葉林妹，陳友吾，沈建軍，胡傳久，杜國堅(jiān)，宋其巖

（1.浙江省青田縣林業(yè)局，浙江 青田 323900；2.浙江省林業(yè)科學(xué)研究院，浙江 杭州 310023）

春云實(shí)Caesalpinia vernalis屬豆科Leguminosae 云實(shí)屬Caesalpinia木質(zhì)藤本植物，四季常綠，其新葉展出時(shí)呈淺紅色，新葉的紅色和老葉的綠色交互襯映，顏色顯得格外鮮艷；同時(shí)圓錐花序頂生或腋生，花量大，花瓣黃色，中間花瓣略帶紅色斑紋，在園林中可用作綠籬、花架、邊坡綠化，是一種非常具有前途的觀賞植物[1]，同時(shí)，其花、果和根可作為中藥材，具有祛風(fēng)散寒、活血破於之功效[2-3]。春云實(shí)還是銹色粒肩天牛Aprionaswainsoni幼蟲，俗稱“斗米蟲”的珍貴藥用保健昆蟲的寄主植物之一，其開發(fā)利用前景十分廣闊[4-5]。春云實(shí)主要分布在廣東、福建南部和浙江南部[6]，目前尚未有人工開發(fā)和種植，資源十分有限。扦插繁殖技術(shù)是苗木無性快速繁育技術(shù)之一，不僅能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量苗木，同時(shí)還能保持植物本身的優(yōu)良特性[7]。國內(nèi)外對春云實(shí)的研究很少，僅在園林應(yīng)用方面有報(bào)道，對其扦插繁殖尚未見報(bào)道。本文以春云實(shí)為研究對象，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選出適宜的扦插繁殖方案，以期為開發(fā)利用提供更高效的扦插繁殖技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

扦插試驗(yàn)設(shè)在浙江省林業(yè)科學(xué)研究院育苗大棚內(nèi)，地理坐標(biāo)為30°13.14′ N，120°1.43′ E，屬典型亞熱帶季風(fēng)氣候，具有四季分明，降水豐沛的特點(diǎn)。年平均氣溫在13～ 20℃，極端最高氣溫為42.9℃，極端最低氣溫為－4℃，年平均降水量在1 100～ 1 600 mm。年日照時(shí)數(shù)為1 800～ 2 100 h，年無霜期為230～ 260 d。

1.2 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用春云實(shí)插穗取自金華森林之寶農(nóng)林科技有限公司的豆科云實(shí)屬植物品種保存園基地，選取3 年生植株剪取插穗，扦插時(shí)間分別為2018 年9 月下旬（當(dāng)年生半木質(zhì)化嫩枝）和2019 年3 月上旬（1 年生木質(zhì)化枝條）。采穗時(shí)，從植物的中上部剪取健壯枝條，采集當(dāng)天用濕潤布包裹帶回扦插。扦插所用基質(zhì)材料河沙為市售產(chǎn)品，紅壤為浙江省林業(yè)科學(xué)研究院育苗大棚就近采集的土壤，生根粉為普通市售生根粉（北京艾比蒂公司ABT1），用蒸餾水配制比成50 mg·kg-1，100 mg·kg-1，200 mg·kg-1三種濃度。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對基質(zhì)類型（A）、插穗長度（B）、生根粉濃度（C）進(jìn)行因素水平設(shè)計(jì)，見表1。采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)得出L9（34）試驗(yàn)設(shè)置，見表2。每處理小區(qū)90 根插穗，3 次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30 根插穗。

表1 因素水平Table 1 Factors and levels

表2 正交試驗(yàn)組設(shè)置Table 2 Design for orthogonal experiment

1.3.2 基質(zhì)消毒 扦插前一個(gè)月用0.3%的高錳酸鉀溶液噴灑事先整理好的河沙、紅壤及泥炭＋珍珠巖混合基質(zhì)插床，用薄膜覆蓋以備扦插用。

