李鹍 許毅 貴州省清鎮(zhèn)市公安局

引言

隨著DNA檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展及各級(jí)公安機(jī)關(guān)運(yùn)用DNA偵查破案意識(shí)的不斷增強(qiáng)，現(xiàn)場(chǎng)勘查的生物物證和采集的人員血樣逐年上升，DNA檢驗(yàn)案件數(shù)量大幅增加，但國(guó)內(nèi)具有DNA實(shí)驗(yàn)室的公安機(jī)關(guān)主要集中在各省區(qū)地級(jí)市，各縣級(jí)公安機(jī)關(guān)需將DNA物證送至上級(jí)公安機(jī)關(guān)DNA實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，送檢檢驗(yàn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，造成大量案件積壓，辦案效率低下[1]。隨著我國(guó)治安形勢(shì)的好轉(zhuǎn)，大案要案明顯減少，但以入室盜竊案為代表的盜搶騙案件在總案件中的占比卻有上升趨勢(shì)，由于犯罪嫌疑人反偵察意識(shí)的增強(qiáng)，此類盜竊案現(xiàn)場(chǎng)足跡、指紋、視頻監(jiān)控等常規(guī)痕跡物證缺乏[2]，現(xiàn)場(chǎng)脫落細(xì)胞的DNA檢驗(yàn)可以有效彌補(bǔ)上述不足，成為偵破此類案件的關(guān)鍵技術(shù)手段。

清鎮(zhèn)市公安局立足于盜搶騙案件的高發(fā)態(tài)勢(shì)，以國(guó)產(chǎn)GA118-16A遺傳分析儀為核心設(shè)備建成了雙線DNA實(shí)驗(yàn)室，以DNA實(shí)驗(yàn)室為抓手，強(qiáng)化現(xiàn)場(chǎng)勘查、現(xiàn)場(chǎng)生物檢材的發(fā)現(xiàn)提取和生物物證提取檢驗(yàn)，著重提高脫落細(xì)胞的檢出率，現(xiàn)場(chǎng)提取物證后及時(shí)送至DNA實(shí)驗(yàn)室，及時(shí)檢驗(yàn)，強(qiáng)調(diào)“更快地破小案”，重點(diǎn)打擊盜搶騙案件，破獲了一批有影響力的盜搶騙案件，打壓了犯罪分子的囂張氣焰，增強(qiáng)了人民群眾的安全感和幸福感。

一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)及運(yùn)行方案

參照《公安機(jī)關(guān)DNA實(shí)驗(yàn)室等級(jí)評(píng)定辦法（試行）》要求，清鎮(zhèn)市公安局的法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室在原辦公樓擴(kuò)建，依據(jù)三級(jí)DNA實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，總面積281平米，根據(jù)檢材類型分為常量（人員樣本）生物檢材、微量生物檢材兩條檢測(cè)線，設(shè)計(jì)了受理室、案件分析室、洗消室、試劑配置室、耗材室、檢材預(yù)處理室、常量檢材處理室、微量檢材處理室、前加樣室、擴(kuò)增室、后加樣室、測(cè)序室十二個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)間，如圖1所示，受總面積限制，除提取環(huán)節(jié)對(duì)常量檢材和微量檢材進(jìn)行物理分區(qū)外，其余加樣、擴(kuò)增、檢材環(huán)節(jié)均采用兩套獨(dú)立設(shè)備分時(shí)段檢測(cè)的方式避免交叉污染。整個(gè)實(shí)驗(yàn)室區(qū)間實(shí)行單向流程，在常量檢材、微量檢材處理室與前加樣室之間設(shè)立風(fēng)淋門，從檢材預(yù)處理室開始，每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)間之間都設(shè)立傳遞窗，避免檢驗(yàn)人員本身DNA及實(shí)驗(yàn)區(qū)間氣溶膠的污染。本實(shí)驗(yàn)室為保證實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，定期清潔、紫外消毒、通風(fēng)。對(duì)提取、處理檢材的器械如剪刀、鑷子等進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，配有專業(yè)的洗消設(shè)備和高溫干燥箱，避免器械對(duì)物證的DNA污染。整個(gè)實(shí)驗(yàn)室區(qū)間的設(shè)計(jì)和配備的實(shí)驗(yàn)設(shè)備可以很好的避免外來(lái)性DNA及實(shí)驗(yàn)室區(qū)間等交叉污染的可能性。

