張 穎，吉向軍，李淑霞，葛淑芝，李華君

糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy, DR)是一種常見的糖尿病微血管并發(fā)癥，發(fā)病率在多種糖尿病微血管病變中占較大比重[1]，嚴(yán)重者甚至?xí)?dǎo)致失明[2]。根據(jù)病變表現(xiàn)DR又被分為增生性與非增生性，判斷標(biāo)準(zhǔn)為是否出現(xiàn)新生血管[3]。關(guān)于DR的發(fā)病機(jī)制，目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)定論[4]，但有研究發(fā)現(xiàn)，DR的發(fā)病與炎癥因子及脂肪代謝紊亂有密切關(guān)系[5]。增生性DR患者血清及玻璃體中白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)表達(dá)水平明顯高于健康人群[6]。趨化因子樣受體-1(CMKLR-1)是趨化素(Chemerin)的內(nèi)源性配體[7]，當(dāng)其與配體結(jié)合后將促進(jìn)細(xì)胞中鈣離子釋放，進(jìn)而調(diào)控核因子-κB(NF-κB)及細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1等信號(hào)傳導(dǎo)通路，在心血管疾病、代謝性疾病及炎癥性疾病等多種疾病的發(fā)病中發(fā)揮重要作用[8]。CMKLR-1主要存在于血管平滑肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、破骨細(xì)胞、白細(xì)胞及脂肪細(xì)胞中，與白細(xì)胞介素-1相互作用，而出現(xiàn)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)不斷放大的惡性循環(huán)。CMKLR-1可以對(duì)小鼠平滑肌細(xì)胞發(fā)揮抑制增殖作用[9]。亦有研究指出，通過(guò)飲食控制及加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)會(huì)影響Chemerin和CMKLR-1在糖尿病大鼠肝細(xì)胞中的表達(dá)，而影響糖脂質(zhì)代謝[10]。本研究對(duì)我院就診的DR患者CMKLR-1、Chemerin、IL-1β、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、NF-κB因子進(jìn)行檢測(cè)，探討這些因子在不同程度DR患者中的表達(dá)。

1 對(duì)象及方法

1.1對(duì)象及分組 選取2017年5月—2018年5月我院就診的DR患者120例，據(jù)病變程度均分為非增生組(非增生性DR患者)及增生組(增生性DR患者)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①2型糖尿病；②符合國(guó)際糖尿病性視網(wǎng)膜病變?cè)\斷標(biāo)準(zhǔn)及世界衛(wèi)生組織1999年提出的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]；③年齡40～72歲；④對(duì)本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患嚴(yán)重肝腎功能不全、炎癥性疾病者；②先天性免疫功能缺陷者，近2個(gè)月內(nèi)應(yīng)用免疫抑制劑者；③妊娠期及哺乳期婦女；④有白內(nèi)障、青光眼等眼部疾病者。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意進(jìn)行。

表1 不同程度糖尿病視網(wǎng)膜病變兩組患者一般資料比較

1.2研究方法 觀察兩組患者空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和病程差異，以及兩組CMKLR-1、Chemerin、IL-1β、TNF-α、IL-6、NF-κB水平變化情況。

1.3檢測(cè)方法

1.3.1血糖血脂檢測(cè)：取所有患者入組日晨空腹肘靜脈血5 ml,應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清FPG、HbA1c、HDL-C、LDL-C、TC、TG水平。

1.3.2細(xì)胞因子檢測(cè)：取所有患者入組日晨空腹肘靜脈血5 ml,1500 r/min離心15 min取血清,采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)CMKLR-1、Chemerin、IL-1β、TNF-α、IL-6水平，試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，所有操作按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1兩組血糖、血脂、病程比較 兩組FPG、HbA1c、HDL-C、TC、TG比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；增生組LDL-C水平明顯高于非增生組，病程明顯長(zhǎng)于非增生組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同程度糖尿病視網(wǎng)膜病變兩組患者血糖、血脂、病程比較

2.2兩組炎性因子比較 增生組IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB水平高于非增生組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同程度糖尿病視網(wǎng)膜病變兩組患者炎性因子水平比較

2.3兩組Chemerin、CMKLR-1水平比較 增生組Chemerin、CMKLR-1水平均高于非增生組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同程度糖尿病視網(wǎng)膜病變兩組患者Chemerin、CMKLR-1水平比較

3 討論

有研究發(fā)現(xiàn)，DR的發(fā)病與糖尿病患者的血糖控制及病情發(fā)展進(jìn)程相關(guān)，且與炎癥因子及脂肪代謝紊亂有密切關(guān)系[12]。當(dāng)視網(wǎng)膜長(zhǎng)期處于低氧狀態(tài)，將會(huì)引起相關(guān)因子表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在內(nèi)的多種因子過(guò)表達(dá)，刺激內(nèi)皮細(xì)胞分裂，且會(huì)造成輕微炎性反應(yīng)。而新生的血管極為脆弱，容易纖維化、出血、破裂而影響視網(wǎng)膜，導(dǎo)致患者視力嚴(yán)重下降[13]。目前有研究發(fā)現(xiàn)，增生性DR患者血清及玻璃體中IL-1β表達(dá)水平明顯高于健康人群[14]。當(dāng)機(jī)體處于糖尿病狀態(tài)下，IL-1β會(huì)趨化中性顆粒細(xì)胞及單核細(xì)胞，從而刺激上皮細(xì)胞在視網(wǎng)膜中遷移，導(dǎo)致血管新生[15]。此外，IL-1β水平還會(huì)隨著患者血糖的升高而上調(diào)，并通過(guò)NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)通路上調(diào)IL-6表達(dá)，刺激視網(wǎng)膜中的毛細(xì)血管增生。IL-1β對(duì)具有抗炎和抗血管生成作用的白細(xì)胞介素-4及褪黑激素會(huì)產(chǎn)生抑制作用，這就加劇了DR患者的炎性反應(yīng)。

CMKLR-1是Chemerin的內(nèi)源性配體，有研究發(fā)現(xiàn)其水平會(huì)在發(fā)生微血管病變患者中升高，對(duì)小鼠平滑肌細(xì)胞發(fā)揮抑制增殖作用[16]。CMKLR-1主要存在于血管平滑肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、破骨細(xì)胞、白細(xì)胞及脂肪細(xì)胞中，在早期出現(xiàn)炎性反應(yīng)時(shí)，被浸潤(rùn)的局部炎性細(xì)胞脫顆粒釋放出包括彈性蛋白酶在內(nèi)的多種蛋白酶，在這一過(guò)程中，Chemerin被激活，從而聚集帶有CMKLR-1的抗原遞呈細(xì)胞及炎癥、免疫細(xì)胞[17]。而Chemerin的分泌及合成會(huì)被具有促炎作用的TNF-α和IL-1β促進(jìn)，同時(shí)TNF-α及IL-1β的分泌又會(huì)被Chemerin促進(jìn)，這就出現(xiàn)了炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)不斷放大的惡性循環(huán)[18]。

本研究發(fā)現(xiàn)，兩組FPG、HbA1c、HDL-C、TC、TG比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；增生組LDL-C水平明顯高于非增生組，病程明顯長(zhǎng)于非增生組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。增生組IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB及Chemerin、CMKLR-1水平均高于非增生組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示CMKLR-1、Chemerin、IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB細(xì)胞因子在DR中異常表達(dá)，且隨DR程度的加重表達(dá)水平逐漸升高，CMKLR-1等細(xì)胞因子可能在DR患者病情變化中起重要作用。