崔 歡，張 誠，張春茂，李佳明，陳冠希，賴錳熙，李志翔，陳立功，郭康康，張 博，陰雅潔，武 華，董世山*，郭振東*

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫病病原生物學(xué)華北科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站，河北 保定 071001；2.軍事科學(xué)院 軍事醫(yī)學(xué)研究院 軍事獸醫(yī)研究所，吉林 長春 130122)

流感病毒屬于正黏病毒科、流感病毒屬。病毒粒子呈圓球形，主要由核衣殼和囊膜組成[1-2]。按照核蛋白(NP)和基質(zhì)蛋白(M)的不同，流感病毒可分為A(甲型)、B(乙型)、C(丙型)和D型(丁型)4種。其中以A型流感病毒危害最大，宿主廣泛，可感染多種禽類和哺乳動(dòng)物。A型流感病毒基因組由8條獨(dú)立的單股負(fù)鏈RNA組成，編碼17個(gè)已知病毒蛋白。其中根據(jù)病毒表面蛋白血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)血清型不同，又可將A型流感病毒劃分為多種不同亞型，HA有18個(gè)亞型，NA有11個(gè)亞型。除了最近發(fā)現(xiàn)的蝙蝠特有的H17N10和H18N11之外，其他所有的亞型均已在鳥類中發(fā)現(xiàn)[3-5]。禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染人的情況時(shí)有發(fā)生，2013年中國出現(xiàn)首例H7N9亞型AIV感染人的病例，對(duì)我國公共衛(wèi)生安全造成嚴(yán)重威脅。因此，有必要綜合了解該病毒的遺傳進(jìn)化規(guī)律及生物學(xué)特性，為H7N9病毒防控提供理論依據(jù)。

1 H7N9亞型AIV流行現(xiàn)狀

自2013年2月上海出現(xiàn)首例人感染H7N9亞型AIV病例以來，到目前為止，共發(fā)生5次流行，第2，3，4次分別始于2013，2014，2015年，都是從當(dāng)年10月開始持續(xù)到次年6月(圖1)。相比前4次，第5次流行始于2016年9月，開始較早，是迄今為止最大的一個(gè)流行季節(jié)[6]，盡管采取了嚴(yán)密的監(jiān)測和控制措施，人感染病例數(shù)量仍然迅速增加，死亡人數(shù)達(dá)到5次之最，并且呈現(xiàn)從華南和華東地區(qū)向外擴(kuò)張的趨勢[7-8]。據(jù)中國疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)計(jì)，截至2019年9月1日，H7N9亞型AIV作為一種嚴(yán)重人獸共患病，已造成1 626人感染，624例死亡，其中201名患者有禽類接觸史。

圖1 中國5次H7N9亞型禽流感疫情

繼2017年2月底廣東省首次報(bào)告人和家禽感染高致病性H7N9亞型AIV后[9-12]，迅速傳播到中國其他地區(qū)。2017年3月下旬，湖南省某家禽養(yǎng)殖場首個(gè)報(bào)告暴發(fā)高致病性H7N9亞型AIV。隨后，在河北、河南、天津和陜西等省市相繼暴發(fā)[10]。

鑒于H7N9亞型AIV的嚴(yán)峻態(tài)勢，2017年9月中國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部實(shí)施全國性家禽疫苗接種計(jì)劃，省級(jí)獸醫(yī)部門開展疫苗接種后抗體水平監(jiān)測，在11—12月疫苗接種后各省平均免疫率達(dá)到80%。據(jù)中國動(dòng)物疾病控制中心報(bào)告，在過去幾年中每年12月都曾發(fā)生5～106例人感染H7N9禽流感病例，而2017年12月官方監(jiān)測未發(fā)現(xiàn)人感染H7N9禽流感病例，這表明H7N9疫苗的使用大幅降低了人類感染數(shù)量及患病風(fēng)險(xiǎn)[13]。

