李寧 劉毅 杜雪芹 魏立民

2型糖尿病(T2DM)是一種長(zhǎng)期代謝紊亂的內(nèi)分泌疾病，其特征為高血糖、胰島素抵抗和胰島素相對(duì)缺乏[1-2]。研究顯示，腸促胰島素在T2DM中起關(guān)鍵作用且具有改變疾病進(jìn)展的潛力[3]，包括胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)、葡萄糖依賴性促胰島素多肽或抑胃肽(GIP)及膽囊收縮素(CCK)等，其功能障礙是T2DM的早期特征。CCK是一類具有多種分子形式和多種生物學(xué)活性的腦腸肽，有研究顯示其在導(dǎo)致T2DM代謝紊亂中起一定作用[4]。生長(zhǎng)激素釋放肽(ghrelin)是一種來(lái)自胃的肽類激素，具有生長(zhǎng)激素釋放活性，能在實(shí)驗(yàn)條件下改變葡萄糖和胰島素代謝、血壓水平、脂肪生成和炎癥等過(guò)程[5]。本研究所涉及的CCK與ghrelin均屬于能夠影響葡萄糖和胰島素代謝過(guò)程的激素，但目前其分泌規(guī)律尚未清楚。本文旨在比較T2DM患者和正常受試者在口服葡萄糖后不同時(shí)間點(diǎn)血清CCK及ghrelin水平的差異，分析兩種激素的分泌規(guī)律及與胰島素和C肽之間的關(guān)系。

對(duì)象與方法

1.對(duì)象：納入2014年3月～11月于河北省人民醫(yī)院內(nèi)分泌科門診就診及住院的T2DM患者82例作為T2DM組。所有患者均符合WHO 1999年T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)1型糖尿病、妊娠糖尿病及其他特殊類型糖尿病患者；(2)妊娠期或哺乳期患者；(3)合并非糖尿病性慢性腎病、感染及結(jié)石等泌尿系統(tǒng)疾病的患者；(4)合并糖尿病急性并發(fā)癥的患者；(5)合并重度感染的患者；(6)嚴(yán)重心、肝功能損害等患者。納入同期于河北省人民醫(yī)院體檢的健康體檢者34例作為對(duì)照組。本研究經(jīng)過(guò)河北省人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)，所有受試者均知情同意。

2.方法：收集所有受試者一般臨床資料(性別、年齡、身高、體重及糖尿病病史)，計(jì)算BMI。所有受試者禁食8 h，口服降糖藥物者于試驗(yàn)前48 h停藥，空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血4 ml，將75g無(wú)水葡萄糖溶于250 ml清水中，在5min內(nèi)飲完。從飲第一口開始計(jì)時(shí)，分別在30、60、120和180 min采集靜脈血，以測(cè)定血糖、胰島素、C肽、CCK及ghrelin水平。采血過(guò)程中所有受試者均禁食、禁水，不進(jìn)行劇烈運(yùn)動(dòng)。采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖濃度，采用高壓液相色譜法檢測(cè)糖化血紅蛋白(HbA1c)濃度，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)胰島素、C肽水平，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測(cè)試劑盒(武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司)按其說(shuō)明書檢測(cè)血清CCK及ghrelin水平。

結(jié)果

1.兩組受試者一般臨床資料比較：T2DM組患者HbA1c水平較對(duì)照組明顯升高(P<0.05)，兩組間其余指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組受試者一般臨床資料比較

2.兩組受試者不同時(shí)間點(diǎn)血糖、胰島素和C肽水平比較：T2DM組患者服糖后0、30、60、120和180 min血糖水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。T2DM組患者服糖后30、60和120 min胰島素和C肽水平均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2、3。

表2 兩組受試者不同時(shí)間點(diǎn)血糖和胰島素水平比較

表3 兩組受試者不同時(shí)間點(diǎn)C肽水平比較

3.兩組受試者不同時(shí)間點(diǎn)CCK及ghrelin比較：服糖后，對(duì)照組和T2DM組受試者的血清CCK水平均逐漸升高，而血清ghrelin水平逐漸降低。T2DM組患者服糖后60 min和120 min CCK水平均低于對(duì)照組，T2DM組患者空腹、服糖后30、60和120min ghrelin水平均低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 兩組受試者不同時(shí)間點(diǎn)CCK及ghrelin比較

4.T2DM患者空腹血清CCK、ghrelin與其他因素的相關(guān)性分析結(jié)果：Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，T2DM患者血清ghrelin水平與BMI呈負(fù)相關(guān)(r=-0.282，P=0.047)，其他指標(biāo)間均無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表5。

表5 T2DM患者空腹血清CCK、ghrelin與其他因素的相關(guān)性分析結(jié)果

討論

目前CCK在糖尿病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用機(jī)制尚未清楚，但可以明確的是CCK具有刺激胰腺細(xì)胞分泌胰島素的作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，CCK可促進(jìn)大鼠分泌胰島素，而且對(duì)其在體及離體的胰島細(xì)胞分泌胰島素均有明顯刺激作用[6]。有關(guān)研究結(jié)果顯示，給予高脂血糖大鼠注射CCK類似物，可顯著降低其體重及增加胰島素分泌[7-8]，提示CCK在減輕肥胖和改善胰島