1.3.3 扦插方法 將插穗分別剪成5～ 10 cm，＞10～ 15 cm 和＞15 cm 三種長度規(guī)格，每個(gè)插穗至少保留一個(gè)側(cè)芽。扦插前先用相應(yīng)濃度ABT1 溶液浸泡插穗基部1 h，然后在不同插床進(jìn)行扦插試驗(yàn)，株行距為5 cm×10 cm。扦插時(shí)，先用比插穗稍粗的小鐵棍插一個(gè)孔，然后順孔插入插穗，扦插深度為插穗的2/3，壓實(shí)基質(zhì)。

1.3.4 插后管理及調(diào)查 扦插后采用全自動(dòng)噴霧系統(tǒng)自動(dòng)噴霧，扦插環(huán)境溫度控制在20～ 25℃，相對濕度控制在70%～ 85%，采用遮光率為80%～ 85%的遮陰網(wǎng)進(jìn)行遮陰。扦插30 d 后每隔7 d 觀察愈傷組織的形成情況，90 d 后進(jìn)行生根情況調(diào)查，調(diào)查各處理插穗的生根率。各處理隨機(jī)選取15 條扦插植株拔出清洗后測定不定根條數(shù)，用直尺測定不定根長度。生根率的計(jì)算公式為：

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，SPSS 軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果分析

圖1 春云實(shí)半木質(zhì)化嫩枝和木質(zhì)化枝條扦插Figure 1 Result of cuttings from semi-lignified softwood and lignified branchof C.vernalis

2.1 生根過程觀測

2018 年9 月下旬，采用當(dāng)年生半木質(zhì)化嫩枝扦插效果極差，所有插穗全部未能成活。雖然大部分插穗在扦插后40 d 左右，在枝條的下部切口產(chǎn)生了少量黃色愈傷組織，但無法形成不定根，最終全部發(fā)黑腐爛。

2019 年3 月上旬，采用1 年生木質(zhì)化枝條進(jìn)行扦插，50～ 60 d 時(shí)，插穗下半部產(chǎn)生黃色愈傷組織，隨后愈傷組織不斷增多變?yōu)榧t褐色，70～ 80 d 時(shí)，逐漸長出白色不定根，同時(shí)側(cè)芽開始萌發(fā)，隨后根系迅速生長，變成黑褐色，須根較少。

以上結(jié)果表明，春云實(shí)宜選用1 年生木質(zhì)化枝條扦插。

2.2 不同因素和水平對扦插生根率的影響

由表3、表4 可以看出，從基質(zhì)類型看，其對春云實(shí)插穗生根率的影響大小排序?yàn)锳1＞A3＞A2，以A1處理生根率最大，達(dá)71.85%。按插穗長度和生根粉濃度看，以B2處理和C2處理為因素B 和因素C 的最優(yōu)水平，其生根率分別達(dá)49.25%和49.62%。

由方差分析的顯著性P值大小可知，3 個(gè)因素中基質(zhì)類型的顯著性P值小于0.05，這說明基質(zhì)類型的不同水平間生根率差異顯著。就生根率而言，扦插繁殖技術(shù)的最優(yōu)水平組合為A1B2C2。

表3 3 種因素不同水平對生根率的影響Table 3 Effect of different factors at different levels on rooting rate of C.vernalis cuutings

表4 扦插生根率方差分析Table 4 ANOVA on rooting rate of cuttings

2.3 不同因素和水平對不定根數(shù)量的影響

由表5 可以看出，春云實(shí)用不同基質(zhì)扦插后不定根數(shù)量大小排序?yàn)锳1＞A3＞A2，其中，以A1處理的生根數(shù)量最多，達(dá)2.066 條。同理，在插穗長度上，B3＞B2＞B1，以B3處理的生根量最多，達(dá)2.011 條；在生根粉濃度上，C3＞C2＞C1，以C3處理的生根數(shù)量最多，達(dá)2.027 條。由表6 方差分析的顯著性P值大小可知，3 個(gè)因素對春云實(shí)扦插穗條的不定根數(shù)量影響差異均不顯著。針對春云實(shí)扦插后穗條產(chǎn)生不定根數(shù)量而言，以A1B3C3組合表現(xiàn)較好。