2 H7N9亞型AIV基因重組及遺傳進(jìn)化

甲型流感病毒RNA依賴的RNA聚合酶保真性差且缺乏校對(duì)活性，病毒在復(fù)制過程中容易產(chǎn)生基因位點(diǎn)突變。此外，由于流感病毒屬于多片段的單股負(fù)鏈RNA病毒，當(dāng)多種流感病毒株感染同一宿主時(shí)，不同基因片段之間可以發(fā)生重組，形成全新的流感病毒[14-15]。

2013年人感染H7N9亞型AIV的遺傳進(jìn)化分析表明，其HA基因與H7N3病毒A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)的基因相似，其NA基因與另一種H7N9病毒A/wildbird/Korea/A14/2012(H7N9)的基因密切相關(guān)。所有內(nèi)部基因片段都與禽源H9N2病毒基因片段密切相關(guān)，特別是從1只燕雀中分離出的A/Brambling/Beijing/16/2012(H9N2)病毒。因此，2013年人感染H7N9亞型AIV可能是由野鳥與家禽間流感病毒重組形成的[16-18]。

第2和3次流行的H7N9病毒源于第1次的原始主基因型進(jìn)化而形成的不同譜系，在中國傳播范圍比第1次更廣[19-23]。第4次病毒是從第3次流行病毒進(jìn)化而來，主要來源于珠江三角洲地區(qū)。第5次病毒來源于第4次流行病毒，在珠江三角洲和長江三角洲地區(qū)均有分離[24]。

第5次H7N9在廣東地區(qū)暴發(fā)后，對(duì)幾個(gè)地區(qū)分離到的H7N9毒株分析發(fā)現(xiàn)，高致病性H7N9病毒的祖先起源于長江三角洲地區(qū)，向南傳播到珠江三角洲地區(qū)，可能是通過活禽貿(mào)易的方式。在進(jìn)入珠江三角洲地區(qū)后，低致病性H7N9病毒的HA蛋白中HA1和HA2肽區(qū)的裂解位點(diǎn)插入了4個(gè)氨基酸殘基KRTA(lys-arg-thr-ala)，這些突變可增加病毒對(duì)禽類的致病力，使得低致病性H7N9病毒突變?yōu)楦咧虏⌒訦7N9病毒。隨后，高致病性H7N9病毒進(jìn)一步與低致病性H7N9或H9N2病毒進(jìn)行重組，并產(chǎn)生多種不同基因型[10]。

3 H7N9亞型AIV受體結(jié)合特性

低致病性與高致病性H7N9亞型AIV都會(huì)導(dǎo)致人產(chǎn)生嚴(yán)重疾病甚至死亡，感染高致病性病毒比低致病性病情發(fā)展更為迅速[8]。AIV是否會(huì)感染哺乳動(dòng)物，首要取決于其是否具有與哺乳動(dòng)物呼吸道上皮細(xì)胞表面的多糖受體特異性結(jié)合能力[19]。通過對(duì)病毒基因序列進(jìn)行比對(duì)尋找使人類感染并導(dǎo)致嚴(yán)重疾病的突變位點(diǎn)，并對(duì)其中幾個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，HA蛋白Q226L和G186V(H3編號(hào))的突變?cè)黾恿薍7N9病毒對(duì)人α-2,6唾液酸受體的親和力[25-28]。這些關(guān)鍵位點(diǎn)的變化可能改變了病毒受體結(jié)合位點(diǎn)的構(gòu)象，使病毒的受體親和性從禽α-2,3唾液酸受體變成人α-2,6唾液酸受體，受體親和性的不同對(duì)病毒的宿主范圍和致病性有著重要影響。有關(guān)研究表明高致病性H7N9病毒具有雙重受體結(jié)合特性，可以感染人類[8,29]。

