亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        動(dòng)物脂肪組織相關(guān)miRNAs 的研究進(jìn)展

        2020-07-24 10:45:30張琦悅孫浩瑋龐衛(wèi)軍
        中國(guó)畜牧雜志 2020年7期
        關(guān)鍵詞:成脂脂肪組織脂質(zhì)

        張琦悅,何 春,孫浩瑋,龐衛(wèi)軍

        (西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,陜西楊凌 712100)

        白色脂肪組織(WAT)是動(dòng)物機(jī)體中良好的儲(chǔ)能與供能物質(zhì),還可以作為分泌器官合成多種脂肪因子,調(diào)節(jié)機(jī)體的生理、病理狀態(tài)[1]。對(duì)于家畜而言,適量的脂肪組織不僅可以保證家畜機(jī)體健康,還可改善肉的風(fēng)味[2]。闡明調(diào)控脂肪形成過(guò)程中的分子機(jī)制對(duì)于畜牧業(yè)及肉類(lèi)生產(chǎn)行業(yè)都至關(guān)重要。miRNA 作為一個(gè)重要的調(diào)節(jié)因子,可通過(guò)調(diào)控靶mRNA 的翻譯與穩(wěn)定性,進(jìn)而促進(jìn)或抑制成脂相關(guān)基因的表達(dá),在脂肪形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用。在家畜肉品質(zhì)改良方面,目前有大量研究集中于從營(yíng)養(yǎng)角度調(diào)控脂質(zhì)的合成與代謝過(guò)程,而在遺傳發(fā)育方面的分子調(diào)節(jié)機(jī)制研究相對(duì)較少。本文總結(jié)miRNA 的生物學(xué)特性及作用機(jī)制,綜合分析近年來(lái)與脂肪組織相關(guān)的miRNA 的重要研究,并對(duì)其未來(lái)的發(fā)展進(jìn)行展望。

        1 miRNA 概述

        miRNA 的發(fā)現(xiàn)經(jīng)歷了數(shù)十年的時(shí)間。最早探索到的miRNA 是Lee 等[3]于1993 年在線蟲(chóng)研究中克隆出來(lái)的,具有調(diào)節(jié)線蟲(chóng)發(fā)育的功能。但這項(xiàng)研究并未引起科學(xué)界的重視,直到2000 年Ruvkun[4]在線蟲(chóng)研究中又發(fā)現(xiàn)一個(gè)相似的miRNA——let-7,這2 個(gè)非編碼基因都可以通過(guò)與基因3'-UTR 結(jié)合發(fā)揮調(diào)控作用。自此人們意識(shí)到這種小RNA 可能是機(jī)體中廣泛存在的一種調(diào)節(jié)因子。2001 年此類(lèi)小RNA 被正式命名為microRNA,簡(jiǎn)稱(chēng)為miRNA[5]。隨后多種miRNA 在不同物種中被發(fā)現(xiàn),并證實(shí)可以調(diào)控各種重要的生理活動(dòng),同時(shí)對(duì)于miRNA 的生物學(xué)本質(zhì)與作用機(jī)制的研究也逐漸明朗。

        1.1 miRNA 的來(lái)源 機(jī)體內(nèi)絕大多數(shù)miRNA 為內(nèi)源性RNA,其中編碼基因位于內(nèi)含子區(qū)并與宿主基因共同受到上游啟動(dòng)子調(diào)控的稱(chēng)為內(nèi)含子miRNA;位于基因間隔區(qū)并可以獨(dú)立轉(zhuǎn)錄的稱(chēng)為基因間miRNA[6]。機(jī)體中還可能存在一定水平的外源性miRNA[7-8]。Zhang等[8]在各種動(dòng)物的血液和組織中均檢測(cè)到了植物源性miRNA,并鑒定出其中的MIR168a 能夠通過(guò)靶向低密度脂蛋白受體配體蛋白1(LDL Receptor Ligand Protein 1,LDLRAP1)影響肝臟正常功能,不過(guò)目前該項(xiàng)研究仍存在一定爭(zhēng)議。

