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        黑果枸杞和寧夏枸杞多糖含量比較研究

        2020-08-08 12:29:22李兆君丁潤(rùn)梅
        石油化工應(yīng)用 2020年7期
        關(guān)鍵詞:黑果定容苯酚

        李兆君,丁潤(rùn)梅

        (寧夏醫(yī)科大學(xué),寧夏銀川 750004)

        多糖是由單糖組成的天然高分子化合物,具有廣泛的生物活性,能調(diào)節(jié)人體免疫力、抗腫瘤、延緩衰老等作用。枸杞多糖是枸杞中重要的組成物質(zhì),是一種水溶性物質(zhì)。黑果枸杞和寧夏枸杞在植物學(xué)分類上都屬于茄科,只是兩個(gè)不同的枸杞品種,本文對(duì)兩種物質(zhì)枸杞多糖含量的測(cè)定與分析比較,了解和全面認(rèn)識(shí)黑果枸杞這一珍貴的植物資源奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

        多糖含量的測(cè)定最常見(jiàn)的方法是苯酚-硫酸法,以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照。苯酚-硫酸紫外分光光度法[1,2]測(cè)定多糖的方法是利用枸杞多糖在濃硫酸的作用下水解成單糖,脫水生成糠醛衍生物,該衍生物和苯酚能夠生成有色化合物,用紫外分光光度法測(cè)定其含量,實(shí)驗(yàn)前用乙醇洗滌去除單糖,以丙酮-石油醚脫色,避免對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生干擾,此方法簡(jiǎn)單,易行。

        1 材料與儀器

        1.1 材料

        寧夏枸杞(中寧東華鄉(xiāng)產(chǎn));黑果枸杞(寧夏中寧種植);D-葡萄糖(AR,科密歐試劑);濃硫酸;苯酚(AR,煙臺(tái)雙雙化工有限公司產(chǎn));無(wú)水乙醇(AR,北聯(lián)試劑);甲醛(天津市盛奧化學(xué)試劑有限公司)、丙酮、石油醚。

        1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備、儀器

        紫外分光光度計(jì)(UV-1600,上海美譜達(dá)儀器有限公司);KDM 型調(diào)溫電熱套(250 mL);粉碎機(jī);80 目篩子;電子分析天平;瑞爾回流提取裝置;國(guó)華超級(jí)恒溫水浴箱。

        2 實(shí)驗(yàn)方法

        2.1 黑果枸杞多糖和寧夏枸杞多糖的提取

        黑果枸杞和寧夏枸杞分別烘干,粉碎,過(guò)80 目篩,稱取粉末10 g 加水100 mL 在100 ℃水浴中提取3次,每次提取時(shí)間為2.0 h、1.5 h、1 h,3 次300 mL,過(guò)濾合并3 次濾液,靜止12 h 后提取其上清液,用80 %乙醇減壓濃縮浸泡,冰箱中靜置24 h(5 ℃),過(guò)濾得沉淀,索氏提取,以95 %乙醇、無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚洗滌沉淀,得粗多糖粉末[3,4]。

        2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

        葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:準(zhǔn)確稱取干燥恒重的葡萄糖0.100 3 g,定容在100 mL 容量瓶中,得1 mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。用吸量管取10.00 mL,定容在100 mL容量瓶中,稀釋至100 μg/mL 葡萄糖測(cè)量液待用。

        圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

        苯酚溶液配制:稱取90 g 苯酚,定容在100 mL 容量瓶中。取5.00 mL,定容在50 mL 容量瓶中,稀釋至9 %,現(xiàn)配現(xiàn)用。

        取8 支試管,標(biāo)示管號(hào)1~8,分別加100 μg/mL 葡萄糖測(cè)量液0.00 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL,冰水浴分別加入9 %苯酚液0.50 mL,振蕩搖勻后緩慢加入濃硫酸3.00 mL,溫度不宜高,以微放熱為適宜,放置約30 min 后以0 號(hào)試管作空白參照,在490 nm 處測(cè)定吸光度值,繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖(見(jiàn)圖1)。

        2.3 多糖含量的測(cè)定

        準(zhǔn)確稱取干燥后所得的黑果枸杞和寧夏枸杞多糖粉末50.0 mg,放置在50.00 mL 容量瓶中,加蒸餾水溶解,定容。分別用吸量管吸取5.00 mL 于50.00 mL 容量瓶中,定容至刻度線,再用吸量管吸取1.00 mL 稀釋液于10.00 mL 容量瓶中,分別加入9 %苯酚液0.50 mL,振蕩搖勻后緩慢加入濃硫酸3.00 mL,放入水浴箱,沸水浴中反應(yīng)15 min 后立刻放置在0 ℃中進(jìn)行冷卻,冷卻后在490 nm 處測(cè)得吸光度值[5]。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

        以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),測(cè)得的吸光度值為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,回歸線方程為:

        3.2 黑果枸杞和寧夏枸杞多糖含量

        根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)得的吸光度值,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出黑果枸杞和寧夏枸杞樣品中葡萄糖的含量[6],黑果枸杞和寧夏枸杞中多糖含量以葡萄糖的相對(duì)量表示(見(jiàn)表1、表2)。

        4 討論與結(jié)論

        本文對(duì)黑果枸杞和寧夏枸杞中多糖含量進(jìn)行了測(cè)定,從結(jié)果可以看出,寧夏枸杞多糖含量為9.26 %,與文獻(xiàn)報(bào)道中報(bào)道基本相符,黑果枸杞中多糖含量為6.28 %。寧夏枸杞多糖含量高于黑果枸杞,本論文實(shí)驗(yàn)結(jié)果給黑果枸杞的使用提供參考依據(jù)。

        表1 黑果枸杞多糖含量與吸光度關(guān)系

        表2 寧夏枸杞多糖含量與吸光度關(guān)系

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