程雅婷，鮮凌瑾，武秋申，揭曉蝶，田 旭，陳霈瑤，李開(kāi)秀，鐘 航，章 杰*

(1.西南大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，重慶 402460；2.樂(lè)山職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川 樂(lè)山 614000；3.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460)

飼糧纖維是指植物中固有的、完整的不易被動(dòng)物小腸消化酶所消化利用，但能被大腸微生物發(fā)酵利用的可食碳水化合物和木質(zhì)素的總稱(chēng)[1]。研究表明，在飼糧中適量添加纖維有利于動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育。GONZLEZ-ALVARADO等[2]研究顯示飼糧中添加燕麥殼和大豆殼可顯著提高肉仔雞日增體質(zhì)量、平均日采食量、料重比以及有機(jī)物、可溶性灰分和脂肪等的消化率。MARGüENDA等[3]研究指出,飼糧中添加37%中性洗滌纖維水平可提高兔日采食量和胴體產(chǎn)量，降低生長(zhǎng)期死亡率。RENAUDEAU等[4]報(bào)道在母豬哺乳期飼喂高纖維飼糧(20%中性洗滌纖維)可增加仔豬的生長(zhǎng)速度和體質(zhì)量。此外，研究還發(fā)現(xiàn)飼糧中添加不同來(lái)源的纖維對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育具有不同的影響。HE等[5]研究了飼糧中添加玉米秸稈、蒸汽爆破玉米秸稈、蒸汽爆破麥秸和蒸汽爆破稻草對(duì)灰鵝生長(zhǎng)發(fā)育的影響，結(jié)果顯示飼喂玉米秸稈的平均日采食量和飼料轉(zhuǎn)化率最高。JIMéNEZ-MORENO等[6]研究了纖維素、甜菜漿、燕麥殼飼糧對(duì)肉雞胃腸道發(fā)育和pH值的影響，結(jié)果指出甜菜漿和燕麥殼可降低胃腸道的pH值，提高脂肪、灰分和淀粉等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。反芻動(dòng)物對(duì)飼糧纖維的消化利用主要依靠瘤胃微生物，單胃動(dòng)物則主要依靠腸道后段內(nèi)的微生物，而胃腸道微生物是影響宿主營(yíng)養(yǎng)吸收、能量代謝、免疫平衡和生長(zhǎng)繁殖的重要因素之一[7]。因此，研究腸道微生物菌群構(gòu)成是了解飼糧纖維對(duì)宿主生長(zhǎng)發(fā)育影響的基礎(chǔ)。CHEN等[8]研究表明,飼糧中添加豌豆和麥麩可增加腸道有益微生物的濃度來(lái)抵抗細(xì)胞外病原體數(shù)量，進(jìn)而降低斷奶仔豬的發(fā)病率。AMERAH等[9]研究指出,不同纖維源會(huì)影響回腸微生物菌群特征，從而改變營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。鵝是草食性家禽，具有耐粗飼的特點(diǎn)，可大量利用草和秸稈，對(duì)粗纖維的消化率可達(dá)40%～50%，是研究動(dòng)物飼糧纖維理論基礎(chǔ)的理想模型[10]。目前，鵝因耗精料少而在中國(guó)被大范圍養(yǎng)殖，飼養(yǎng)量占全球總量的90%以上[11]，但不同來(lái)源的纖維飼糧對(duì)鵝腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響鮮見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)以四川白鵝為研究對(duì)象，探討了不同纖維源(苜蓿、黑麥、燕麥和花生秧)飼糧對(duì)其腸道微生物菌群的影響，為更好地了解四川白鵝對(duì)粗纖維的消化利用情況提供科學(xué)數(shù)據(jù)，同時(shí)也為生產(chǎn)實(shí)際中利用牧草纖維及制定飼糧配方提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物選取體況健康、體質(zhì)量相近的1日齡四川白鵝120只，隨機(jī)分為4組，分別為苜蓿組、黑麥組、燕麥組和花生秧組，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只鵝。試驗(yàn)在西南大學(xué)畜牧實(shí)訓(xùn)基地進(jìn)行，采用半開(kāi)放式鵝舍，地面圈養(yǎng)，自由采食與飲水，每日飼喂4次(7：30，12：30，17：00，21：00)。試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間為70 d，試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。試驗(yàn)期環(huán)境溫度為(28.77±0.11)℃，濕度為(86.78±0.42)%。

