范公明 羅俊

東至縣市場監(jiān)督檢驗(yàn)所 安徽池州 247200

竹筷是以原竹為材料，經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理和后處理，加工而成的食品相關(guān)的產(chǎn)品[1]。近年來，隨著食品餐飲行業(yè)的快速發(fā)展，一次性竹筷已經(jīng)成為一種不可或缺的餐飲工具[2]。噻苯咪唑、鄰苯基苯酚、聯(lián)苯、抑霉唑化學(xué)防腐劑廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)企業(yè)，超標(biāo)、超范圍使用添加劑造成食品安全風(fēng)險(xiǎn)[3]。

1 儀器試劑

儀器：201 紫外可見分光光度計(jì)（熱電）；AUW220D 電子天平（島津）；P230II 高效液相色譜儀（依利特）；JK-200DVB 超聲波清洗儀（合肥金尼克）；WH-2 渦旋混勻器（上海滬析）；TGL-20M 高速冷凍離心機(jī)（湖北湘儀）；Mili-Q Direct8 超純水儀（默克密理博）。試劑：甲醇 色譜級（國藥）；噻苯咪唑標(biāo)準(zhǔn)品，鄰苯基苯酚標(biāo)準(zhǔn)品，抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)品，聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)品（Dr.Ehrenstorfer德國）；超純水自制。

2 色譜條件

色譜柱SinoChorm ODS-BP（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇-水（體積比80：20）；流速為0.7ml/min；紫外檢測器波長228nm；進(jìn)樣量20μl；柱溫40℃。

3 前處理

3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取10mg 噻苯咪唑、鄰苯基苯酚、抑霉唑、聯(lián)苯于100ml 的容量瓶中，配制成100μg/ml 標(biāo)準(zhǔn)儲備液，分別準(zhǔn)確移取1ml，2ml，3ml，4ml，5ml 于10ml 的容量瓶中，配制成濃度為10μg/ml，20μg/ml，30μg/ml，40μg/ml，50μg/ml 工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3.2 樣品前處理

用剪刀將一次性竹筷分割成長度約1mm 竹筷，準(zhǔn)確稱取1g試樣于50mL 具塞離心管中，準(zhǔn)確加人甲醇5.0ml，具塞混勻，超聲30min 后，用旋渦混勻器上混勻3min，于8000r/min 離心15min，取上清液0.45μm 微孔濾膜過濾，待測。

4 結(jié)果討論

4.1 波長的選擇

分別配制濃度為10μg/ml 的抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液、噻苯咪唑標(biāo)準(zhǔn)溶液、鄰苯基苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液、聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)溶液，紫外分光光度計(jì)依次掃描上述溶液，得到抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液最大吸收波長為228.36nm、噻苯咪唑標(biāo)準(zhǔn)溶液最大吸收波長為242.03nm、鄰苯基苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液最大吸收波長為245.28nm、聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)溶液最大吸收波長為247.25nm。結(jié)果表明：相同濃度溶液抑霉唑溶液最大吸收波長處吸光度最低。為兼顧各組分檢出限選擇檢測波長228nm。各組分最大吸收波長詳見圖1。

4.2 流動(dòng)相的選擇及優(yōu)化

采用甲醇與水溶液、甲醇與磷酸氫二鈉緩沖鹽溶液、甲醇、乙腈與離子對試劑十二烷基苯磺酸鈉溶液作流動(dòng)相檢測上述四種組分，均能得到很好的分離度和峰形。綜合考慮，乙腈的毒性大于甲醇，離子對試劑十二烷基苯磺酸鈉為一種表面活性劑對色譜柱壽命影響較大，色譜平衡時(shí)間較長，切采用離子對試劑或緩沖鹽試劑作為流動(dòng)相配制過程相對繁瑣，因此選擇經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、操作方便的甲醇與水溶液作為流動(dòng)相。以0.7ml/min 流速，分別采用甲醇：水=90：10、甲醇：水=80：20、甲醇：水=70：30 為流動(dòng)相檢測上述樣品，結(jié)果表明：甲醇：水=80：20 分離度和峰形最好，分析時(shí)間較短。標(biāo)準(zhǔn)樣品圖譜詳見圖2。

4.3 方法線性和檢出限

按照3.1 所述配制濃度為10μg/ml，20μg/ml，30μg/ml，40μg/ml，50μg/ml 工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照2 中所述色譜條件，各濃度溶液進(jìn)樣3 次。以溶液中各個(gè)組分3 次峰面積平均值作為橫坐標(biāo)，以各個(gè)組分對應(yīng)濃度為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。按照3 倍的信噪比計(jì)算檢出限，結(jié)果見表1。

圖1 抑霉唑、鄰苯基苯酚、聯(lián)苯、噻苯咪唑紫外掃描譜圖

圖2 抑霉唑、鄰苯基苯酚、聯(lián)苯、噻苯咪唑液相色譜圖

表1 各組分標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限

5 結(jié)語

本文建立了一種同時(shí)測定一次性竹筷中的噻苯咪唑、鄰苯基苯酚、抑霉唑、聯(lián)苯的高效液相色譜測定方法。通過優(yōu)化色譜條件以及線性、精密度、準(zhǔn)確度、檢出限實(shí)驗(yàn)表明：該方法具有操作方便、準(zhǔn)確、高效的優(yōu)點(diǎn)，能夠滿足檢驗(yàn)需求。