        1.2 miRNA 的合成 miRNA 的經(jīng)典合成過(guò)程如圖1 所示,首先miRNA 的基因組DNA 借助RNA 聚合酶Ⅱ(少數(shù)借助于RNA 聚合酶Ⅲ)轉(zhuǎn)錄為長(zhǎng)達(dá)幾千nt 的primiRNA[9]。隨后在2 次核酸內(nèi)切酶的切割作用下最終形成成熟的miRNA[10]:第一次切割發(fā)生在細(xì)胞核中,是由Drosha 酶將pri-miRNA 從初始轉(zhuǎn)錄本上切割下來(lái)形成pre-miRNA。pre-miRNA 通過(guò)細(xì)胞核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白EXP5介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)中,在細(xì)胞質(zhì)中被Dicer 酶二次切割為長(zhǎng)度約22 nt 的雙鏈RNA[10]。Drosha 酶與Dicer 酶的切割具有相同的特點(diǎn),即在切口處形成2 nt 的懸垂(Overhang)結(jié)構(gòu),利于其裝載到沉默誘導(dǎo)復(fù)合體(RNAInduced Silencing Complex,RSIC)上,RSIC 中的雙鏈RNA 要經(jīng)歷最后一步的選擇機(jī)制,雙鏈中5'端相對(duì)不穩(wěn)定的一條鏈傾向于被保留(稱(chēng)作向?qū)ф湥硪粭l鏈則會(huì)被迅速降解(稱(chēng)作隨從鏈)[11]。

        1.3 miRNA 的作用機(jī)制 miRNA 需要被裝配到RSCI中才能行使其調(diào)控基因表達(dá)的功能。被結(jié)合的靶mRNA一般有3 種命運(yùn):①翻譯抑制。RISC 通過(guò)2 方面發(fā)揮抑制作用,一方面在翻譯起始之前抑制核糖體形成,從而阻止翻譯起始[12];另一方面在翻譯過(guò)程中阻止核糖體前進(jìn),導(dǎo)致翻譯終止[13]。②靶mRNA 的降解。RSCI可以抑制靶基因的正常轉(zhuǎn)錄,使靶mRNA 脫帽、脫尾最終降解[14]。③靶mRNA 的切割。RSIC 中的Ago2 可發(fā)揮切割作用[15]。其中要實(shí)現(xiàn)靶mRNA 切割需滿足2個(gè)條件:miRNA 被Ago2 蛋白緊密包裹且與靶mRNA完美匹配。miRNA 通過(guò)自身種子序列與靶mRNA 不同程度地結(jié)合,維持機(jī)體中蛋白質(zhì)的最佳水平。

        2 影響脂肪細(xì)胞分化的miRNAs

        脂肪細(xì)胞是動(dòng)態(tài)且高度受調(diào)控的細(xì)胞群,脂肪生成是一個(gè)多步驟的過(guò)程,涉及多種信號(hào)通路如Wnt/β-catenin、PI3K/Akt、MAPK、TGFβ/smad 和一些核心轉(zhuǎn)錄因子如過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisome Proliferator-Activated Receptors,PPARs)、CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白(CCAAT/Enhancer-Binding Proteins,C/EBPs)、固醇調(diào)節(jié)元素結(jié)合蛋白1(Sterol-Regulatory Element Binding Proteins,SREBP1)等的重要調(diào)控作用。miRNA 可通過(guò)結(jié)合相關(guān)信號(hào)通路中的關(guān)鍵組成元件,或者直接與核心轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,進(jìn)而調(diào)控成脂標(biāo)志物,如脂肪酸結(jié)合蛋白4(Fatty Acid Binding Protein 4,F(xiàn)ABP4)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4(Glucose Transporter 4,GLUT4)、脂肪酸合酶(Fatty Acid Synthase,F(xiàn)ASN)的表達(dá),最終影響脂肪細(xì)胞分化。