4 H7N9亞型AIV的傳播

遺傳進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)，高致病性H7N9亞型AIV起源于長江三角洲地區(qū)，后來進(jìn)入珠江三角洲地區(qū)[30]。2016年5月，長江三角洲地區(qū)的低致病性H7N9流行株HA裂解位點(diǎn)發(fā)生突變，產(chǎn)生了高致病性H7N9病毒。該毒株繼續(xù)與珠江三角洲的另1株高致病性H7N9病毒和H9N2病毒發(fā)生重組，產(chǎn)生多個(gè)新的基因型病毒。這些基因型可隨著家禽貿(mào)易及野鳥遷徙進(jìn)一步傳播到更廣泛區(qū)域。H7亞型AIV通過太湖等棲息地從野禽將病毒傳給共享同片水域放養(yǎng)的家鴨，在該過程中病毒多次發(fā)生突變重組形成了多種不同基因型病毒，而后從家鴨傳給家雞并與雞群中原有的H9N2病毒發(fā)生重組，形成可以感染人類的H7N9，通過活禽市場等途徑傳播給人[31]。

有研究曾對(duì)上海、江蘇、安徽及湖州等8個(gè)地區(qū)的24個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化活禽市場進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)上海、浙江等地的雞肉等制品無法滿足當(dāng)?shù)厝说南M(fèi)需求，江蘇和安徽是其主要的補(bǔ)充來源地，研究結(jié)果還表明在H7N9流行早期，強(qiáng)制關(guān)閉活禽市場前，大部分活雞會(huì)被運(yùn)往批發(fā)及零售地區(qū)，以滿足消費(fèi)者對(duì)活雞的需求。屠宰活動(dòng)通常在街市進(jìn)行，部分活雞會(huì)在家中或飯店等地被屠宰[32]。這解釋了流感流行時(shí)地理位置上的重疊，也說明跨地區(qū)的活禽貿(mào)易對(duì)疫情擴(kuò)散有嚴(yán)重風(fēng)險(xiǎn)。在第5次禽流感暴發(fā)期間，湖南、河北、河南、天津、陜西、內(nèi)蒙古、黑龍江和安徽等省市的9例官方報(bào)告的家禽感染H7N9禽流感均由高致病性病毒株引起，表明該病毒株已經(jīng)在中國廣泛傳播。有研究表明H7N9亞型AIV可在雪貂中經(jīng)空氣傳播，但其在人與人之間的傳播能力仍然有限，而且在大多數(shù)病例中都有患者接觸受感染家禽的情況[33-35]。因此，在第2，3，4次H7N9禽流感流行中，正是由于H7N9亞型AIV相對(duì)不易在人之間傳播特性，為了控制該疫情，較為徹底的家禽撲殺和及時(shí)關(guān)閉受影響地區(qū)的活禽市場，才阻止疫情的繼續(xù)擴(kuò)大，每次感染人數(shù)相較之前都有所下降[9,36]。

5 H7N9亞型禽流感的防控

H7N9亞型AIV相較于其他流感病毒對(duì)人類和家禽具有更大的風(fēng)險(xiǎn)。因此，應(yīng)密切監(jiān)測病毒的流行狀況與演化態(tài)勢，做好H7N9禽流感疫情防控工作。

接種疫苗是一種行之有效的防控措施，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2017年9月啟動(dòng)了全國家禽疫苗接種計(jì)劃，使用的是H5和H7重組雙價(jià)滅活疫苗，隨后進(jìn)行疫苗接種后免疫試驗(yàn)，總體免疫接種率超過80%(目標(biāo)為70%)。并進(jìn)行持續(xù)的流行病學(xué)監(jiān)測，只有極少數(shù)樣本(2017年12月8萬多份樣本中有11份)的檢測結(jié)果為H7N9陽性，在2017年9月至2018年6月只有3例H7N9人感染病例，而2016年感染人數(shù)超過700例[37]。這表明實(shí)施大規(guī)模家禽疫苗接種政策，制定適宜的免疫和保健方案，同時(shí)定期監(jiān)測種群的免疫和防控情況，可有效降低H7N9禽流感在家禽及人類中流行風(fēng)險(xiǎn)。

