靳月琴，常 麗，王曉芳，韓 冰，紀(jì) 薇

（1.山西省蠶業(yè)科學(xué)研究院，山西運(yùn)城044000；2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，山西太谷030801；3.遼寧省蠶業(yè)科學(xué)研究所，遼寧鳳城118100）

葡萄是公認(rèn)的最古老的水果之一，也是世界上栽培面積最大、產(chǎn)量最多的水果，在我國(guó)栽培廣泛，是重要的經(jīng)濟(jì)作物。無(wú)核葡萄作為鮮食葡萄和制干葡萄市場(chǎng)的重要組成部分，對(duì)促進(jìn)葡萄產(chǎn)業(yè)發(fā)展有著重要的作用，廣受消費(fèi)者青睞，其主要來(lái)源于單性結(jié)實(shí)型（Parthenocarpy）和假單性結(jié)實(shí)型（Stenospermacarpy）[1]。

葡萄天然無(wú)核品種較少，且現(xiàn)有無(wú)核品種品質(zhì)和商品性相對(duì)有核品種較差，不能滿足消費(fèi)者對(duì)無(wú)核葡萄的需求，因此，無(wú)核葡萄品種培育及有核葡萄無(wú)核化成為葡萄研究的熱點(diǎn)。一方面，單性結(jié)實(shí)不進(jìn)行受精作用即可產(chǎn)生種子，但很難應(yīng)用于無(wú)核葡萄新品種選育[2]，所以，目前葡萄無(wú)核研究主要集中在種子敗育結(jié)實(shí)型（假單性結(jié)實(shí)型）葡萄，其雖未能通過(guò)授粉受精形成完整種子，但無(wú)核及其他優(yōu)良性狀可遺傳給后代，遺傳性較為穩(wěn)定，易于葡萄育種及優(yōu)質(zhì)栽培[3]。另一方面，一些栽培廣泛、品質(zhì)較佳且商品性強(qiáng)的有核葡萄品種無(wú)核化也是無(wú)核葡萄的重要來(lái)源。

無(wú)核葡萄品種是用來(lái)了解無(wú)核機(jī)制的重要基礎(chǔ)材料，但是天然的無(wú)核葡萄品種較為稀缺，而且我國(guó)無(wú)核葡萄品種大部分來(lái)自國(guó)外，嚴(yán)重制約了我國(guó)葡萄無(wú)核化的發(fā)展，其也成為了我國(guó)自主培育無(wú)核品種的瓶頸[4]；而且有核品種無(wú)核化也需要無(wú)核形成機(jī)制作為理論依據(jù)，但是目前國(guó)內(nèi)外對(duì)葡萄無(wú)核的形成機(jī)制尚不明晰，一定程度上阻礙了葡萄無(wú)核化技術(shù)的進(jìn)步，加之，我國(guó)葡萄無(wú)核化技術(shù)研究起步較晚，導(dǎo)致我國(guó)葡萄優(yōu)質(zhì)高效栽培配套技術(shù)體系難以形成，致使我國(guó)葡萄無(wú)核化研究滯后于其他國(guó)家。

筆者通過(guò)整理總結(jié)前人對(duì)無(wú)核葡萄的相關(guān)研究，概述了葡萄無(wú)核形成原因及調(diào)控機(jī)理，為葡萄無(wú)核深入研究提供方向，以期促進(jìn)我國(guó)無(wú)核葡萄產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

1 無(wú)核葡萄材料

1.1 常見(jiàn)的無(wú)核葡萄品種

目前，我國(guó)無(wú)核葡萄的栽植面積、品種選育在世界上處于快速發(fā)展階段，但我國(guó)自己培育的無(wú)核葡萄品種較少，大多來(lái)源于歐美（美國(guó)、法國(guó)、意大利、德國(guó)和西班牙等）、澳洲及亞洲部分國(guó)家（日本、以色列等）（表1）。其中，美國(guó)、法國(guó)、意大利、日本、加拿大等研究及栽培歷史較為悠久[5]，美國(guó)無(wú)核葡萄培育技術(shù)領(lǐng)先于世界水平，品種較為豐富，在世界無(wú)核葡萄市場(chǎng)中占據(jù)重要地位，如綠寶石無(wú)核（Emerald Seedless）、無(wú)核白雞心（Centennial Seedless）、克瑞森無(wú)核（Crimson Seedless）、火焰無(wú)核（Flame Seedless）和甜蜜東方藍(lán)寶石（Sweet Oriental Sapphire Seedless）等。我國(guó)無(wú)核葡萄品種選育工作雖起步晚，但發(fā)展較為迅速，成果較為顯著，如無(wú)核翠寶、京早晶、鄭果大無(wú)核、紫甜無(wú)核、金田皇家無(wú)核和月光無(wú)核等品種[6]，豐富了我國(guó)無(wú)核葡萄資源，為葡萄無(wú)核研究提供了重要保障。