        2.1 miRNA 調(diào)控脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的經(jīng)典信號(hào)通路PI3K/Akt 信號(hào)通路促進(jìn)脂質(zhì)生物合成并抑制脂解。一些研究表明,miRNA 在PI3K/Akt 信號(hào)通路調(diào)控脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。Akt 是PI3K/Akt 信號(hào)通路中c-Met 的下游效應(yīng)因子,在整個(gè)3T3-L1 細(xì)胞分化過(guò)程中,miRNA-206 可通過(guò)抑制靶基因c-Met 的表達(dá),使Akt 磷酸化程度降低,從而抑制脂肪細(xì)胞分化[16]。Mi 等[17]研究發(fā)現(xiàn)miR-139-5p 可通過(guò)直接靶向IRS1/PI3K/Akt 胰島素信號(hào)通路的關(guān)鍵成員IRS1,在脂肪細(xì)胞分化中發(fā)揮負(fù)調(diào)節(jié)作用。伊璨等[18]研究發(fā)現(xiàn)miR-143 可以與多聚營(yíng)養(yǎng)素(Pleiotrophin,PTN)的3'-UTR結(jié)合,在通過(guò)PTN/PI3K/AKT 信號(hào)途徑的脂肪生成過(guò)程中起到抑制作用,從而促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂分化。

        MAPK 信號(hào)通路是由3 個(gè)順序活化的激酶組成的磷酸化系統(tǒng)的一部分并受磷酸化調(diào)節(jié)。在脂肪細(xì)胞分化中,有絲分裂克隆擴(kuò)增階段需要MAPK 信號(hào)通路的激活,但在終末分化階段中,MAPKs 通過(guò)磷酸化PPARγ抑制脂肪細(xì)胞分化[19]。Jin 等[20]研究發(fā)現(xiàn)miR-24 在3T3-L1 前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中顯著上調(diào),用miR-24-mimics 轉(zhuǎn)染3T3-L1 細(xì)胞之后,通過(guò)油紅O 染色發(fā)現(xiàn),miR-24 過(guò)表達(dá)組較對(duì)照組形成更多的脂滴,此外甘油三酯含量也增加了21.6%,說(shuō)明miR-24 可以促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化,進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明MAPK7是miR-24 的直接靶點(diǎn),miR-24 通過(guò)下調(diào)MAPK7 表達(dá)而發(fā)揮其成脂作用。Xie 等[21]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),過(guò)表達(dá)miR-21a-5p 可減輕雙酚A(Bisphenol A,BPA)誘導(dǎo)的體內(nèi)肥胖,螢光素酶活性測(cè)定表明miR-21a-5p 通過(guò)靶向Map2K3 抑制BPA 誘導(dǎo)的3T3-L1 成脂分化。

        2.2 miRNA 調(diào)控脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子PPARγ是一種配體激活的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,在脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。PPARγ在脂肪細(xì)胞分化早期表達(dá)并維持脂肪細(xì)胞的終末分化,同時(shí)激活脂肪細(xì)胞特異基因表達(dá),產(chǎn)生脂肪細(xì)胞表型[22]。miR-130 可以同時(shí)靶向PPARγmRNA 的編碼區(qū)和3'-UTR 來(lái)有效抑制PPARγ表達(dá),進(jìn)而減少脂肪形成[23]。在地塞米松誘導(dǎo)的脂質(zhì)蓄積中,miR-130b 可以直接識(shí)別結(jié)合PPAR-γ的3'-UTR 并抑制PPARγ的表達(dá),來(lái)減輕地塞米松誘導(dǎo)的豬前脂肪細(xì)胞脂質(zhì)蓄積量的增加[24]。