1.2 生長(zhǎng)性能測(cè)定70日齡時(shí)進(jìn)行空腹稱(chēng)體質(zhì)量(稱(chēng)體質(zhì)量前禁食6 h)，記錄并計(jì)算平均日增體質(zhì)量(ADG:average daily gain)、平均日采食量(ADFI:average daily feed intake)和料重比(F/G)。

1.3 腸道微生物采集70日齡時(shí)，每組隨機(jī)選取3只鵝進(jìn)行屠宰，迅速取出盲腸并結(jié)扎，經(jīng)75%酒精擦拭消毒外表后轉(zhuǎn)移至無(wú)菌超凈臺(tái)。將盲腸剪開(kāi)后用無(wú)菌生理鹽水沖洗腸道內(nèi)壁，沖洗干凈后，用滅菌手術(shù)刀片輕輕刮取腸道黏膜并收集于凍存管中，于-80℃ 保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ)) %

1.4 16S rRNA PCR擴(kuò)增及測(cè)序利用QIAamp DNA Stool Mini Kit(Qiagen，德國(guó))提取微生物總DNA，然后選用引物338F(5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′)和806R(5′-GGACTACH VGGGTWTCT AAT-3′)對(duì)16S rRNA(V3-V4)區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其中引物338F的5′尾端帶有條形碼標(biāo)記。PCR反應(yīng)參數(shù)：95℃預(yù)變性5 min；95℃變性30 s,56℃退火30 s,72℃延伸90 s，22個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸8 min。將PCR產(chǎn)物用QuantiFluorTM-ST藍(lán)色熒光定量系統(tǒng)進(jìn)行定量檢測(cè)，之后按照每個(gè)樣本的測(cè)序量要求進(jìn)行相應(yīng)比例的混合來(lái)構(gòu)建Miseq文庫(kù)并進(jìn)行Miseq測(cè)序。

1.5 測(cè)序序列處理測(cè)序得到雙端序列數(shù)據(jù)，根據(jù)PE reads之間的overlap關(guān)系，將成對(duì)的reads 拼接(merge)成1條序列，允許的最大錯(cuò)配比率為0.2，最小overlap長(zhǎng)度為10 bp，篩選掉不合格序列。根據(jù)序列首尾兩端的barcode和引物區(qū)分有效序列，并調(diào)整序列方向，barcode允許的錯(cuò)配數(shù)為0，最大引物錯(cuò)配數(shù)為2。同時(shí)對(duì)reads的質(zhì)量和merge的效果進(jìn)行質(zhì)控，過(guò)濾reads尾部質(zhì)量值20以下的堿基，設(shè)置50 bp的窗口，如果窗口內(nèi)的平均質(zhì)量值低于 20，從窗口開(kāi)始截去后端堿基,并且過(guò)濾質(zhì)控后50 bp以下的reads，去除含N堿基的reads。

1.6 生物信息學(xué)分析在97%相似度下通過(guò)Usearch(version7.1)軟件將序列進(jìn)行聚類(lèi)，得到分類(lèi)操作單元(OTUs)。通過(guò)RDP Classifer將OTUs代表序列與數(shù)據(jù)庫(kù)Silva進(jìn)行比對(duì)，置信度閾值為0.6[12]，進(jìn)而分析物種多樣性指數(shù)及群落結(jié)構(gòu)。同時(shí)利用序列數(shù)量與其所代表的OTU數(shù)目來(lái)構(gòu)建稀釋曲線，以及利用序列數(shù)量在不同測(cè)序深度時(shí)的微生物多樣性指數(shù)來(lái)構(gòu)建Shannon-winner曲線。

1.7 多樣性分析根據(jù)樣本OTU數(shù)據(jù)來(lái)估計(jì)菌群的α多樣性和β多樣性。α多樣性以物種豐富度指數(shù)(Chao和Ace)和多樣性指數(shù)(Shannon和Simpson)表現(xiàn)。利用β多樣性距離矩陣，使用非加權(quán)組平均算法構(gòu)建樹(shù)狀結(jié)構(gòu)，然后使用主成分分析(PCA)和主坐標(biāo)分析(PCoA)進(jìn)行可視化展示。