表1常見(jiàn)的國(guó)內(nèi)外選育的無(wú)核品種

1.2 無(wú)核化處理的有核葡萄品種

通過(guò)技術(shù)手段將有核品種無(wú)核化處理從而獲得無(wú)核品種也是無(wú)核葡萄的重要來(lái)源途徑。無(wú)核化技術(shù)在國(guó)內(nèi)外葡萄生產(chǎn)上應(yīng)用廣泛，且涌現(xiàn)出了部分適宜無(wú)核化處理的優(yōu)良品種（表2），如巨峰、陽(yáng)光玫瑰、醉金香、遼峰、紅地球、魏可、紅富士等。雖然栽培區(qū)域廣而且配套技術(shù)成熟，但是也存在穗軸硬化、果皮澀味重、大小粒現(xiàn)象嚴(yán)重、商品性不穩(wěn)定等問(wèn)題[7]，因此，研究葡萄無(wú)核形成機(jī)制及掌握品種特性，對(duì)葡萄無(wú)核調(diào)控的意義重大，在一定程度上可以保證無(wú)核性狀的穩(wěn)定性，推動(dòng)葡萄無(wú)核產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

表2常見(jiàn)的無(wú)核化處理的有核葡萄品種

2 無(wú)核形成機(jī)制研究

2.1 生理機(jī)制

種子是評(píng)判葡萄無(wú)核性狀的直觀指標(biāo)，授粉受精是種子形成的主要途徑，一般會(huì)形成兩類果實(shí)：（1）授粉受精正常形成有核果實(shí)；（2）授粉受精受阻形成無(wú)核果實(shí)。其中后者是葡萄無(wú)核研究的核心，其形成較為復(fù)雜[8]。有生命力的花粉是葡萄植株進(jìn)行正常授粉受精形成種子的必要保障，花粉來(lái)源于雄蕊，其發(fā)育異常會(huì)導(dǎo)致雄性不育，進(jìn)而形成無(wú)核果實(shí)。種子的形成與雌性器官的正常發(fā)育也息息相關(guān)，胚囊與胚乳是雌性器官的關(guān)鍵組成部分，二者發(fā)育異常會(huì)導(dǎo)致雌性不育，無(wú)法形成正常的種子[9]。正常的授粉受精后，如若胚中途敗育，種子也無(wú)法形成，其（胚敗育）導(dǎo)致的無(wú)核是目前的研究熱點(diǎn)。

花粉是授粉受精的重要組成部分，其敗育或退化是雄性不育研究的關(guān)鍵。真正意義上的無(wú)核是不經(jīng)授粉受精就可以形成果實(shí)的雄性不育品種，單性結(jié)實(shí)是培育無(wú)核品種的重要途徑，同時(shí)其外部形態(tài)及營(yíng)養(yǎng)激素水平與正常狀態(tài)的差異是研究者的關(guān)注重點(diǎn)。牛立新等[10]、李鴻莉等[11]通過(guò)掃描電鏡對(duì)雄性不育葡萄的花粉形態(tài)進(jìn)行了觀察，均發(fā)現(xiàn)不育花粉的雄蕊花絲短，花藥反卷，形狀為近球形，沒(méi)有萌發(fā)溝。花粉的萌發(fā)離不開(kāi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素調(diào)控，劉倩[12]對(duì)葡萄雄性不育品種魏可實(shí)生和巨峰實(shí)生的花粉觀察發(fā)現(xiàn)，它們不同發(fā)育時(shí)期的脯氨酸、可溶性蛋白質(zhì)和可溶性糖含量不足，與雄蕊發(fā)育異常有關(guān)，并導(dǎo)致最終敗育。鄭煥[13]對(duì)花藥發(fā)育不同時(shí)期的激素測(cè)定表明，鐘山紅花藥內(nèi)源激素比例失調(diào)與葡萄雄性不育有一定的關(guān)系[13]。自交不親和性也是無(wú)核形成的重大原因之一，有研究表明，若花粉發(fā)育異常，即使落到柱頭上，也無(wú)法正常受精，這種自交不親和性受復(fù)等位基因控制。