        C/EBPs 轉(zhuǎn)錄因子家族在脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。C/EBPβ和C/EBPδ 是前脂肪細(xì)胞暴露于分化培養(yǎng)基后誘導(dǎo)的第一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子,隨后誘導(dǎo)C/EBPα表達(dá),C/EBPα充當(dāng)多種脂肪細(xì)胞基因的轉(zhuǎn)錄激活因子,促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化[25]。Feng 等[26]通過(guò)qPCR發(fā)現(xiàn)miR-326 在脂肪干細(xì)胞(Adipose-Derived Stem Cells,ASC)成脂分化過(guò)程中表達(dá)量降低,用慢病毒包裹miR-326 轉(zhuǎn)染hASCs 后,發(fā)現(xiàn)該處理組較對(duì)照組僅有少量脂滴合成,同時(shí)C/EBPα蛋白表達(dá)下降。通過(guò)生物信息學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)C/EBPα的3'-UTR 具有2 個(gè)miR-326 的結(jié)合位點(diǎn),進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-326 通過(guò)與C/EBPα結(jié)合,降低其表達(dá)水平,從而導(dǎo)致hASCs 的成脂分化減少。

        3 與脂質(zhì)代謝相關(guān)的miRNAs

        脂質(zhì)代謝包括甘油三酯、膽固醇、磷脂、糖脂的合成與分解,以及脂蛋白代謝等。實(shí)驗(yàn)證明,許多miRNA 已成為脂質(zhì)代謝的重要調(diào)節(jié)因子,通過(guò)靶向脂代謝中的關(guān)鍵酶如乙酰輔酶A 羧化酶(Acetyl CoA Carboxylase,ACAC)以及重要的轉(zhuǎn)錄因子如固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(Sterol Regulatory Element Binding Proteins,SREBPs)和運(yùn)輸脂類(lèi)的脂蛋白等發(fā)揮其調(diào)控作用[27-28]。2003 年,在果蠅中首次描述了miRNA 在脂質(zhì)代謝中的作用,發(fā)現(xiàn)動(dòng)物體內(nèi)三酰和二酰甘油含量隨miR-14 拷貝數(shù)的增加而減少[29]。隨后Varghese[30]在果蠅中發(fā)現(xiàn)miR-14 可直接靶向大腦中產(chǎn)生胰島素的分泌細(xì)胞中的Sugarbabe。Sugarbabe 編碼鋅指蛋白,該蛋白可調(diào)節(jié)神經(jīng)分泌細(xì)胞中的胰島素基因表達(dá),以控制新陳代謝。

        SREBPs 是一類(lèi)膜結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子,通過(guò)控制脂肪酸、磷脂、膽固醇的從頭合成以及膽固醇的攝取,在脂質(zhì)代謝中占據(jù)重要地位。SREBP 由SREBP-1a、SREBP-1c 和SREBP-2 3 個(gè)成員組成,其中SREBP-2 主要控制膽固醇的合成和攝取,而SREBP-1c 調(diào)節(jié)脂肪酸的合成。SREBP-1a 兼具以上3 種功能[31-32]。Yang 等[33]發(fā)現(xiàn)在HepG2 細(xì)胞中過(guò)表達(dá)miR-185 可抑制SREBP-2基因的表達(dá)并降低其蛋白質(zhì)水平,同時(shí)導(dǎo)致LDL 攝取和HMG-CoA 還原酶活性降低。Geng 等[34]首次證明了miR-98 通過(guò)直接靶向SREBP-2 使細(xì)胞內(nèi)總膽固醇水平降低,闡明miR-98 在膽固醇代謝中的新作用。

        另外miR-122[35]、miR-370[36]、miR-758[37]、miR-27[38]、miR-30c[39]、miR223[40]、miR-144[41]、miR168a[8]、miR-302a[42]、miR378[43]等對(duì)脂質(zhì)代謝過(guò)程同樣起到調(diào)控作用。