實(shí)驗(yàn)室主要使用的試劑有M48磁珠提取試劑、Identifiler Plus和DNATyper-19擴(kuò)增試劑盒；主要設(shè)備有一臺(tái)32通道核酸自動(dòng)提取儀、四臺(tái)PCR擴(kuò)增儀（常量、微量檢材擴(kuò)增各兩臺(tái)）以及兩臺(tái)GA118-16A型遺傳分析儀分別用于常量檢材DNA、微量檢材DNA的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室還配有奧林巴斯電子顯微鏡一臺(tái)，生物檢材發(fā)現(xiàn)設(shè)備一套，可進(jìn)行鏡檢，實(shí)物檢材上如接觸性DNA、血跡、唾液斑、精斑等的發(fā)現(xiàn)及處理。實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施包括排水、電氣、空調(diào)與通風(fēng)（凈化空調(diào)系統(tǒng)）、弱電系統(tǒng)（空調(diào)控制系統(tǒng)、電話系統(tǒng)、網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)、監(jiān)控系統(tǒng)、門禁系統(tǒng)）、實(shí)驗(yàn)臺(tái)柜（含通風(fēng)柜）等。本實(shí)驗(yàn)室在交付運(yùn)行前，特邀貴州省公安廳和貴陽(yáng)市公安局DNA實(shí)驗(yàn)室的專家一同參與驗(yàn)收，重點(diǎn)對(duì)各實(shí)驗(yàn)區(qū)間的密閉性、氣壓及空調(diào)系統(tǒng)進(jìn)行檢查，檢驗(yàn)空調(diào)的凈化能力是否能很好的避免實(shí)驗(yàn)室氣溶膠的污染；實(shí)驗(yàn)室的備用電源是否能在應(yīng)急狀態(tài)下保證擴(kuò)增、電泳的有序進(jìn)行；對(duì)國(guó)產(chǎn)GA118-16A型遺傳分析儀用已知標(biāo)準(zhǔn)品9947A進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，檢驗(yàn)其靈敏度。

本實(shí)驗(yàn)室于2019年底通過(guò)實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)證，現(xiàn)有法醫(yī)物證專業(yè)民警3人，事業(yè)編制輔警3人，在貴陽(yáng)市公安局DNA實(shí)驗(yàn)室及貴州省公安廳DNA實(shí)驗(yàn)室參加了學(xué)習(xí)培訓(xùn)。日常工作由一名民警帶一名事業(yè)輔警開展實(shí)驗(yàn)，DNA數(shù)據(jù)由民警審核及出具鑒定文書，定期組織實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行理論學(xué)習(xí)及實(shí)驗(yàn)操作考核。民警還參與案件的現(xiàn)場(chǎng)勘查，在現(xiàn)場(chǎng)勘查中積累生物檢材的發(fā)現(xiàn)及提取能力，提高實(shí)驗(yàn)室的DNA檢出率。因本實(shí)驗(yàn)運(yùn)行檢案時(shí)間不長(zhǎng)，DNA的發(fā)現(xiàn)和提取能力還需在實(shí)際檢驗(yàn)工作中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，在案件現(xiàn)場(chǎng)中去實(shí)際操作發(fā)現(xiàn)提取生物檢材。為避免外來(lái)性DNA及實(shí)驗(yàn)室區(qū)間DNA的污染，實(shí)驗(yàn)室建立現(xiàn)場(chǎng)勘查人員及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員的DNA質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，定期提取實(shí)驗(yàn)室用水、實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、提取器械進(jìn)行檢材，排查污染源及檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境是否干凈。實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行耗材，提取、擴(kuò)增試劑等由專人保管，并制定臺(tái)賬。實(shí)驗(yàn)室從案件受理到鑒定文書的發(fā)放嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行日常檢驗(yàn)工作，制定案件受理、檢材登記、檢材預(yù)處理記錄、擴(kuò)增、電泳等臺(tái)賬，保證數(shù)據(jù)的真實(shí)性、唯一性、可溯源性。如有疑問(wèn)可以很快查出問(wèn)題、及時(shí)修正。整個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作流程嚴(yán)格按照法醫(yī)生物物證及DNA現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，并制定詳細(xì)實(shí)驗(yàn)流程記錄，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)由實(shí)驗(yàn)操作者確認(rèn)，并由本專業(yè)授權(quán)簽字人進(jìn)行最終復(fù)核后制定物證鑒定文檔，最后由技術(shù)室負(fù)責(zé)人審核物證鑒定文檔無(wú)誤簽字同意后方可出具鑒定文書給辦案單位。