表5 3 種因素不同水平對不定根數(shù)量的影響Table 5 Effect of different factors at different levels on adventitious root number of cuttings

表6 不定根數(shù)量方差分析Table 6 ANOVA on adventitious root number

2.4 不同因素和水平對根系長度的影響

由表7 可以看出，春云實(shí)用不同基質(zhì)扦插后不定根長度的影響大小排序?yàn)锳1＞A3＞A2，以A1處理的不定根長度最長，達(dá)9.199 cm。從插穗長度看，其對插穗不定根的影響為B2＞B3＞B1，以B2處理的不定根長度最長，為7.507 cm；從生根粉濃度看，其對插穗不定根的影響為C1＞C3＞C2，以C1處理的不定根長度最長，為7.404 cm。

由表8 可知，基質(zhì)類型對不定根長度的影響達(dá)顯著水平（P＜0.05），插穗長度和生根粉濃度對不定根長度的影響不顯著（P＞0.05）。因此，針對春云實(shí)扦插后插穗不定根長度而言，A1B2C1組合表現(xiàn)較好。

表7 3 種因素不同水平對不定根長度的影響Table 7 Effect of different factors at different levels on adventitious root length of cuttings

表8 不定根長度方差分析Table 8 ANOVA on adventitious root length

2.5 優(yōu)化水平組合的確定

綜合3 個(gè)觀測指標(biāo)的分析結(jié)果，在A，B，C 這3 種因素中，A 因素對生根率、不定根數(shù)量和不定根長度的影響均達(dá)到顯著水平，B 因素和C 因素對3 個(gè)指標(biāo)的影響均未達(dá)到顯著水平。因此，3 個(gè)因素對春云實(shí)扦插生根效果的影響排序?yàn)锳＞C＞B。生根率是扦插條件篩選的主要指標(biāo)，綜合考慮確定A 因素中對生根率影響最大的為A1，B 因素中的B2水平為最優(yōu)，同時(shí)選取在生根率指標(biāo)中均表現(xiàn)最優(yōu)的C2組合，所以確定篩選出的最優(yōu)組合為A1B2C2。

3 結(jié)論與討論

春云實(shí)是具廣闊發(fā)展前景的資源植物和觀賞植物，目前尚沒有開展人工繁育的報(bào)道，野外自然更新主要靠根蘗和種子繁殖，自然更新慢，資源十分有限，如果要進(jìn)行大規(guī)模的人工馴化及開發(fā)應(yīng)用，采用扦插育苗技術(shù)是一個(gè)迅速而有效的途徑。春云實(shí)采用一年生木質(zhì)化健壯插穗在3 月中旬左右進(jìn)行扦插育苗能夠在短時(shí)間內(nèi)（約90 d）獲得大量苗木，對春云實(shí)資源的人工馴化和開發(fā)具有重要意義。本次試驗(yàn)結(jié)果表明，春云實(shí)扦插育苗宜選取10～ 15 cm 長度的一年生木質(zhì)化健壯插穗，在100 mg·kg-1的ABT1 生根粉濃度中浸泡1 h，然后在已消毒河沙中進(jìn)行扦插可以達(dá)到春云實(shí)扦插繁殖最佳生根效果，其生根率為71.85%。本研究顯示，扦插時(shí)間、基質(zhì)類型和外源激素處理對扦插是否成功非常重要，這種差異也存在于紅葉石楠Photinia fraseri和復(fù)葉槭Acer negundo的扦插試驗(yàn)中[8-9]。春云實(shí)與云實(shí)Caesalpiniadecapetala的扦插繁殖條件存在一定差異，春云實(shí)適合采用1 年生枝條扦插[10]，云實(shí)適宜采用嫩枝扦插，這種差異可能與春云實(shí)愈傷組織的形成能力等因素有關(guān)，關(guān)于春云實(shí)的扦插繁育尚有待進(jìn)一步研究。