jìn)行計(jì)算分析[22],核異常采用One-Way ANOVA進(jìn)行方差分析。
通過觀察發(fā)現(xiàn),正常的蝌蚪游動快速,反應(yīng)靈活,在燒杯的上中下三部分不停游動,而在染毒液中游動緩慢,反應(yīng)遲鈍,游動至燒杯中部后自然沉在燒杯底部,一段時(shí)間后在杯底不動呈現(xiàn)假死,用玻璃分針輕輕撥動蝌蚪有反應(yīng)。當(dāng)蝌蚪尾巴彎曲,用玻璃分針輕輕撥動無反應(yīng),體表有白色粘液狀物體時(shí),則判斷為死亡。蝌蚪在TCS和SDBS中剛死亡的狀態(tài)存在不同之處,TCS溶液中的蝌蚪死亡后尾巴基部彎曲,SDBS溶液中的蝌蚪死亡后尾巴端部彎曲。實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)隨著污染物濃度的增加蝌蚪所排出來的糞便量也在增加,通過增設(shè)濃度為700 mg/L的SDBS兩個組,每組15尾蝌蚪,放入蝌蚪后一組立即喂食,一組不喂食,12 h后發(fā)現(xiàn),不喂食的一組全部死亡,喂食的一組死了1尾。所以可以初步判斷蝌蚪通過增加排便來排毒。
隨著污染物濃度的增高,蝌蚪的累計(jì)死亡數(shù)目也隨之增加,并且SDBS對蝌蚪的毒性比TCS低的多。同時(shí)采用概率單位法用SPSS 20.0軟件計(jì)算半致死濃度(LC50)及其95%置信區(qū)間,及Sc和MPC結(jié)果如表1所示。
表1 TCS與SDBS對蝌蚪的毒性效應(yīng)及半致死濃度
2.2.1 TCS和SDBS對蝌蚪體重的影響
圖1(a)—(c)統(tǒng)計(jì)了不同濃度TCS、SDBS、TCS聯(lián)合SDBS在室溫條件下處理15 d后與處理前蝌蚪的體重。經(jīng)過15 d培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組體重較實(shí)驗(yàn)前都有明顯減輕,聯(lián)合組體重減少值大于單一組體重減少值。同一染毒組中對照組的蝌蚪體重減小值與低濃度的蝌蚪體重減小值接近,減小值在0.15 g左右,低于中濃度的體重減少值,中濃度的體重減少值最高,高濃度下體重減少值最少。說明蝌蚪體重的減少值隨著濃度的增加先升高再降低。
2.2.2 TCS和SDBS對蝌蚪體長的影響
蝌蚪體長的減小情況與體重相似,如圖1(d)—(f)所示,最高濃度下的體長減少值最少。低濃度的蝌蚪體長減小值與對照組很相近。聯(lián)合濃度組低濃度蝌蚪的體長減小值為0.31 cm高于單一低濃度組TCS的減小值0.29 cm和SDBS的減小值0.3 cm。聯(lián)合組中濃度蝌蚪的體長減小值0.38 cm高于單一中濃度組TCS的減小值0.36 cm和SDBS的減小值0.28 cm。聯(lián)合組高濃度的體長減少值0.29 cm低于單一高濃度組TCS的減小值0.28 cm和SDBS的減小值0.2 cm。以上結(jié)果說明聯(lián)合組的體重減少值大于單一組體重減少值,且隨著濃度的增加蝌蚪體重的減少值先增高再降低。
圖1 污染物對蝌蚪體重體長的影響
2.2.3 TCS和SDBS對蝌蚪發(fā)育時(shí)期的影響
挑選處于36期的蝌蚪進(jìn)行實(shí)驗(yàn),經(jīng)過15 d培養(yǎng)后觀察發(fā)現(xiàn),對照組中的蝌蚪處于42—43期,43期較多。TCS濃度組中0.06 mg/L的蝌蚪基本處于42期,0.18 mg/L處于41—42期,41期較多,0.54 mg/L基本處于40期。SDBS濃度組中的60 mg/L基本處于42期,180 mg/L基本處于41期,540 mg/L基本處于40期。TCS聯(lián)合SDBS濃度組中的0.06 mg/L+60 mg/L基本處于42期,0.18 mg/L+180 mg/L基本處于40—41期,0.54 mg/L+540 mg/L處于38—39期,39期較多。通過對比分析,低濃度下TCS與SDBS的蝌蚪發(fā)育時(shí)期基本一致,聯(lián)合組中的蝌蚪明顯較TCS與SDBS的蝌蚪發(fā)育緩慢,隨著污染物濃度的升高對蝌蚪發(fā)育的抑制作用也逐漸加強(qiáng)。
2.3.1 微核和異常核的主要類型
用油鏡觀察發(fā)現(xiàn),在染毒處理以后,蝌蚪的紅細(xì)胞出現(xiàn)了各種類型的異常核以及微核。正常的成熟紅細(xì)胞核為橢圓形,位于細(xì)胞中央。幼紅細(xì)胞核為圓形位于細(xì)胞中央,經(jīng)甲醇固定Giemsa染液染色后細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)顏色很淺。微核一般游離在主核周圍,體積比主核小很多,顏色比主核淺。異常核主要有雙核、核空泡、核縊縮等多種類型(見圖2)。
