李 輝

（衡水學(xué)院 河北 衡水 053000）

柚是蕓香科柑橘屬水果，柚皮含有多種促進(jìn)人體健康、對(duì)一些疾病有防治作用的非營(yíng)養(yǎng)性生理活性成分，如黃酮類化合物、香精油、天然色素、膳食纖維等。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，柚皮提取物具有抗氧化、抗微生物、抗癌、抑酶、抗衰老、降血糖、降血壓、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化等活性[2～5]。本文系統(tǒng)研究了超聲提取柚皮中黃酮類化合物的單因素試驗(yàn)，還利用正交試驗(yàn)進(jìn)一步研究了超聲提取工藝的優(yōu)化。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料。市售的柚皮，去掉白囊，曬干打粉。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 單因素試驗(yàn)的設(shè)計(jì)。首先繪制黃酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后分別以不同酒精濃度、不同提取時(shí)間、不同料液比、不同超聲功率為變量進(jìn)行試驗(yàn)，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定提取液的吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算提取液中總黃酮的含量。總黃酮的提取率為1 g 原料中總黃酮的質(zhì)量[6]。

1.2.2 正交試驗(yàn)L9(34)的設(shè)計(jì)。按照表1 中的數(shù)據(jù)參數(shù)，以粗黃酮類物質(zhì)得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，獲取較佳的提取工藝參數(shù)[7]。

表1 正交試驗(yàn)因子與水平設(shè)計(jì)

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備。黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制成圖如圖1。

2.2 不同提取時(shí)間對(duì)提取率的影響。由圖2 可以看出，提取時(shí)間在50 ～60 min 時(shí)，提取率最大；提取時(shí)間在20 ～50 min 時(shí)，隨著提取時(shí)間的增加，提取率逐漸上升；在50 ～60 min 時(shí)達(dá)到最大值；高于60 min后，提取率稍微有些下降。

2.3 不同酒精濃度對(duì)提取率的影響。由圖3 可以看出，在65%左右的酒精濃度下，黃酮的提取率最大。酒精濃度在由40%向65%上升的過程中提取率逐漸增大，60%以后隨著酒精濃度的升高，提取率逐漸降低。

2.4 不同料液比對(duì)提取率的影響。由圖4 可以看出，料液比在1∶15 ～1∶35 時(shí)，提取率逐漸上升，在1∶35 時(shí)達(dá)到最大值，之后隨著料液比變小，提取率又開始下降。

2.5 不同超聲功率對(duì)提取率的影響。由圖5 可以明顯看出，隨著超聲波功率的增加，提取率逐漸上升，可見超聲波功率越大，提取的就越充分。

2.6 正交試驗(yàn)L9(34)的結(jié)果分析。由表2 可知，最優(yōu)提取條件是A3B3C2D2，即料液比1∶35，乙醇濃度60%，提取時(shí)間50 min，超聲功率80 w。4 因素對(duì)柚皮中粗黃酮類物質(zhì)得率的影響的主次順序?yàn)椋毫弦罕?超聲功率>乙醇濃度>提取時(shí)間。

2.7 最優(yōu)工藝驗(yàn)證試驗(yàn)。準(zhǔn)確稱取1 g 柚皮干粉，以60%的乙醇為溶劑，常溫下以80 w 的超聲功率，按料液比1∶35，超聲提取50 min，試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。由表3可知，黃酮類化合物平均提取率為5.88%，正交優(yōu)化得到的提取條件參數(shù)準(zhǔn)確可靠，具有實(shí)際價(jià)值。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

3 結(jié)論與討論

采用單因素試驗(yàn)得到了單因素的最佳工藝條件：料液比為1∶35 時(shí)，黃酮類化合物提取率為6.18%；超聲提取時(shí)間為60 min 時(shí)，黃酮類化合物提取率為3.46%；乙醇濃度為60%時(shí)，黃酮類化合物提取率為3.43%；超聲功率為100w 時(shí)，黃酮類化合物提取率為3.44%。

表3 最優(yōu)工藝驗(yàn)證結(jié)果

采用正交試驗(yàn)L9(34)優(yōu)化黃酮類化合物的提取工藝，得到最佳工藝為：液料比1∶35，超聲時(shí)間50 min，乙醇濃度60%，超聲功率80 w，得到的黃酮提取率為5.88%。4 因素對(duì)黃酮類化合物提取的影響順序?yàn)椋毫弦罕?超聲功率>乙醇濃度>提取時(shí)間。對(duì)最佳工藝進(jìn)行了驗(yàn)證性試驗(yàn)，平均提取率為5.88%，結(jié)果表明本方案重復(fù)性好。

本試驗(yàn)為柚皮中黃酮類化合物的提取研究提供了一定的依據(jù)，為柚皮的綜合利用提供了參考[8]。