        4 脂肪組織來(lái)源的循環(huán)miRNAs

        動(dòng)物體成熟的miRNA 在細(xì)胞內(nèi)部形成并發(fā)揮功能,同時(shí)還可被釋放到動(dòng)物的循環(huán)系統(tǒng)和各種體液中[44]。miRNA 可以包裝在一類(lèi)被稱(chēng)為細(xì)胞外囊泡的結(jié)構(gòu)中,這些囊泡包括外泌體和微囊泡,是細(xì)胞衍生的膜狀結(jié)構(gòu),其中包含許多miRNA,既具有旁分泌的作用,又可以作為內(nèi)分泌因子,在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移,從而建立細(xì)胞間通訊以及在遠(yuǎn)處的器官之間傳播以促進(jìn)器官間的物質(zhì)和信息交流[45-46]。

        脂肪組織是循環(huán)miRNA 的主要來(lái)源,脂肪來(lái)源的循環(huán)miRNA 可以認(rèn)作為一類(lèi)新型的脂肪因子。Thomas等[47]研究發(fā)現(xiàn),在miRNA 加工酶Dicer 脂肪特異性敲除(ADicerKO)的小鼠以及患有脂肪營(yíng)養(yǎng)不良的人類(lèi)中,其循環(huán)性外泌體miRNA 都有很大程度減少,而接受白色特別是棕色脂肪組織(BAT)移植的ADicerKO 小鼠,體液中循環(huán)miRNA 含量可以達(dá)到野生型水平,同時(shí)還提高了其葡萄糖耐受性,這是首次研究報(bào)道脂肪來(lái)源的miRNA 是機(jī)體中所有循環(huán)miRNA 的重要來(lái)源。

        脂肪組織中的主要細(xì)胞群是脂肪細(xì)胞,其他的常駐細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等。脂肪組織中巨噬細(xì)胞相對(duì)于其他細(xì)胞類(lèi)型的比例可以從瘦肉型個(gè)體的5%上升到肥胖型個(gè)體的50%[48]。研究發(fā)現(xiàn),脂肪組織巨噬細(xì)胞(Adipose Tissue Macrophages,ATM)可以將含有miRNA 的外泌體(Exosomes,Exos)分泌到循環(huán)系統(tǒng)中,進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性[49]。來(lái)自肥胖動(dòng)物的ATM 分泌的Exos,其中所包含的miRNA 可以在體內(nèi)和體外被胰島素靶細(xì)胞吸收,從而導(dǎo)致細(xì)胞和全身性的胰島素抵抗和葡萄糖耐受不良,而在體內(nèi)和體外使用瘦小鼠衍生的ATM-Exos 對(duì)肥胖個(gè)體進(jìn)行治療,相關(guān)癥狀可得到明顯改善[49-50]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),miR-155 是二者ATM-Exos 中差異表達(dá)的miRNA之一,可以通過(guò)直接抑制其靶基因PPARγ來(lái)影響肥胖個(gè)體中胰島素信號(hào)的傳導(dǎo)并降低其葡萄糖耐受量[50]。

        大量研究證實(shí),肥胖機(jī)體中分泌的miRNA 譜會(huì)發(fā)生改變,從而影響循環(huán)miRNA 的分泌,并可能導(dǎo)致其他代謝器官的病理變化[51-52]。因此肥胖相關(guān)和/或脂肪組織衍生的循環(huán)miRNA 有成為新型生物標(biāo)志物的潛力,成為用于治療肥胖和相關(guān)疾病的新靶標(biāo)[53]。由此發(fā)展出的新型療法,如miRNA 模擬物、抗miRNA 寡核苷酸和裝載miRNA 的外泌體,可能使基于miRNA的療法在肥胖和代謝性疾病中的臨床應(yīng)用成為可能[48]。但循環(huán)miRNA 也存在一定缺陷。在動(dòng)物模型中,可能是多個(gè)循環(huán)miRNA 以協(xié)調(diào)工作的方式來(lái)控制新陳代謝,而單個(gè)特異性循環(huán)miRNA 往往對(duì)代謝的影響較弱,另外,由于存在大量的未知靶點(diǎn),循環(huán)miRNA 的靶向特異性較差,這可能導(dǎo)致基于miRNA 的治療出現(xiàn)脫靶不良反應(yīng)[54]。但這種以新形式存在并發(fā)揮作用的miRNA,依然為脂肪相關(guān)研究提供了新思路。