疫苗雖然可以有效減少病毒在家禽與人類之間的流動(dòng)與傳播，但完全從家禽群體中消除病毒是不可能的，因此更應(yīng)該做好養(yǎng)殖場的生物安全防護(hù)工作，加大生物安全相關(guān)工作的力度，提高相關(guān)工作人員的生物安全意識(shí)，在早期發(fā)現(xiàn)病毒傳播時(shí)應(yīng)及時(shí)采取適當(dāng)措施防止疫情蔓延，如撲殺、剔除、徹底清潔消毒，臨時(shí)關(guān)停養(yǎng)殖場、防止疫區(qū)與非疫區(qū)之間車輛、受污染的器具及人員等流動(dòng)。

活禽市場和跨區(qū)域活禽貿(mào)易在H7N9流感病毒的傳播與擴(kuò)散中發(fā)揮著重要作用。鑒于此，應(yīng)當(dāng)制定嚴(yán)格有效的管理與控制措施，改變目前家禽養(yǎng)殖、銷售以及運(yùn)輸?shù)哪Ｊ?，限制活禽的跨地區(qū)貿(mào)易，尤其是肉用活禽的跨地區(qū)貿(mào)易，降低H7N9流感病毒的擴(kuò)散速度。關(guān)閉活禽市場，實(shí)施集中屠宰，銷售冷凍肉制品等，減少廣大民眾與活禽的接觸機(jī)會(huì)，降低人類感染H7N9的風(fēng)險(xiǎn)。無論運(yùn)輸還是銷售，嚴(yán)格做好不同禽鳥品種的隔離工作，減少H7N9亞型病毒的跨物種傳播以及與其他亞型病毒的重組，防止新的病毒亞型出現(xiàn)。

第5次疫情報(bào)道的病例數(shù)高于前幾次，這表明H7N9病毒仍在中國廣泛傳播。大部分人類H7N9感染病例與患病或死亡家禽的接觸有關(guān)[38]。因此，對(duì)中國城市和農(nóng)村地區(qū)的家禽、環(huán)境和人類持續(xù)監(jiān)測H7N9病毒是當(dāng)務(wù)之急。此外，H7N9病毒對(duì)哺乳動(dòng)物宿主的適應(yīng)性，與活禽市場中其他亞型甲型流感病毒的共傳播所產(chǎn)生的重組，應(yīng)該得到更深入的研究[39]?？傊?，H7N9亞型禽流感的預(yù)防和控制需要多方面的共同努力，需要多措共舉，多管齊下。疫苗免疫、生物安全以及生產(chǎn)與銷售管理都需要得到重視。

綜上所述，自2013年3月上海首次發(fā)現(xiàn)H7N9低致病性禽流感以來，幾乎每個(gè)省份都報(bào)告過該病毒。第5次疫情是迄今為止傳播最嚴(yán)重的一次，在這一次疫情中出現(xiàn)了高致病性毒株導(dǎo)致了人類高病例數(shù)和家禽高死亡率。為控制低致病性和高致病性H7N9病毒的傳播，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2017年9月初啟動(dòng)了針對(duì)中國大陸所有家禽的全國疫苗接種計(jì)劃。目前H7N9流行趨勢基本得到控制。但是新的H7N9病毒基因型還在出現(xiàn)，仍然需要給予重點(diǎn)關(guān)注。對(duì)活禽市場和養(yǎng)殖場加強(qiáng)監(jiān)測，堅(jiān)持執(zhí)行疫苗接種政策，進(jìn)行接種后的相關(guān)監(jiān)測，嚴(yán)格執(zhí)行生物安全相關(guān)的管理措施，提高防控能力，降低人類和家禽感染H7N9 AIV的風(fēng)險(xiǎn)，促進(jìn)公共衛(wèi)生安全。