目前,包括乳制品增香領(lǐng)域、食用油加工以及其他食品加工等方面均大量涉及脂肪酶的應(yīng)用。為進(jìn)一步提升脂肪酶的利用率,滿(mǎn)足市場(chǎng)使用需要,有必要對(duì)食品用微生物發(fā)酵生產(chǎn)脂肪酶進(jìn)行探討。
一、脂肪酶的來(lái)源
1.微生物固態(tài)發(fā)酵。霉菌是固態(tài)發(fā)酵脂肪酶最為常用的菌種之一,包括曲酶、根毛霉等。此類(lèi)可以得到脂肪酶的霉菌,絕大多數(shù)源自牛奶加工行業(yè)、植物油加工行業(yè)等。有關(guān)學(xué)者基于青霉固態(tài)發(fā)酵機(jī)制,設(shè)計(jì)了最為理想的實(shí)驗(yàn)條件,并實(shí)現(xiàn)了40U/gds的酶活性,其菌種主要源自食用油行業(yè)。
2.微生物液體發(fā)酵。酵母以及細(xì)菌等主要是基于液態(tài)生成發(fā)酵技術(shù),一部分霉菌也支持液態(tài)的發(fā)酵技術(shù)。常見(jiàn)的液態(tài)發(fā)酵的酵母包括皺褶假絲酵母、南極假絲酵母、畸形假絲酵母以及星狀毛狍子菌等,其中應(yīng)用最為普遍的是地絲菌屬以及假絲酵母屬等。常見(jiàn)的液態(tài)形式發(fā)酵的細(xì)菌則包含相關(guān)桿屬菌,常見(jiàn)的有枯草芽孢桿菌、嗜堿芽孢桿菌以及凝結(jié)芽孢桿菌等,假單胞細(xì)菌以及溶酪葡萄球菌也多出現(xiàn)在脂肪酶生產(chǎn)應(yīng)用方面。在相當(dāng)一部分情況下,因?yàn)榧?xì)菌對(duì)于水活度有著一定的要求,故而培養(yǎng)主要以SMF形式進(jìn)行,對(duì)于SSF的使用則并不多。不過(guò),也有相關(guān)細(xì)菌能夠開(kāi)展固體發(fā)酵,酶的活性也并不低,如Mahanta及其團(tuán)隊(duì)利用SSF培養(yǎng)方式對(duì)綠膿假單胞菌進(jìn)行探究,其最大活性可以達(dá)到1084U/mL。
二、影響固態(tài)發(fā)酵的要素
1.基質(zhì)。培養(yǎng)基是固體發(fā)酵期間最為主要的能源來(lái)源基礎(chǔ),科學(xué)、合理的培養(yǎng)基對(duì)于固態(tài)發(fā)酵作用尤為關(guān)鍵。微生物在基質(zhì)環(huán)境下的生長(zhǎng)以及代謝等各種活動(dòng),勢(shì)必會(huì)由于基質(zhì)物化環(huán)境等的不同而影響其活性。往往基質(zhì)顆粒越小,越能夠支持更大面積的微生物生長(zhǎng),可以大大提升固態(tài)發(fā)酵反應(yīng)速度。大顆粒因?yàn)檩^大間隙情況,可以大大提高傳質(zhì)以及傳熱情況,也能提供更有力的呼吸與通氣效果,但由于表面積不大,不利于菌體等的活動(dòng)以及脂肪酶的產(chǎn)生。
2.溫度。絕大多數(shù)真菌的固態(tài)發(fā)酵溫度主要集中于27bc-29bc范圍內(nèi),實(shí)際溫度對(duì)于菌體各項(xiàng)生命活動(dòng)開(kāi)展、脂肪酶分泌等均有一定的影響,是脂肪酶固態(tài)發(fā)酵期間的關(guān)鍵物理參量。散熱問(wèn)題是固態(tài)發(fā)酵考量的關(guān)鍵內(nèi)容,在針對(duì)相關(guān)反應(yīng)設(shè)備的研究過(guò)程中,應(yīng)當(dāng)盡可能地規(guī)避溫度對(duì)于整個(gè)發(fā)酵過(guò)程的影響。
3.空氣。在固體發(fā)酵期間,因?yàn)閱挝豢臻g中的基質(zhì)濃度以及菌體的濃度往往遠(yuǎn)大于液體深層發(fā)酵有關(guān)數(shù)據(jù),熱量情況也遠(yuǎn)大于液體發(fā)酵形式。此外,固態(tài)的發(fā)酵形式水分含量更小,熱容量也更小,不易傳熱。因此,固體發(fā)酵的溫度控制相較于液態(tài)形式更為艱難,在厚層大體量培養(yǎng)期間尤為明顯。常見(jiàn)的固體散熱形式主要是空氣流通控制,通常低溫以及較高的空氣流動(dòng)可以大大提增脂肪酶產(chǎn)量。在發(fā)酵溫度較高的情況下,立即增加通風(fēng)效果;在溫度較低的情況下,則進(jìn)一步降低空氣流動(dòng),或者暫停通風(fēng)。
作者簡(jiǎn)介:楊揚(yáng)(1994.05.1-),女,新疆伊寧,碩士,安琪酵母(伊犁)有限公司,職務(wù):研發(fā)專(zhuān)員,職稱(chēng):中級(jí),研究方向:微生物發(fā)酵。