1.8 數(shù)據(jù)處理采用SAS 8.2軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用F檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析，P<0.05表示差異顯著，P>0.05表示差異不顯著，并用Met-astats方法對(duì)各處理組間物種差異性進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 生長(zhǎng)性能分析由表2可知，不同纖維源飼糧組鵝初始體質(zhì)量(1日齡)差異不顯著(P>0.05)，符合隨機(jī)取樣的原則，排除個(gè)體差異對(duì)結(jié)果的影響，表明本研究結(jié)果具有代表性。結(jié)束體質(zhì)量(70日齡)和平均日增體質(zhì)量在不同纖維源飼糧組之間差異顯著(P<0.05)，其中苜蓿組顯著高于黑麥組(P<0.05)，與燕麥組和花生秧組無(wú)顯著性差異(P>0.05)，而黑麥組、燕麥組和花生秧組之間差異均不顯著(P>0.05)；并且兩者變化趨勢(shì)一致，均為苜蓿組>花生秧組>燕麥組>黑麥組。不同纖維源飼糧組平均日采食量和料重比差異不顯著(P>0.05)，變化趨勢(shì)均為燕麥組>黑麥組>花生秧組>苜蓿組。上述結(jié)果表明，鵝對(duì)不同纖維源飼糧在消化利用率上存在差異，暗示對(duì)腸道具有調(diào)控作用的微生物菌群的差異。

表2 不同纖維源飼糧組鵝生產(chǎn)性能比較

2.2 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估由表3可知，本次12個(gè)測(cè)序序列文庫(kù)覆蓋率均達(dá)到了99.7%以上，共得到803 498條有效序列，335.7 Mp堿基，平均序列長(zhǎng)度為438.14 bp，比對(duì)得到877個(gè)OTUs(苜蓿組：583；黑麥組：478；燕麥組：470；花生秧組：443)。此外，稀釋曲線及Shannon-winner曲線均隨著測(cè)序數(shù)據(jù)量的增加趨于平坦(圖1)，說(shuō)明測(cè)序數(shù)據(jù)量足夠大，數(shù)據(jù)具有代表性和真實(shí)性，可以反映樣本中微生物菌群信息。

表3 測(cè)序數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

圖1 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估 A.稀釋曲線；B.Shannon-winner曲線

2.3 腸道微生物菌群α多樣性分析如表4所示，Chao、Ace、Shannon和Simpson在不同纖維源飼糧組之間差異均不顯著(P>0.05)，其中Chao和Ace指數(shù)為苜蓿組>花生秧組>黑麥組>燕麥組，說(shuō)明苜蓿組微生物菌群豐富度較高，而燕麥組微生物菌群豐富度最低。Simpson和Shannon指數(shù)在不同纖維源飼糧組之間變化趨勢(shì)不一致，但研究表明多樣性指數(shù)區(qū)分度越大，其有效性越高[13]。本試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示Shannon指數(shù)區(qū)分度高于Simpson指數(shù)，故本研究采用Shannon指數(shù)評(píng)估微生物菌群多樣性。不同纖維源飼糧組之間Shannon指數(shù)為花生秧組>苜蓿組>黑麥組>燕麥組，說(shuō)明花生秧組微生物菌群多樣性較高，而燕麥組最低。

表4 腸道微生物多樣性指數(shù)

2.4 腸道微生物菌群組成分析

2.4.1門(mén)水平上微生物菌群組成分析 如圖2A所示，不同纖維源飼糧組在門(mén)水平上共得到15種已知細(xì)菌(苜蓿組14種，花生秧組12種，黑麥組15種，燕麥組14種)，其中12種為共有細(xì)菌，說(shuō)明這12種細(xì)菌在維持腸道菌群功能上發(fā)揮著重要的作用，不會(huì)輕易受飼糧的變化而發(fā)生改變。比較細(xì)菌相對(duì)豐度可知(圖2B)，不同纖維源飼糧組相對(duì)豐度大于0.1% 的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌均為11種共有細(xì)菌，其中厚壁菌門(mén)(Firmicutes)占到了65.91%～68.05%，擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)占到了16.84%～18.17%，變形桿菌門(mén)(Proteobacteria)占到了4.58%～5.70%，放線菌門(mén)(Actinobacteria)占到了4.45%～4.78%。