素抵抗方面具有潛力，此外，CCK同時(shí)具有保護(hù)胰島β細(xì)胞不受凋亡影響的作用。一些研究已經(jīng)證明了CCK與腸促胰島素激素GIP和GLP-1在代謝與相關(guān)治療過(guò)程中存在著互補(bǔ)的生物學(xué)作用，進(jìn)一步提出穩(wěn)定的CCK衍生物有望成為肥胖癥和T2DM患者獨(dú)立減重降糖藥物[9]。Rehfeld等[10]研究表明無(wú)論是在1型還是2型糖尿病患者中，空腹血清CCK的分泌水平均正常，這與本研究結(jié)果相似。

ghrelin可自由通過(guò)血腦屏障，通過(guò)與其受體結(jié)合發(fā)揮類似胃動(dòng)素的加速胃排空作用，ghrelin是唯一可以在外周刺激食欲的激素，在禁食時(shí)分泌增加，而進(jìn)餐后下降。低水平ghrelin可作為預(yù)測(cè)肥胖和T2DM的一項(xiàng)危險(xiǎn)因子[11]。有研究發(fā)現(xiàn)，在T2DM形成過(guò)程中，會(huì)出現(xiàn)機(jī)體能量的正平衡狀態(tài)，為了調(diào)節(jié)機(jī)體的能量平衡，胃組織中g(shù)hrelin的含量及其免疫陽(yáng)性細(xì)胞、血漿濃度均明顯減少，以降低食欲、減少攝食和阻止體重增加[12]。研究報(bào)道妊娠期和產(chǎn)后的空腹血糖及產(chǎn)后ghrelin水平是既往妊娠期糖尿病患者發(fā)生T2DM的重要危險(xiǎn)因素[13]。楊新玲等[14]通過(guò)觀察T2DM大鼠模型建立過(guò)程中g(shù)hrelin和下丘腦神經(jīng)肽Y的變化，發(fā)現(xiàn)在此過(guò)程中大鼠血清和胃組織的ghrelin水平明顯降低，神經(jīng)肽Y mRNA表達(dá)明顯增加，證實(shí)ghrelin可能通過(guò)刺激下丘腦神經(jīng)肽Y的合成和分泌，共同參與T2DM的發(fā)生。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，T2DM患者的血清ghrelin水平較對(duì)照組明顯減低，與既往研究結(jié)果一致[15]，提示ghrelin分泌的變化可能在糖尿病的發(fā)生中起重要作用。

本研究結(jié)果顯示T2DM組及對(duì)照組受試者CCK水平在服糖后有升高趨勢(shì)。T2DM組患者血清CCK水平在服糖后60 min和120 min時(shí)明顯低于對(duì)照組。在服糖后180 min達(dá)到峰值，而對(duì)照組在120 min時(shí)達(dá)到峰值，T2DM組中CCK達(dá)峰時(shí)間明顯推遲，其中的具體機(jī)制尚未明確。無(wú)論是在T2DM組還是對(duì)照組，服糖后血清ghrelin均表現(xiàn)出下降趨勢(shì)。值得關(guān)注的是，T2DM組患者血清ghrelin水平在空腹及服糖后均明顯低于對(duì)照組，可能與前面討論的ghrelin在T2DM形成中所起的作用有一定相關(guān)性。

本研究并未發(fā)現(xiàn)T2DM患者血清CCK與血糖、胰島素等明顯相關(guān)，而血清ghrelin水平與BMI呈負(fù)相關(guān)，與既往研究報(bào)道類似[16]。廖麗萍等[17]關(guān)于ghrelin與胰島素抵抗關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，肥胖大鼠的空腹血清ghrelin水平較對(duì)照組下降，同時(shí)發(fā)現(xiàn)空腹ghrelin水平與BMI呈負(fù)相關(guān)，而餐后2 h血清ghrelin水平與餐后2 h胰島素、血糖等無(wú)明顯相關(guān)性，與本研究結(jié)果類似。Papandreou等[18]研究正常和肥胖受試者中g(shù)hrelin水平與肥胖、胰島素抵抗和葡萄糖的關(guān)系時(shí)，發(fā)現(xiàn)空腹血漿ghrelin水平與BMI呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.77，P<0.001)，與本研究結(jié)果一致。以上結(jié)果均提示BMI是糖尿病患者ghrelin水平的可靠預(yù)測(cè)因子。

綜上所述，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)T2DM患者口服葡萄糖刺激CCK及ghrelin分泌較正常人群減少，T2DM患者口服葡萄糖后CCK分泌高峰較正常人群明顯遲緩，空腹血清ghrelin水平與BMI呈負(fù)相關(guān)。本研究也存在一定局限性，如樣本量較小，研究過(guò)程中未考慮受試者正在接受的治療方案對(duì)研究結(jié)果的影響等，將來(lái)有待進(jìn)一步研究深入探討。