二、實(shí)戰(zhàn)應(yīng)用

在盜搶騙案件中由于犯罪嫌疑人反偵察意識(shí)的增強(qiáng)，通常采用戴手套、躲避監(jiān)控、不攜帶通信工具等手段躲避偵查，給案件偵破帶來(lái)困難，仔細(xì)勘驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)、提取遺留的脫落細(xì)胞進(jìn)行DNA檢驗(yàn)是偵破此類案件的有效手段，清鎮(zhèn)市公安局DNA實(shí)驗(yàn)室投入運(yùn)行以來(lái)，現(xiàn)場(chǎng)勘查中加大了生物檢材的發(fā)現(xiàn)及提取，并在第一時(shí)間內(nèi)將有價(jià)值的生物檢材送至DNA實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)，通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)生物檢材的發(fā)現(xiàn)并及時(shí)的檢驗(yàn)破獲多起此類案件，接下來(lái)，列舉兩個(gè)案例來(lái)說(shuō)明。

（一）案例介紹

案例1：2019年8月12日，清鎮(zhèn)市公安局刑事科學(xué)技術(shù)室接110指揮中心指令，市區(qū)某商務(wù)酒店前臺(tái)被搶劫；

案例2：2019年9月18日凌晨，清鎮(zhèn)市某鄉(xiāng)熊某報(bào)案稱其保險(xiǎn)柜被人盜走，保險(xiǎn)柜中有現(xiàn)金60000元。

兩起案件發(fā)生后調(diào)取的監(jiān)控畫面人像模糊，不能第一時(shí)間通過(guò)視頻監(jiān)控鎖定嫌疑人，給偵查帶來(lái)了很大的困難。通過(guò)勘查人員仔細(xì)的現(xiàn)場(chǎng)勘查，并延伸勘查范圍，在現(xiàn)場(chǎng)及嫌疑人可能逃跑的路線上發(fā)現(xiàn)了極有檢驗(yàn)價(jià)值的物證檢材，第一時(shí)間送往DNA實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。

（二）DNA檢驗(yàn)

1.檢材種類

案例1中現(xiàn)場(chǎng)提取了嫌疑人接觸過(guò)的手機(jī)數(shù)據(jù)線，前臺(tái)抽屜上的擦拭物，以及嫌疑人作案時(shí)所用的絲襪和刀。

案例2中現(xiàn)場(chǎng)提取了被嫌疑人破壞的保險(xiǎn)柜碎片數(shù)個(gè)，其中包括保險(xiǎn)柜把手、數(shù)碼鍵盤等，以及嫌疑人從現(xiàn)場(chǎng)帶走的鮮橙多飲料瓶口上的擦拭物。

對(duì)上述兩起案件的檢材進(jìn)行擦拭，剪取處理進(jìn)行DNA檢驗(yàn)。

2.DNA提取

將裝有處理過(guò)的現(xiàn)場(chǎng)檢材EP管中加入200 μlG2裂解液、15 μl10mg/ml蛋白酶K，振蕩混勻，56℃振蕩頻率1100rpm加熱裂解1小時(shí)30分鐘后，加入3倍體積MTL吸附液、30ul磁珠，室溫下放置翻轉(zhuǎn)混勻儀混勻10分鐘，倒掉管內(nèi)液體，加入80%乙醇溶液漂洗3次，65℃振蕩頻率1100烘干后加入30 μl去離子水，75℃加熱8分鐘后將其置于磁力架上吸出溶液得到所需DNA后待擴(kuò)增。