圖2 門(mén)水平菌群組成分析 A.韋恩圖；B.門(mén)水平上菌群相對(duì)豐度分布

2.4.2屬水平上微生物菌群組成分析 由圖3A可知，不同纖維源飼糧組在屬水平上共得到155個(gè)已知細(xì)菌(苜蓿組138種，花生秧組126種，黑麥組127種，燕麥組124種)，其中108種為共有細(xì)菌，說(shuō)明這108種細(xì)菌在維持腸道菌群功能上發(fā)揮著重要的作用，不會(huì)輕易受飼糧的變化而發(fā)生改變。此外，有26種細(xì)菌為不同纖維源飼糧組所特有(苜蓿組11種、黑麥組5種、燕麥組2種、花生秧組8種)，說(shuō)明這些細(xì)菌可能與不同纖維源飼糧有直接聯(lián)系。比較細(xì)菌相對(duì)豐度可知(圖3B)，苜蓿組相對(duì)豐度含量大于0.1%的優(yōu)勢(shì)菌屬有66種，占總豐度的97.64%；黑麥組有67種，占98.20%；燕麥組有63種，占98.11%；花生秧組65種，占97.89%；說(shuō)明腸道微生物菌群功能的實(shí)現(xiàn)主要依靠?jī)?yōu)勢(shì)細(xì)菌。從單一菌屬來(lái)看，某些菌屬所占比例很高，并且不同纖維源飼糧組之間有所差異，比如苜蓿組Bacteroides(18.76%)、Megamonas(14.88%)、[Ruminococcus]_torques_group(6.67%)；黑麥組Bacteroides(18.70%)、Megamonas(10.63%)、[Ruminococcus]_torques_group(6.69%)；燕麥組Bacteroides(17.06%)、Megamonas(11.67%)、[Ruminococcus]_torques_group(6.1%)；花生秧組Bacteroides(24.37%)、[Ruminococcus]_torques_group(6.3%)、Desulfovibrio(6.1%)。

圖3 屬水平上菌群組成分析 A.韋恩圖；B.屬水平上菌群相對(duì)豐度分布

2.5 腸道微生物菌群β多樣性分析如圖4所示，PCA和PCoA分析結(jié)果均顯示不同纖維源飼糧組在第一軸明顯發(fā)生了分離(PC1+PC2>50%)，且同一纖維源飼糧組的重復(fù)之間較為接近，表明飼糧中的纖維來(lái)源對(duì)鵝腸道微生物菌群有一定的影響。

圖4 PCA和PCoA分析

2.6 腸道微生物菌群豐度差異性分析對(duì)不同纖維源飼糧組之間共有的優(yōu)勢(shì)菌群相對(duì)豐度分析顯示(表5)，門(mén)水平上僅有黏膠球菌(Lentisphaerae)差異顯著(P<0.05)，其中燕麥組和苜蓿組顯著高于花生秧和黑麥組(P<0.05)，而花生秧和黑麥組之間差異不顯著(P>0.05)。屬水平上有理研菌(Alistipes)、梭菌(Shuttleworthia)、互養(yǎng)菌(Synergistes)、放線菌(Slackia)、真桿菌(Eubacteriumcoprostanoligenes)、多形桿狀菌(Bacteroides)、瘤胃菌(Faecalibacterium)、巨單胞菌(Megamonas)和柔嫩梭菌(Subdoligranulum)差異顯著(P<0.05)，其中花生秧組Alistipes顯著高于燕麥組、黑麥組和苜蓿組(P<0.05)，且苜蓿組和黑麥組顯著高于燕麥組，但兩者之間差異不顯著(P>0.05)；燕麥組Shuttleworthia顯著低于苜蓿組、黑麥組及花生秧組(P<0.05)，且苜蓿組、黑麥組及花生秧組之間差異不顯著(P>0.05)；Slackia在苜蓿組和花生秧組之間差異不顯著(P>0.05)，但均顯著低于燕麥草組(P<0.05)；Bacteroides在苜蓿組、黑麥組和燕麥組之間差異不顯著(P>0.05)，且顯著低于花生秧組(P<0.05)；黑麥組Faecalibacterium顯著低于苜蓿組、燕麥組和花生秧組(P<0.05)，且苜蓿組顯著高于花生秧組(P<0.05)，但與燕麥組差異不顯著(P>0.05)；苜蓿組Megamonas顯著高于黑麥組、燕麥組和花生秧組(P<0.05)，黑麥組和燕麥組顯著高于花生秧組(P<0.05)；Subdoligranulum在燕麥組和花生秧組之間差異不顯著(P>0.05)，但顯著低于苜蓿組和黑麥組(P<0.05)，且苜蓿組顯著高于黑麥組(P<0.05)；Eubacteriumcoprostanoligenes在花生秧組和黑麥組之間差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于燕麥組(P<0.05)。