圖2 正常紅細(xì)胞和各類異常核細(xì)胞
2.3.2 TCS和SDBS對蝌蚪紅細(xì)胞核異常率的影響
蝌蚪在不同污染物染毒15 d后,隨著污染物濃度的增加,蝌蚪核異常率逐漸提高,并且聯(lián)合組的核異常率高于單一污染物的核異常率。不同染毒組的蝌蚪紅細(xì)胞核異常率見表2。經(jīng)單因素多重比較,與對照組相比,TCS染毒組0.18、0.54 mg/L對蝌蚪核異常率有極顯著影響(P<0.01),0.06 mg/L組存在顯著差異(P<0.05)。0.06 mg/L與0.18 mg/L組存在顯著差異(P<0.05),其余不同濃度對蝌蚪核異常率兩兩之間存在極顯著影響(P<0.01)。
SDBS組中,對照組與180 mg/L組相比存在顯著差異(P<0.05),與540 mg/L組相比存在極顯著影響(P<0.01)。除了對照與60 mg/L、60 mg/L與180 mg/L組,其余不同濃度對蝌蚪核異常率兩兩之間多數(shù)存在極顯著影響(P<0.01),有些存在顯著差異(P<0.05)。
不同濃度的TCS聯(lián)合SDBS對蝌蚪紅細(xì)胞核異常率兩兩之間除了對照組和0.06 mg/L+60 mg/L、0.06 mg/L+60 mg/L和0.18 mg/L+180 mg/L外,都存在極顯著差異(P<0.01)或顯著差異(P<0.05)。
表2 污染物對蝌蚪紅細(xì)胞核異常率
由TCS和SDBS的急性毒性實(shí)驗(yàn)可見,高效廣譜抗菌劑TCS和陰離子表面活性劑SDBS都對蝌蚪有著明顯的毒性作用。TCS對蝌蚪96 h的LC50為0.445 mg/L,SDBS的96 hLC50為543 mg/L, TCS對蝌蚪的毒性比SDBS強(qiáng)1000多倍。造成這種毒性差異可能有多種因素。如Boehmer等[23]發(fā)現(xiàn)TCS的親水性低,親脂性強(qiáng),容易融解于細(xì)胞的脂肪、脂質(zhì)中,并且TCS在環(huán)境之中較難降解,因此易于在生物體內(nèi)富集。宋書娟等[24]研究表明TCS會干擾兩棲動物的甲狀腺功能,進(jìn)而影響其發(fā)育變態(tài)。Kristian等[25]認(rèn)為,SDBS可以使動物細(xì)胞膜的通透性增加,從而引起動物死亡。程呂柏等[26]認(rèn)為SDBS 可以導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,從而使細(xì)胞膜的通透性改變。所以綜合來說TCS對動物的毒性是由于TCS的親脂性和不易降解性導(dǎo)致很容易被吸收和積累,干擾蝌蚪內(nèi)分泌和新陳代謝從而引起動物死亡。SDBS對動物的毒性主要是SDBS使動物蛋白質(zhì)降解,細(xì)胞膜通透性增加引起死亡。正因?yàn)門CS和SDBS不同的毒性作用造成它們對蝌蚪的毒性差異。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù),我們得到SDBS最大容許濃度為5.44 mg/L,安全濃度為54.40 mg/L。TCS最大容許濃度為0.004 5 mg/L,安全濃度為0.045 mg/L。以期為我國農(nóng)業(yè)灌溉用水等基本控制指標(biāo)的篩選及定值提供依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)中污染物對蝌蚪的生長表現(xiàn)出一定的抑制作用,蝌蚪的體重體長和實(shí)驗(yàn)前相比都在減少。并且隨著污染物濃度的增加,蝌蚪的體重體長減少值先增加后減少,對照組的蝌蚪體重體長減少值與低濃度下的蝌蚪體重體長減少值很接近,高濃度下的體重體長減少值最小。
同時(shí)發(fā)現(xiàn)蝌蚪在染毒15 d后,對照組中的蝌蚪基本處于42—43期,43期較多,而0.54 mg/L的TCS與540 mg/L的SDBS基本處于40期,0.54 mg/L+540 mg/L的TCS聯(lián)合SDBS處于38—39期,39期較多。這說明TCS和SDBS都對蝌蚪的發(fā)育有著明顯的抑制作用,并且聯(lián)合毒性作用大于單一毒性作用。
眾所周知,蝌蚪的生長發(fā)育要經(jīng)歷變態(tài),在蝌蚪變態(tài)過程中,26—40期處于發(fā)育期,主要表現(xiàn)為蝌蚪的生長,體重增加,體長延長;40—46處于變態(tài)發(fā)育期,其中的42—46處于變態(tài)期,變態(tài)期的蝌蚪即處于42期的蝌蚪開始前肢伸出,尾巴變短,體重減輕,所以發(fā)育處于42期以上的蝌蚪,其體重和體長卻小于處于39期以及至41期的蝌蚪。