        5 總結(jié)及展望

        近年來(lái),關(guān)于脂肪組織中miRNA 的功能研究日趨增多,均旨在闡明miRNA-靶基因-功能三者之間的關(guān)系。由于miRNA 與其靶基因并非軸線式的調(diào)控關(guān)系,而呈現(xiàn)出一個(gè)極具復(fù)雜性的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),脂肪組織來(lái)源的循環(huán)miRNA 的發(fā)現(xiàn),也為miRNA 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)增添了新的元素。隨著高通量測(cè)序技術(shù)和芯片技術(shù)水平不斷提高,越來(lái)越多的miRNA 被鑒定出具有重要的生物學(xué)功能,相關(guān)miRNA 靶基因預(yù)測(cè)軟件的研發(fā)也大大提高了對(duì)miRNA 靶點(diǎn)預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確性,然而其中僅有一小部分被證實(shí),目前對(duì)于miRNA-靶基因-生物學(xué)功能的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的認(rèn)識(shí)還不足。未來(lái)將miRNA 作為調(diào)控家畜肉品質(zhì)的靶點(diǎn),甚至作為生物學(xué)標(biāo)記治療代謝性疾病具有十分廣闊的前景。

        猜你喜歡
        成脂脂肪組織脂質(zhì)
        高脂肪飲食和生物鐘紊亂會(huì)影響體內(nèi)的健康脂肪組織
        中老年保健(2021年9期)2021-08-24 03:49:52
        雙源CT對(duì)心臟周?chē)窘M織與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性
        復(fù)方一枝蒿提取物固體脂質(zhì)納米粒的制備
        中成藥(2018年9期)2018-10-09 07:18:36
        白楊素固體脂質(zhì)納米粒的制備及其藥動(dòng)學(xué)行為
        中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:19:53
        左、右歸丸對(duì)去卵巢大鼠BMSCs成骨、成脂分化后Caspase-3/Bcl-2的影響
        中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:49:52
        馬錢(qián)子堿固體脂質(zhì)納米粒在小鼠體內(nèi)的組織分布
        中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:26
        大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)及成骨成脂分化能力染色鑒定
        豬BMSCs成脂分化中細(xì)胞膜鈣離子通道、鈣敏感受體及成脂定向相關(guān)基因表達(dá)研究
        納米氧化鈰顆粒對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化和成脂分化的影響
        川陳皮素固體脂質(zhì)納米粒的制備
        中成藥(2014年9期)2014-02-28 22:28:50
        国产成人福利av一区二区三区| 亚洲精品国产成人| 91久久青青草原免费| 熟女系列丰满熟妇av| 二区三区日本高清视频| 人人摸人人搞人人透| 久久精品国产9久久综合| AV无码系列一区二区三区| 丰满老熟女性生活视频| 亚洲国产精品无码中文字| 欧美情侣性视频| 国产日韩午夜视频在线观看| 日韩女优图播一区二区| 最新中文字幕av无码不卡| 麻豆成人在线视频| 精品女同一区二区三区在线播放器 | 日本加勒比一道本东京热| 久久免费看黄a级毛片| 国产农村乱子伦精品视频 | 在线播放中文字幕一区二区三区| 日韩av毛片在线观看| 无码av天堂一区二区三区| 国产91在线免费| 午夜国产精品一区二区三区| 三级全黄裸体| 国产嫖妓一区二区三区无码| 美女窝人体色www网站| 国产一级黄色录像大片| 69一区二三区好的精华| 综合网五月| 国产亚洲一区二区毛片| 国产大片内射1区2区| 婷婷亚洲综合五月天小说| 国产麻豆剧传媒精品国产av蜜桃| 亚洲高清在线免费视频| 亚洲国产精品久久久久婷婷老年| 日本成人字幕在线不卡| av在线不卡免费中文网| 国产三级久久久精品麻豆三级| 久久久伊人影院| 在线观看一区二区三区视频|