表5 腸道微生物菌群豐度差異 %

3 討論

飼糧是畜禽動(dòng)物賴(lài)以生存的基礎(chǔ)，通過(guò)腸道消化酶攝取其營(yíng)養(yǎng)成分如蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、水分和脂肪等，然后合成機(jī)體所需的物質(zhì)并釋放能量來(lái)維持生命活動(dòng)，而將不被消化酶分解的成分(纖維素、木質(zhì)素等)運(yùn)送至腸道后段，依靠腸道微生物作用進(jìn)行消化吸收，為機(jī)體提供所需的代謝底物、酶和能量[14]。腸道微生物主要包括保護(hù)機(jī)體免受傷害及提高機(jī)體免疫力的共生微生物和使機(jī)體感染或誘發(fā)疾病的有害微生物[15]，均依附于機(jī)體提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)生長(zhǎng)繁殖，受到飼糧組成成分影響。因此，飼糧纖維源的不同將引起腸道微生物菌群組成的變化[16]。

目前，飼糧纖維的來(lái)源主要是干草、秸稈和農(nóng)副產(chǎn)品等，其選擇依據(jù)是種植廣泛、營(yíng)養(yǎng)豐富、產(chǎn)量高和適口性好，備受畜禽動(dòng)物的喜愛(ài)[17-20]。因此，本試驗(yàn)選用苜蓿、黑麥、燕麥和花生秧作為纖維源來(lái)探討其對(duì)鵝腸道微生物菌群的影響，在此采用了高通量測(cè)序法從分子水平來(lái)檢測(cè)微生物菌群種類(lèi)及數(shù)量，并進(jìn)行了OTU分類(lèi)、多樣性指數(shù)及群落結(jié)構(gòu)等統(tǒng)計(jì)分析。與前人[21]研究結(jié)果相比，該研究的微生物菌群多樣性明顯提高，優(yōu)勢(shì)菌門(mén)屬種類(lèi)及相對(duì)豐度有所差異，這可能是由于高通量測(cè)序法與傳統(tǒng)的培養(yǎng)法相比有明顯的優(yōu)勢(shì)，前者對(duì)細(xì)菌的覆蓋率和準(zhǔn)確性更高，錯(cuò)誤率較低[22]。此外，所選鵝品種、腸道黏膜發(fā)育狀態(tài)、纖維源類(lèi)型也可能是造成差異的原因。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂苜蓿、燕麥、黑麥和花生秧等4種纖維源飼糧對(duì)鵝腸道微生物菌群多樣性無(wú)顯著性影響(P>0.05)，表明它們之間的腸道微生物菌群組成基本一致，而腸道微生物菌群組成主要受遺傳和環(huán)境因素的影響[23]，因此，推測(cè)不同纖維源對(duì)腸道菌群無(wú)顯著性影響的原因：一是該研究對(duì)象為四川白鵝這一品種，其遺傳背景一致；二是飼養(yǎng)的外部環(huán)境條件完全一樣，如溫度、濕度、光照等；三是不同飼糧纖維組成相同，均包含中性、酸性和堿性洗滌纖維，區(qū)別在于各組分所占比例不同。雖然纖維源對(duì)微生物菌群多樣性的影響從統(tǒng)計(jì)學(xué)上來(lái)看不顯著，但相互之間也存在高低差異，比如花生秧組多樣性高于其他組，這主要與花生秧的粗纖維含量高有關(guān)，即粗纖維含量越高，相應(yīng)的降解酶種類(lèi)需要量越多，其微生物多樣性越高[24]。腸道微生物菌群的豐度分析顯示各纖維源組的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)主要是Firmicutes和Bacteroidetes，兩者占到總豐度的80%以上，此與前人對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃及家禽腸道微生物菌群的研究結(jié)果基本一致[25-26]，但各菌門(mén)比例略有不同，這主要與動(dòng)物種類(lèi)有關(guān)。

