趙福陽 沈雪 鄭俊雅

農(nóng)藥殘留檢測的重要性毋庸置疑。從最開始有機氯、有機磷與氨基甲酸酯類農(nóng)藥到現(xiàn)在的各種農(nóng)藥類型，液相色譜檢測與氣相色譜檢測已經(jīng)無法滿足檢測的實際需求，為了實現(xiàn)高通量檢測需求，農(nóng)殘檢測對于儀器檢測方面的需求也在不斷提升。液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀、氣相色譜質(zhì)譜儀等設(shè)備的涌現(xiàn)，為農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥檢測提供了一定的硬件支持。

一、色譜法

1.氣相色譜儀。這是一種常用的檢測設(shè)備，分離效率高、分析速度快，尤其是對于成分復雜的樣品，其高選擇性、快速可靠以及高靈敏度的優(yōu)勢更加凸顯，被廣泛用于中藥、果蔬以及環(huán)境體系當中的農(nóng)藥殘留檢測。目前，氣相色譜法所使用的分離柱逐漸從填充柱轉(zhuǎn)變成毛細管柱。耿慧春用乙腈提取樣品中的殘留農(nóng)藥，利用固相萃取過濾后，將樣品注入到氣相色譜儀中，采用電子捕捉檢測器測定出其中包含了11種有機磷類農(nóng)藥殘留；其構(gòu)建的方法具備試劑用量少、操作便捷、測定結(jié)果精確度高等優(yōu)點。

2.高效液相色譜法。這是一種相對傳統(tǒng)的檢測手段，被廣泛用于熱穩(wěn)定性差、高沸點、相對分子質(zhì)量較大的農(nóng)藥檢測中，但不適用于相對復雜的樣品檢測。相較于氣相色譜法，高效液相色譜法中流動相參與分離機制，其比例、組成以及pH值能夠自主調(diào)節(jié)，有助于樣品檢測、分析。陳珠靈利用高效液相色譜法分離、檢測了蔬菜當中的乙基對硫磷、甲基對硫磷以及甲拌磷，篩選與優(yōu)化了樣品提取、凈化和檢測的色譜條件，將shim-pack VP-ODS作為分離柱，流動相采用了V甲醇︰V水=85︰15，紫外檢測的波長是250nm。這種方法測定的3種有機磷在0.02-2.0μg/L內(nèi)具備了良好線性，檢出限可以達到1.0-5.0μg/L，加標回收率為97.44%-101.22%，適用于分析各類蔬菜中的農(nóng)藥殘留量。

3.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)）。該法不僅具備了氣相色譜高分離的基本效能，也能夠使用質(zhì)譜實現(xiàn)對化合物結(jié)構(gòu)特點的準確鑒定，被用于農(nóng)藥殘留檢測工作中，逐漸成為了復雜基質(zhì)當中痕量化合物定性定量分析的重要工具。周蓉把分散液液微萃取技術(shù)與分散固相萃取凈化技術(shù)相互融合后用于分析蔬菜中農(nóng)藥殘留，并測定了19種有機磷農(nóng)藥。這種方法能夠減少樣品基質(zhì)所產(chǎn)生的干擾，實現(xiàn)選擇性測量復雜基質(zhì)中待測物的基本目標，具有分離效果好、簡單易操作、有機溶劑消耗量低的基本特征，多數(shù)樣品可以得到較好的凈化富集以及較高的回收率。

4.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法。該法具備分析速度快、前處理便捷、抗干擾能力強等諸多優(yōu)點，被廣泛用于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留分析中。楊玉平通過優(yōu)化凈化條件以及質(zhì)譜、色譜條件，構(gòu)建了以乙腈為提取液、SPE凈化、能夠同時檢測蔬菜中28種農(nóng)藥殘留的檢測方法，靈敏度高、使用范圍廣，定量限與檢出限均滿足國家標準，穩(wěn)定性優(yōu)、重現(xiàn)性好，基質(zhì)適用性高，能夠用于實驗室日常檢測。

