陳 維，鄭宗華，孫福軍，楊 文，李開斌▲

(1安順市食品藥品檢驗(yàn)所，貴州 安順 561000；2安順市中醫(yī)院，貴州 安順 561000)

冰球子是中國(guó)藥典收載品種山慈菇后兩種即獨(dú)蒜蘭Pleionebulbocodioides(Franch.)Rolfe 和云南獨(dú)蒜蘭PleioneyunnanensisRolfe 習(xí)稱，其味甘、微辛、性涼，歸肝、脾經(jīng)，具有清熱解毒、化痰散結(jié)的功效，主要用于癰腫疔毒、瘰疬，蛇蟲咬傷等癥[1]。近年來(lái)，隨著研究深入，冰球子具有多方面抗腫瘤作用[2-3]。冰球子化學(xué)成分與藥理作用研究逐漸越來(lái)越深入，但對(duì)其所含有的微量元素尚未有研究；隨著野生冰球子蘊(yùn)藏量不斷減少，種植品將成為冰球子藥材的主要來(lái)源。貴州對(duì)冰球子的應(yīng)用有較久遠(yuǎn)的歷史，現(xiàn)已有兩家較大規(guī)模的藥廠在生產(chǎn)艾愈膠囊，艾愈膠囊以冰球子為主藥，所以對(duì)我省規(guī)模種植產(chǎn)地冰球子的研究分析就凸顯必要；ICP-MS常用于微量元素成分分析，靈敏度高、檢出限低、線性范圍寬、分析速度快，是目前常用的方法[4]。因此，本文采用硝酸處理樣品，經(jīng)微波消解定容后注入ICP-MS中，對(duì)冰球子中所含微量元素進(jìn)行檢測(cè)，為藥材質(zhì)量和產(chǎn)地種植安全提供依據(jù)。

1 儀器與材料

NexION2000電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(PerkinElmer)，ETHOS UP微波消解儀(北京萊伯泰科儀器股份有限公司)，千分之一電子分析天平(AY-120，島津公司)。娃哈哈純凈水(貴陽(yáng)娃哈哈飲料有限公司)，硝酸(優(yōu)級(jí)純，太倉(cāng)滬試試劑有限公司)，15種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(CL3-19MKBY1，PerkinElmer)。

實(shí)驗(yàn)所用藥材經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)植物栽培教研室魏升華教授鑒定蘭科植物獨(dú)蒜蘭(Pleionebulbocodioides(Franch.)Rolfe)和云南獨(dú)蒜蘭(PleioneyunnanensisRolfe)，均為黔東南州臺(tái)江縣臺(tái)拱鎮(zhèn)種植基地提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品前處理

稱取干燥樣品0.3 g，精密稱定，置于微波消解儀消解罐中，加入10 mL硝酸，放置過(guò)夜，按微波消解儀給定程序進(jìn)行消解，消解完畢后趕酸濃縮至1～2 mL，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，并用娃哈哈純凈水定容，作為供試品，待測(cè)。

2.2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

精密量取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用1%的硝酸分別稀釋至每1 mL含0 ng、10 ng、20 ng、40 ng、80 ng、100 ng、200 ng的溶液，置于冰箱冷藏保存。

2.3 ICP-MS儀工作參數(shù)

見表1。

表1 ICP-MS儀具體工作參數(shù)

2.4 方法學(xué)驗(yàn)證

2.4.1 線性關(guān)系及檢出限

在儀器選定工作參數(shù)下對(duì)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，以溶液濃度為橫坐標(biāo)(X)，被測(cè)元素CPS值為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸。除不加樣品外，其他操作同“2.1樣品前處理”，制備空白溶液，連續(xù)測(cè)定11次，以其響應(yīng)值3倍的標(biāo)準(zhǔn)偏差除以相應(yīng)元素標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率作為不同元素的檢出限[5]。得到各元素的回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限，結(jié)果見表2。

表2 15種元素的回歸方程及相關(guān)系數(shù)測(cè)定結(jié)果

2.4.2 精密度實(shí)驗(yàn)

取配置的混合標(biāo)準(zhǔn)品(20 ng/mL)，在選定測(cè)試條件下平行測(cè)定6次，測(cè)得各元素含量，并分別計(jì)算各元素相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，結(jié)果見表2，RSD值均小于4%，儀器精密度良好，符合實(shí)驗(yàn)要求。

2.4.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

選擇獨(dú)蒜蘭(201903011)號(hào)樣品按“2.1樣品前處理”方法操作，平行6份，測(cè)得各元素含量，并分別計(jì)算各元素相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，結(jié)果見表2，重復(fù)性RSD值均小于7.5%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.4.4 樣品加樣回收率試驗(yàn)

精密稱定供試品6份，每份取樣量約0.1 g，精密稱定，分別加混合對(duì)照品溶液，參照“2.1”項(xiàng)下的供試品溶液的制備方法將樣品溶液進(jìn)行檢測(cè)并計(jì)算其回收率在81.37%～114.61%，見表3，說(shuō)明其方法準(zhǔn)確度高，滿足分析實(shí)驗(yàn)要求。

表3 3批冰球子中微量元素含量分布結(jié)果及回收率

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)微波消解對(duì)樣品進(jìn)行前處理，并用ICP-MS法測(cè)定冰球子中Be、Ti、V、Cr、Mn、Co、Ni、Cu、Zn、As、Ag、Cd、Sn、Sb、Ba等15種微量元素的組成及含量，消解完全，結(jié)果可靠，各元素線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.995；重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)<7.5%；精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)<4%；回收率為81.37%～114.61%。該方法準(zhǔn)確性好，靈敏度高，能夠同時(shí)測(cè)定多種元素的含量，可用于冰球子中微量元素的檢測(cè)。由表3可以看出，冰球子中Mn、Ba、Zn、Ti、Cu的含量較高，其他元素的含量均低于1 mg/kg；對(duì)人體危害較大的Cd、As、Cu銅的含量均處于低于《中國(guó)藥典》(2015年版)中規(guī)定電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定重金屬的含量：Cd≤0.3 mg/kg，As≤2.0 mg/kg，Cu≤20.0 mg/kg；但是各批次的冰球子中Mn和Ba含量較高，分析其原因是與冰球子種植環(huán)境為仿野生種植環(huán)境有關(guān)，還是與植物本身的選擇吸收有關(guān)，仍需進(jìn)一步研究。