3.PCR擴(kuò)增

采用Identifiler Plus試劑盒10 μl體系，模板4 μl進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增循環(huán)為29次。

4.電泳

使用國(guó)產(chǎn)GA118-16A型遺傳分析儀電泳。

5.檢驗(yàn)結(jié)果

使用ID-X分析軟件對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果進(jìn)行分析。案例1在絲襪、刀上檢出單一的男性DNA分型，手機(jī)數(shù)據(jù)線的擦拭物及前臺(tái)抽屜上的擦拭物上檢出混合DNA分型，均包含絲襪和刀上檢出的單一男性DNA分型。

案例2在鮮橙多飲料瓶口擦拭物上檢出單一男性DNA分型，保險(xiǎn)柜把手及數(shù)碼鍵盤上檢出混合DNA分型，其余保險(xiǎn)柜碎片上未獲得完整的DNA分型。

6.DNA數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)

將兩起案例獲得的單一男性DNA分型輸入DNA數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，均成功比中犯罪嫌疑人。兩起案例檢材獲得的單一DNA分型結(jié)果如圖2、3所示。

三、討論

兩起案例DNA分型比中的嫌疑人信息在第一時(shí)間推送給偵查后，均在案發(fā)后24小時(shí)內(nèi)鎖定并抓獲了嫌疑人。在視頻監(jiān)控沒(méi)能發(fā)揮作用的情況下，這兩起案例的成功破獲得力于現(xiàn)場(chǎng)生物檢材的及時(shí)送檢，這足以說(shuō)明現(xiàn)場(chǎng)勘查提取的生物檢材如不第一時(shí)間送檢，長(zhǎng)期擱置會(huì)造成DNA降解的可能；在送上級(jí)公安機(jī)關(guān)DNA實(shí)驗(yàn)室的過(guò)程中，路程的遠(yuǎn)近、溫度的影響等因素也會(huì)造成DNA的損耗影響檢驗(yàn)結(jié)果。上級(jí)公安機(jī)關(guān)DNA實(shí)驗(yàn)室的工作任務(wù)重，大案要案多，面對(duì)下級(jí)公安機(jī)關(guān)送檢的大量檢材，亦不能第一時(shí)間檢驗(yàn)，造成了一般盜竊等小案件的檢材不能第一時(shí)間檢驗(yàn)，不能為破案及時(shí)提供有效信息。

類似上述盜竊案現(xiàn)場(chǎng)的脫落細(xì)胞檢驗(yàn)時(shí)間非常關(guān)鍵，從實(shí)際檢驗(yàn)情況看，超過(guò)兩周后的檢材基本無(wú)法檢出。王琴等通過(guò)780份脫落細(xì)胞的檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，超過(guò)一周的脫落細(xì)胞檢出率明顯降低[3]，對(duì)于脫落細(xì)胞檢材應(yīng)盡早送檢、及時(shí)檢驗(yàn)，有條件的區(qū)縣級(jí)公安機(jī)關(guān)建立DNA實(shí)驗(yàn)室可以很好的解決上述檢驗(yàn)不及時(shí)的問(wèn)題。區(qū)縣一級(jí)公安機(jī)關(guān)建立DNA實(shí)驗(yàn)室有效的解決了生物檢材檢驗(yàn)的時(shí)效性問(wèn)題。

清鎮(zhèn)市公安局DNA實(shí)驗(yàn)室自成立至今，共受理案件300多起，各類檢材600多份，國(guó)產(chǎn)GA118-16A型遺傳分析儀在實(shí)際應(yīng)用對(duì)各類檢材具有良好的適應(yīng)性[4]，基因分型結(jié)果準(zhǔn)確，圖譜清晰，靈敏度高，重復(fù)性、穩(wěn)定性好，對(duì)Identifiler Plus、DNATyper-19等進(jìn)口和國(guó)產(chǎn)擴(kuò)增試劑盒的適應(yīng)性良好。