授粉受精是胚形成的基礎(chǔ)，受精卵在胚囊內(nèi)發(fā)育成胚，受精的極核發(fā)育成胚乳。如黑色柯林斯、黑珍珠等葡萄品種胚囊內(nèi)的卵細(xì)胞與助細(xì)胞退化成其他細(xì)胞，極核與精子不融合且逐漸退化，無(wú)法產(chǎn)生種子[14]。無(wú)核白與火焰無(wú)核敗育機(jī)制相似，內(nèi)珠被、珠孔和胚囊組織形態(tài)上發(fā)生異常，影響了花粉管向胚珠內(nèi)的伸長(zhǎng)，導(dǎo)致受精率下降[15]。胚發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是由胚乳提供的，胚乳敗育會(huì)導(dǎo)致胚的敗育[16]。王飛等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在不同無(wú)核葡萄品種胚乳與胚的生長(zhǎng)發(fā)育中，胚乳敗育或退化是引起胚敗育的關(guān)鍵因素，胚乳敗育，細(xì)胞解體消失，隨后胚會(huì)生長(zhǎng)停止，發(fā)生敗育[18]。

種子敗育型葡萄品種是目前主要的無(wú)核葡萄育種材料，其胚敗育的生理生化研究主要集中在胚珠的營(yíng)養(yǎng)代謝物質(zhì)、保護(hù)酶活性、膜質(zhì)過(guò)氧化物質(zhì)、內(nèi)源激素及游離態(tài)多胺等方面。其中，激素是影響種子生長(zhǎng)發(fā)育的主要因素，葡萄授粉受精或結(jié)實(shí)后，其體內(nèi)的激素種類及含量的變化對(duì)核形成至關(guān)重要。大多數(shù)研究表明[5-9]，單一激素（主要是赤霉素）及各類激素協(xié)調(diào)是誘導(dǎo)葡萄無(wú)核果實(shí)形成的重要機(jī)理。種子形成的不同階段對(duì)激素種類及水平要求不一，不同階段應(yīng)用不同濃度或不同種類的激素，會(huì)影響果實(shí)及種子中激素水平，致使激素失衡，影響胚正常發(fā)育，最終形成無(wú)核果實(shí)。由于地區(qū)和品種不同，造成葡萄胚敗育過(guò)程中內(nèi)含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)動(dòng)態(tài)變化研究有差異，部分研究發(fā)現(xiàn)，可溶性糖與可溶性蛋白質(zhì)含量降低，可溶性淀粉含量變化不大[17-19]。也有研究發(fā)現(xiàn)，可溶性糖含量偏高、淀粉及可溶性蛋白質(zhì)含量偏低[20]。大部分研究認(rèn)為，無(wú)核葡萄胚敗育時(shí)，保護(hù)酶活性下降[17-19]，而董姝娟等[21]研究發(fā)現(xiàn)，金星無(wú)核的保護(hù)酶活性呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，說(shuō)明不同品種保護(hù)酶活性有差異。MDA是膜質(zhì)過(guò)氧化的最終分解產(chǎn)物，一定程度上反映植物膜脂過(guò)氧化水平。紀(jì)薇等[22]研究表明，胚敗育時(shí)，丙二醛含量呈上升趨勢(shì)。江淑平[23]和李桂榮[24]的研究均認(rèn)為，無(wú)核葡萄胚發(fā)育過(guò)程中激素間的平衡失調(diào)，對(duì)其后期胚敗育有一定的影響，表明胚胎發(fā)育與內(nèi)源激素的調(diào)控緊密相關(guān)。潘學(xué)軍等[25]研究認(rèn)為，胚胎發(fā)育過(guò)程中，多胺含量較低并急劇下降是胚敗育的重要原因。綜上可知，葡萄無(wú)核研究機(jī)制在生理學(xué)方面取得了一定的進(jìn)展，為進(jìn)一步研究奠定了理論基礎(chǔ)，但是由于技術(shù)局限，在微觀領(lǐng)域相關(guān)研究進(jìn)展緩慢。

2.2 分子生物學(xué)機(jī)制

葡萄無(wú)核現(xiàn)象已被廣泛關(guān)注，近年來(lái)研究方向主要集中在無(wú)核性狀遺傳與無(wú)核分子生物學(xué)方面。

2.2.1 無(wú)核性狀遺傳 為了了解無(wú)核性狀的遺傳規(guī)律，研究者們進(jìn)行了大量的研究，先后提出了多種假設(shè)（表3），各假說(shuō)在不同時(shí)空均能一定程度上解釋一些現(xiàn)象，但存在一定的局限性，不能從本質(zhì)上揭示葡萄無(wú)核性狀的遺傳規(guī)律，因此，其遺傳規(guī)律仍需繼續(xù)深入研究。