圖3 蝌蚪39期和43期的對比
蝌蚪體重體長減少值隨著污染物濃度的增加逐漸增大,但實(shí)驗(yàn)中蝌蚪的體重和體長減少值先增加后減少。這是因?yàn)槭前l(fā)育時(shí)期的影響,隨著污染物濃度的增加,蝌蚪的發(fā)育時(shí)期大致處于43至40—39期,而處于40—39期的蝌蚪體重與體長明顯大于43期的蝌蚪。這也就是為什么隨著污染物濃度的增加,蝌蚪的體重和體長減少值先增加后減少。如圖3所示,39期的蝌蚪體重體長明顯大于發(fā)育較快處于43期的蝌蚪。
細(xì)胞受外界影響后形成微核和異常核,可以根據(jù)動物紅細(xì)胞核異常的數(shù)量多少來判斷生物的受損程度。通常認(rèn)為,核異常包括異常核以及微核,微核由有絲分裂的細(xì)胞在細(xì)胞分裂后期細(xì)胞內(nèi)的部分染色體斷裂所形成,其裂片或整條染色體沒有隨著紡綞絲進(jìn)入子細(xì)胞的細(xì)胞核中,而是停留在細(xì)胞質(zhì)中,形成單獨(dú)的一微小核,此小核的體積遠(yuǎn)小于細(xì)胞核,稱為微核。微核可進(jìn)一步分為,染色體斷裂劑打斷染色體產(chǎn)生的小微核,紡錘體毒劑打斷紡錘絲造成的一條或一組染色體滯后形成的大微核[27]。也有人認(rèn)為微核由核外突形成[28],在本次實(shí)驗(yàn)中也觀察到核外突、核不均等縊縮現(xiàn)象,所以推測這有可能是蝌蚪微核形成的過程。因此SDBS可能是染色體斷裂劑的一種,如形成小微核以及大微核。Giudice等[29]發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞凋亡過程中會激活降解核酸的酶,從而把核酸切成小碎片,而TCS也有這種性質(zhì)。
本次實(shí)驗(yàn)中觀察到聯(lián)合污染物組中的核異常種類多于單一污染物組。因此,TCS可能是使核酸結(jié)構(gòu)出現(xiàn)多種損傷,SDBS可能是使染色體斷裂。所以當(dāng)蝌蚪接觸到TCS、SDBS這種有毒物質(zhì)時(shí),蝌蚪的正常細(xì)胞分裂過程將受到影響從而產(chǎn)生異常核、微核。
根據(jù)相加指數(shù)法算出S值為1.81,代入公式計(jì)算出AI的值為0.81>0,所以聯(lián)合毒性作用為協(xié)同作用。
綜上所述,TCS和SDBS在高濃度下對蝌蚪有急性致死作用,在低濃度下對蝌蚪也具有潛在的危害,隨著濃度的增加直接影響蝌蚪的生長發(fā)育。在TCS聯(lián)合SDBS作用下,由于SDBS可以使動物細(xì)胞膜的通透性增加,這就會使得細(xì)胞對TCS的吸收量增加,對蝌蚪的毒性作用更加明顯,SDBS與TCS表現(xiàn)出協(xié)同作用。2006年,楊承信等[11]對LAS的安全評估工作中檢測到地表水中的含量低于50 μg/L,密西西比河測出的含量低于28 μg/L,河床沉積物中低于1 mg/kg,地表水和沉積物中的SDBS處于本實(shí)驗(yàn)所得出的安全容許溶度5.44 mg/L內(nèi)。2009年,趙建亮等[5]對中國五大水系中TCS污染進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)水體中的質(zhì)量濃度為0.48 μg/L,底泥中的質(zhì)量濃度為2.7 μg/L,均處于本實(shí)驗(yàn)所得出的安全容許溶度4.5 μg/L內(nèi)。隨著我國經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展,人民生活水平提高,TCS和SDBS使用量逐年增加[6,10],大量未經(jīng)處理的生活污水排入環(huán)境中,導(dǎo)致水體環(huán)境中TCS和SDBS的含量增加,并且TCS和SDBS對蝌蚪的毒性作用表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng)。因此應(yīng)加強(qiáng)TCS和SDBS對水產(chǎn)品及農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全方面影響研究,以及生產(chǎn)污水和生活污水的排放處理方面的風(fēng)險(xiǎn)管理,以便合理科學(xué)的使用TCS和SDBS。