DE FILIPPO等[27]研究發(fā)現(xiàn)，Bacteroidetes對(duì)纖維具有極強(qiáng)的消化能力。DALY等[28]發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)irmicutes和Bacteroidetes包含有許多纖維分解菌。上述結(jié)論以此佐證了本研究中優(yōu)勢(shì)菌屬(Bacteroides、Ruminococcus、Megamonas)均為桿菌門(mén)下菌屬的合理性。此外，苜蓿和燕麥組的纖維素分解菌門(mén)的數(shù)量有所升高，這與PITTA等[29]研究指出的纖維素分解菌門(mén)(屬)數(shù)量與纖維素含量呈正相關(guān)的結(jié)論一致。

對(duì)微生物菌群相對(duì)豐度進(jìn)行差異性分析發(fā)現(xiàn)不同的纖維源在門(mén)水平上顯著影響Lentisphaerae，研究證實(shí)Lentisphaerae的豐度與纖維二糖的降解有關(guān)[30]。本試驗(yàn)中燕麥組和苜蓿組Lentisphaerae豐度高于黑麥組和花生秧組，可能歸因于前者可溶性纖維含量較高，需要更多的Lentisphaerae來(lái)進(jìn)行降解。在屬水平上豐度受到顯著影響的有Alistipes、Shuttleworthia、Slackia、Eubacteriumcoprostanoligenes、Bacteroides、Faecalibacterium、Megamonas和Subdoligranulum。Bacteroides可通過(guò)編碼多種糖苷酶來(lái)水解并利用宿主攝入的植物性多糖[31]，進(jìn)而促進(jìn)碳水化合物的代謝，其豐度與飼糧多糖含量有關(guān)[32]。本試驗(yàn)中花生秧組Bacteroides顯著高于苜蓿、黑麥和燕麥組，可能是花生秧粗纖維含量較高且植物性細(xì)胞壁含量多。Subdoligranulum、Faecalibacterium和Megamonas均屬于厚壁菌門(mén)，Subdoligranulum和Faecalibacterium可表達(dá)乙酰/丙酰輔酶A羧化酶，參與丁酸鹽的合成，而Megamonas則主要參與丙酸鹽的合成[33]。丁酸鹽和丙酸鹽等短鏈脂肪酸的合成與細(xì)菌的發(fā)酵作用有關(guān)，飼糧中可溶性多糖越多，需要的細(xì)菌的數(shù)量越多。Eubacteriumcoprostanoligenes是可降低膽固醇的微生物[34]，其在不同纖維源飼糧組的差異性可能與飼糧所含脂質(zhì)的量有關(guān)。Alistipes和Shuttleworthia是致病菌屬，TYRRELL等[35]研究指出Alistipes是革蘭陰性厭氧桿菌，具有膽汁抗性，主要存在于病畜腸道和腹部。Slackia主要與人類(lèi)牙周炎有關(guān)[36]，但在腸道中的作用尚不清楚。MCDONALD等[37]研究表明珍珠大麥中的纖維會(huì)增加仔豬腸道病原菌，提高腹瀉率。因此，以上與致病、感染等有關(guān)的菌屬豐度在不同纖維源飼糧間具有顯著性差異，可能是纖維源中的抗?fàn)I養(yǎng)因子(黃酮、單寧、蛋白酶抑制因子和植酸等)的差異所引起的[38]。

本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)四川白鵝飼喂苜蓿、黑麥、燕麥和花生秧4種纖維源飼糧研究纖維源對(duì)腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明，不同纖維源飼糧對(duì)腸道微生物菌群多樣性無(wú)顯著性差異(P>0.05)，但可影響菌群結(jié)構(gòu)及顯著影響Lentisphaerae、Alistipes、Shuttleworthia、Slackia、Eubacteriumcoprostanoligenes、Bacteroides、Faecalibacterium、Megamonas和Subdoligranulum的相對(duì)豐度(P<0.05)。