表3葡萄無(wú)核性狀的遺傳規(guī)律假說(shuō)

2.2.2 無(wú)核分子生物學(xué)研究 無(wú)核基因作為無(wú)核形成機(jī)制研究的關(guān)鍵部分，一直是研究熱點(diǎn)。有研究表明，葉綠體伴侶蛋白ch-Cpn21基因和鈣結(jié)合蛋白基因VvCBP1與種子發(fā)育相關(guān)[26-27]。MADS-box基因在植物花器官和果實(shí)發(fā)育過(guò)程中有重要的作用，D類MADS-box基因家族的VvAGL11基因在種子敗育過(guò)程中起非常重要的作用[28]。E類MADSbox基因家族成員VviSEP2在有核葡萄花、花蕾中以及胚珠發(fā)育各時(shí)期的相對(duì)表達(dá)水平均高于無(wú)核[29]。假單性結(jié)實(shí)葡萄胚珠敗育符合細(xì)胞程序性死亡現(xiàn)象，液泡加工酶（VPE）是啟動(dòng)和執(zhí)行細(xì)胞程序性死亡的關(guān)鍵因子，其中，β型VPE是種子特異表達(dá)和發(fā)育所必須的基因[30]，實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析VPE基因家族在有核、無(wú)核葡萄胚珠發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)βVPE在后期差別很大，表明其與無(wú)核葡萄胚珠敗育相關(guān)[3]。葡萄ABCG亞家族半分子成員參與植物體脂質(zhì)的運(yùn)輸和花粉壁的發(fā)育，在胚珠敗育關(guān)鍵時(shí)期，VvABCG20在黑比諾和無(wú)核白葡萄中的相對(duì)表達(dá)水平出現(xiàn)差異，VvABCG6、VvABCG11.1、VvABCG15.4和VvABCG11.8在無(wú)核品種中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于有核，可能與胚珠敗育相關(guān)[31]。細(xì)胞自噬是蛋白降解的重要途徑之一，參與植物生長(zhǎng)發(fā)育，Vv ATG基因在無(wú)核葡萄胚珠發(fā)育過(guò)程中表達(dá)水平較高，表明在無(wú)核葡萄中自噬相關(guān)活動(dòng)比較活躍，其可能與無(wú)核白胚珠敗育相關(guān)[32]。YABBY基因家族成員是種子植物特有的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，根據(jù)YABBY基因在有核無(wú)核品種中胚珠發(fā)育時(shí)期的表達(dá)分析來(lái)看，VvYABBY4在胚珠敗育的關(guān)鍵時(shí)期表達(dá)差異更為明顯，表明其在無(wú)核葡萄形成過(guò)程中有重要作用[33]。雄性不育品種是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)無(wú)核葡萄的重要途徑之一，不育品種鐘山紅中，VvMYB4在四分體時(shí)期表達(dá)量達(dá)到了頂峰，隨后在單核期迅速降低，到二核期和花粉成熟期表達(dá)量極低或基本不表達(dá)，由此推測(cè)該基因異常表達(dá)與苯丙氨酸代謝途徑中的關(guān)鍵酶C4H抑制有關(guān)[13]。

近年，植物基因組、轉(zhuǎn)錄組、代謝組及表型組技術(shù)發(fā)展迅速，應(yīng)用廣泛。NWAFOR等[34]在發(fā)育關(guān)鍵時(shí)期對(duì)有核葡萄及其芽變品種進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組高通量測(cè)序，獲得了與無(wú)核葡萄敗育相關(guān)的編碼PISTILLATA蛋白和MADS-box轉(zhuǎn)錄因子。與有核品種相比，無(wú)核品種胚珠中VvMADS28轉(zhuǎn)錄水平低，VvMADS39的轉(zhuǎn)錄水平高，在番茄上進(jìn)行異源表達(dá)后，前者使番茄種子變小，后者使其種子敗育，表明二者與種子發(fā)育有關(guān)[35]。ZHANG等[36]借助SLAF-seq技術(shù)和全基因組關(guān)聯(lián)作圖研究了葡萄無(wú)核性狀遺傳機(jī)理，發(fā)現(xiàn)了與無(wú)核性狀顯著相關(guān)的294個(gè)SNP位點(diǎn)。CAROLINA等[37]通過(guò)基因組精準(zhǔn)測(cè)序后發(fā)現(xiàn)，無(wú)核葡萄中VviAGL11的氨基酸第197的位置由精氨酸變成了亮氨酸，推測(cè)無(wú)核的產(chǎn)生是由VviAGL11編碼的氨基酸替換引起的。綜合可知，葡萄無(wú)核研究主要集中在生理和分子生物學(xué)研究2個(gè)方面，二者相互聯(lián)系，如GA主要通過(guò)抑制VvSRL1的表達(dá)來(lái)上調(diào)VvmiR159c的表達(dá)水平，VvmiR159c對(duì)GA的應(yīng)答可能通過(guò)VvGAMYB的裂解，進(jìn)一步誘導(dǎo)葡萄單性結(jié)實(shí)，最終形成無(wú)核果實(shí)的調(diào)控機(jī)制（圖1）。