二、快速檢測法

1.免疫分析法。免疫分析法是結(jié)合免疫反應(yīng)和現(xiàn)代測量手段的超微量測定方法，可以測定小分子量農(nóng)藥以及大分子量農(nóng)藥，包括酶免疫測試法、熒光免疫測定法以及放射免疫測定法。總體上看，免疫分析法的靈敏度與效率更高，操作簡單，成本較低，不僅可以準確測定樣品，還能明確樣品中各個成分的含量。生物傳感器法能夠使用傳感技術(shù)，結(jié)合農(nóng)藥免疫分析技術(shù)實現(xiàn)對樣品的定性篩選以及常規(guī)分析。

2.酶抑制法。膽堿酯酶抑制法是使用最為廣泛的一種酶抑制法，主要用于檢測有機磷含量。利用特異性抑制膽堿酯酶對于昆蟲所具備的毒性作用，試驗過程中讓膽堿酯酶和樣品提取液進行有效融合、反應(yīng)，如果膽堿酯酶受到了抑制，說明樣品液中包含了有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥。同時，檢測過程中除了能夠使用速測箱以外，還能夠使用傳感器以及快速檢測儀等諸多檢測設(shè)備。不過，這種方法所采用的酶通常來自于動植物，成本較高，而且不同材料中所獲得的酶的敏感度與活性存在差異，保存難度較大。李順借助酶抑制分光光度法實現(xiàn)了對蔬菜中農(nóng)藥殘留的快速檢測，將抑制率作為指標，分析了抑制溫度、抑制時間、底物加入量以及酶液加入量等因素對于檢測條件所產(chǎn)生的影響，利用極差分析以及正交試驗，按照影響力度得出了四個因素的主次關(guān)系，分別是抑制時間、底物加入量、酶液量以及溫度，最終得到了蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留檢測的最佳條件為抑制溫度35℃、抑制時間15min、底物加入量與酶液加入量均為100μL。

三、農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)殘檢測確認技術(shù)

農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥檢測會產(chǎn)生兩種結(jié)果：一種是農(nóng)藥殘留檢測指標處于檢測限下，沒有檢測出農(nóng)藥殘留，最終的結(jié)果為陰性；另一種是農(nóng)藥殘留檢測指標在檢測限以上，最終檢測出了農(nóng)藥殘留，也就是結(jié)果為陽性。陰性結(jié)果可以使用日常的檢測技術(shù)加以確認，陽性結(jié)果所采用的確認技術(shù)則比較復雜，要在確?；厥章实那疤嵯麓_定最終農(nóng)藥檢測結(jié)果是唯一的。

農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測確認方法一般可以分成條件改變法、質(zhì)譜確認法、添加法等，其中添加法能夠分成基質(zhì)添加法以及標樣添加法，基質(zhì)添加法是在標樣中添加物質(zhì)稀釋樣品從而形成新標樣，這樣可以最大化的去除樣品當中基質(zhì)效應(yīng)對于農(nóng)藥殘留時間所產(chǎn)生的影響，減少農(nóng)藥殘留誤判的產(chǎn)生概率。

當前，農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥種類以及成分日益復雜，檢測技術(shù)也朝著快速化、便攜化、科技化的方向不斷發(fā)展，這些情況對于我國農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)提出了全新的挑戰(zhàn)，只有不斷強化農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的科技水平，才可以提升農(nóng)藥殘留技術(shù)分析的準確性，從而實現(xiàn)提升以及保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的目標。（基金項目：牡丹江醫(yī)學院教育教學改革項目；基金編號：MYZD20190002。）

作者簡介：趙福陽（1981.02-），男，漢族，黑龍江省海林市，東北林業(yè)大學食品科學碩士，牡丹江醫(yī)學院講師，研究方向：食品科學；鄭俊雅（1990.11-），女，漢族，黑龍江省牡丹江市，牡丹江醫(yī)學院生物化學碩士，牡丹江醫(yī)學院助教，研究方向：生物化學與分子生物學。

通訊作者：沈雪（1989.06-），女，漢族，遼寧鞍山，錦州醫(yī)科大學食品科學碩士，牡丹江醫(yī)學院助教，研究方向：食品質(zhì)量與安全。