3 技術(shù)應(yīng)用

3.1 葡萄無(wú)核化調(diào)控

胚胎敗育是無(wú)核葡萄形成的重要途徑之一，胚生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)激素較為敏感，因此，生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的使用成為獲得無(wú)核果實(shí)的重要技術(shù)手段。有核葡萄經(jīng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理后，致使花器受精不完全，造成敗育，不能形成種子，獲得無(wú)核葡萄。目前使用的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑主要有赤霉素（GA3）、吡效?。–PPU）、6-芐基氨基嘌呤（6-BA）等，其中赤霉素應(yīng)用最早，也最廣泛。有核葡萄花期前后用赤霉素等藥劑處理花序，部分胚珠在授粉受精后開(kāi)始敗育，出現(xiàn)異常的胚乳核、卵細(xì)胞，并且胚囊結(jié)構(gòu)降解[38]。GA3是目前無(wú)核化普遍使用的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，眾多研究認(rèn)為，其可以阻礙胚（胚囊和胚珠）和花粉正常發(fā)育，導(dǎo)致胚囊、花粉發(fā)育異常，致使授粉受精不良，形成無(wú)核果實(shí)，其機(jī)理研究基本趨于成熟[39]。目前，生產(chǎn)上已成功利用GA3誘導(dǎo)多個(gè)有核品種無(wú)核化。陽(yáng)光玫瑰葡萄是目前研究較熱的有核優(yōu)良品種，王莎等[7]對(duì)其研究發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)使用GA3處理效果不佳，易造成穗軸卷曲、硬?；虬l(fā)生藥害等，需要與其他生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑搭配使用，要注意搭配種類、使用時(shí)期、使用濃度及次數(shù)，避免造成藥害。對(duì)外源GA3處理前后的葡萄進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序發(fā)現(xiàn)，影響葡萄無(wú)核的除了赤霉素外，還包括生長(zhǎng)素以及其他激素間的交互作用[40]。在無(wú)核果實(shí)形成過(guò)程中，VvIAA9和VvARF7的相對(duì)表達(dá)量下調(diào)，VvDELLA、VvGH3.2和VvGH3.3相對(duì)表達(dá)量上調(diào)[41]。GA-DELLA（SLR1）-VvmiR159c-VvGAMYB在葡萄中是1個(gè)很關(guān)鍵的信號(hào)調(diào)控模型，該模型在外源赤霉素誘導(dǎo)葡萄單性結(jié)實(shí)機(jī)理方面有重要的調(diào)節(jié)作用[42]。GA處理后在開(kāi)花后第四周，VvLEC1表達(dá)水平明顯上調(diào)，說(shuō)明VvLEC1在種子發(fā)育中起重要作用[43]。由此可知，無(wú)核調(diào)控取得了一定的成效，但也存在一定的局限性，研究面較為狹窄，生長(zhǎng)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)尚不明晰，還需深入研究。

3.2 葡萄無(wú)核品種培育

無(wú)核品種培育一般采用雜交和芽變等育種方法，但周期長(zhǎng)、效率低，耗時(shí)耗力。胚挽救技術(shù)有效縮短了育種年限，也拓寬了葡萄無(wú)核品種育種的范圍和效率，是當(dāng)前無(wú)核育種的重要技術(shù)方法。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，分子生物學(xué)技術(shù)也廣泛應(yīng)用于葡萄無(wú)核品種培育中，進(jìn)一步加速了品種選育進(jìn)程。

胚挽救技術(shù)由RAMMING等于1982年創(chuàng)立，是一項(xiàng)應(yīng)用植物組培技術(shù)對(duì)單性結(jié)實(shí)（假單性結(jié)實(shí)）或種子發(fā)育異常的受精胚或胚珠，在胚未敗育前對(duì)其進(jìn)行挽救創(chuàng)造新種質(zhì)[44]。目前，國(guó)外通過(guò)此項(xiàng)技術(shù)已獲得眾多無(wú)核品種，如克瑞森無(wú)核、紅寶石無(wú)核、火焰無(wú)核和白雞心等[4]。我國(guó)葡萄胚挽救技術(shù)應(yīng)用始于20世紀(jì)90年代，以西北農(nóng)林科技大學(xué)為首的一批科研單位先后建立了雜交組合及自交的胚挽救技術(shù)體系和結(jié)合倍性育種的胚挽救技術(shù)體系，為我國(guó)無(wú)核葡萄品種選育開(kāi)拓了新渠道，自主培育出秦紅無(wú)核、秦翠無(wú)核、秦紅一號(hào)、無(wú)核早紅、滬培1號(hào)、滬培2號(hào)等無(wú)核品種[6]，一定程度上促進(jìn)了我國(guó)無(wú)核葡萄的選育進(jìn)程。

分子標(biāo)記可以直接對(duì)基因型進(jìn)行選擇，加快了篩選速度，明顯提高了育種效率。目前常用的有SCAR標(biāo)記、RAPD標(biāo)記、SSR標(biāo)記等。國(guó)外無(wú)核分子標(biāo)記的研究方面，LAHOGUE等[45]通過(guò)以無(wú)核葡萄胚挽救群體為材料，獲得了2個(gè)與無(wú)核主效基因I緊密連鎖的RAPD標(biāo)記。MEJIA[46]也發(fā)現(xiàn)了1個(gè)SCAR分子標(biāo)記SCF27。MEJIA等[47]找到了1個(gè)新的與葡萄無(wú)核性狀連鎖的SSR標(biāo)記VvAGLII。國(guó)內(nèi)方面，王躍進(jìn)等[48]開(kāi)發(fā)了1個(gè)約590 bp的SCAR標(biāo)記。后續(xù)人們又繼續(xù)開(kāi)發(fā)了GSLP1569、39970524-5-564、39970524-6-1538和39970524-6-12004等特異性標(biāo)記[49]。季晨飛等[50]結(jié)合SSR技術(shù)對(duì)葡萄雄性不育基因進(jìn)行定位研究和生物信息學(xué)分析，初步定位了葡萄雄性不育基因VvMs1。AKKURT等[51]利用葡萄有核品種與無(wú)核品種雜交，應(yīng)用無(wú)核基因VMC7f2、SSC8和SCF27對(duì)F1進(jìn)行分子標(biāo)記早期選育，選出13株與標(biāo)記相關(guān)的無(wú)核候選植株。無(wú)核分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)，很大程度上加速了無(wú)核葡萄新種質(zhì)的選育，提高了無(wú)核育種的效率。

4 展望

通過(guò)歸納總結(jié)前人對(duì)葡萄無(wú)核形成與調(diào)控的機(jī)制研究，理清了無(wú)核性狀研究進(jìn)展，弄清了無(wú)核果實(shí)的來(lái)源及類型，但是對(duì)于葡萄無(wú)核形成機(jī)制尚不明確，以至于無(wú)核調(diào)控存在一定的局限性。主要集中在無(wú)核形成原因復(fù)雜多樣，調(diào)控網(wǎng)絡(luò)尚未完全掌握，關(guān)鍵調(diào)控基因及通路尚不明晰；果實(shí)無(wú)核調(diào)控技術(shù)雖然成熟，但是缺乏穩(wěn)定性及高效性，且方法單一，綜合調(diào)控技術(shù)缺乏，導(dǎo)致效率低、質(zhì)量差。因此，從分子層面揭示生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑調(diào)控的無(wú)核化是未來(lái)研究葡萄無(wú)核機(jī)制的重要方向，也是培育無(wú)核葡萄品種的重要手段之一。今后應(yīng)結(jié)合多種手段深入研究，利用系統(tǒng)生物學(xué)和功能基因組學(xué)，更系統(tǒng)深入的探索葡萄無(wú)核性狀的形成機(jī)制與種質(zhì)創(chuàng)制，為無(wú)核機(jī)制的探究以及無(wú)核技術(shù)的開(kāi)發(fā)提供幫助，最終促進(jìn)我國(guó)葡萄無(wú)核產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。