張賀敏

[摘 要] 2019年8月初，河南省遂平縣某規(guī)?；i場產(chǎn)房仔豬出現(xiàn)嚴重的腹瀉、嘔吐現(xiàn)象，最終因脫水而死亡。為探究豬群發(fā)病原因，對發(fā)病嚴重豬群進行臨床解剖，結合分子生物學診斷技術，最終確診為豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性胃腸炎病毒混合感染所致。經(jīng)過緊急疫苗接種、實施其他防控措施，2周后疫情得到有效控制，仔豬腹瀉情況不再發(fā)生。

[關鍵詞] 仔豬腹瀉;豬流行性腹瀉病毒;豬傳染性胃腸炎病毒;混合感染

[中圖分類號] S858.28 [文獻標識碼] B [文章編號]1674-7909（2020）06--2

在生豬養(yǎng)殖過程中，仔豬腹瀉是比較常見的臨床疾病，嚴重時導致患畜因脫水或心力衰竭而死亡，給豬場造成巨大的經(jīng)濟損失。引發(fā)仔豬腹瀉的病原較多，包括細菌、寄生蟲和病毒，其中導致仔豬腹瀉的腸道病毒有豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PoRV）和豬德塔冠狀病毒（PDCoV）等，這些病毒感染仔豬所引發(fā)的臨床癥狀及病理變化類似，依靠傳統(tǒng)的臨床診斷鑒別較為困難[1]。此外，在某些疫情復雜的豬場，不同腹瀉病毒混合感染的現(xiàn)象較為常見，這使得準確診斷疫病的難度更大[2，3]。筆者曾經(jīng)對一例仔豬PEDV和TGEV混合感染案例進行診斷，下面將其診斷過程進行詳細闡述。

1 發(fā)病情況

河南省遂平縣某規(guī)?；i場飼養(yǎng)繁殖母豬200余頭，采取自繁自養(yǎng)模式，主要對外銷售育肥豬和保育豬。2019年8月初，該豬場10日齡內少量新生仔豬出現(xiàn)腹瀉，同時母豬有輕微腹瀉。豬場飼養(yǎng)員在飼料中添加適量氟苯尼考與阿莫西林對母豬進行拌喂，同時對仔豬灌喂抗生素，但情況未見好轉。截至8月中旬，已經(jīng)有800多頭仔豬發(fā)病，300余頭仔豬因腹瀉死亡，死亡率接近40%。

2 臨床癥狀

觀察發(fā)病豬群臨床癥狀，發(fā)現(xiàn)發(fā)病仔豬腹瀉嚴重，其糞便顏色為黃綠色，性狀為水樣狀，甚至部分發(fā)病嚴重仔豬呈噴射狀腹瀉。發(fā)病豬群整體消瘦、精神反應遲鈍，其中仔豬腹瀉情況隨日齡越低而發(fā)病越嚴重;部分母豬精神沉郁，采食量下降，但未發(fā)現(xiàn)母豬死亡現(xiàn)象。

3 病理變化

對發(fā)病嚴重仔豬進行解剖，主要病理癥狀集中表現(xiàn)在腸道部位，其腸系膜淋巴結腫大，腸道表面出血，且腸壁變薄，腸道內有未消化的凝乳塊物質，且其含有較重的腥臭味。

根據(jù)病豬的臨床表現(xiàn)、病理變化及豬場用藥情況，我們初步判定該病的發(fā)生可能由豬腸道腹瀉病毒感染所致。但由哪一種病毒感染引起尚不清楚，需實驗室診斷確定。

4 實驗室診斷

4.1 細菌檢測

無菌采集病豬淋巴結、肺臟、肝臟和腸道內容物，將其勻漿后，取適量上清接種于鮮血瓊脂培養(yǎng)基，將培養(yǎng)基置于37 ℃無菌培養(yǎng)箱內培養(yǎng)36 h，其后觀察培養(yǎng)基表面是否存在菌落，并對菌株種類進行鑒定。結果顯示，培養(yǎng)36 h培養(yǎng)基表面均未觀察到菌落生長情況，同時染色鏡檢未檢測到細菌存在。

4.2 病毒檢測

無菌取3頭發(fā)病仔豬的適量病變明顯的小腸組織樣品，將組織樣品勻漿后，低溫（4 ℃）高速（1.3萬r/min）離心15 min，取上清采用Trizol法提取組織RNA，按照說明書將RNA反轉錄為cDNA，以cDNA樣品為模板，采用RT-PCR法檢測PEDV、TGEV、PoRV和PDCoV病原是否存在，然后對PCR產(chǎn)物進行凝膠電泳觀察條帶。檢測結果顯示，3份樣品均被檢測出PEDV和TGEV陽性，PoRV和PDCoV均為陰性，提示豬群腹瀉是PEDV和TGEV混合感染所致。

5 防控措施

5.1 提高飼養(yǎng)管理水平

通過對發(fā)病豬群進行臨床癥狀及實驗室技術檢測，最終確診為PEDV和TGEV混合感染所致，降低仔豬發(fā)病率和死亡率主要依靠提高豬群飼養(yǎng)管理水平。一是將腹瀉豬和健康豬隔離飼養(yǎng)，使腹瀉豬群獲得含有PED和TGE母源抗體的初乳，提高豬群抵抗病毒腹瀉的能力;二是在仔豬飲水中添加多維和適量食鹽，防止發(fā)病豬群因過度腹瀉脫水死亡;三是將豬舍內溫度提高，防止仔豬因寒冷扎堆，同時降低豬舍內濕度[4]。

5.2 開展消毒工作

對發(fā)病豬群進行隔離，對其所在欄舍進行消毒，可使用高壓水槍對欄舍進行沖洗，同時進行熏蒸消毒，同時在走道兩邊鋪適量濃度的石灰乳;對發(fā)病豬群排出的糞污進行及時清除與無害化處理，以切斷病原的傳播途徑;做好飼養(yǎng)人員的培訓工作，專人負責腹瀉豬群的飼養(yǎng)管理工作，不能讓飼養(yǎng)員在不同欄舍之間穿梭。

5.3 緊急疫苗接種與用藥

對全群母豬免疫接種豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎二聯(lián)疫苗（ZJ08和HB08豬）免疫接種（2頭份/頭），仔豬肌肉注射1頭份/頭;為了防止發(fā)病仔豬繼發(fā)感染其他疫病，在仔豬飼料中添加適量阿莫西林和電解多維等，連續(xù)用藥5 d后停藥。

嚴格執(zhí)行以上防治措施后，2周后回訪，該豬場疫情得到有效控制，豬場仔豬發(fā)病率明顯下降，無大規(guī)模仔豬死亡情況發(fā)生。

6 討論

PEDV感染豬只后，主要在小腸黏膜上皮細胞中進行復制，受到侵染的小腸上皮細胞正常的結構被破壞，腸壁細胞發(fā)生死亡，腸絨毛脫落，從而腸壁變薄，腸道的表面積減少，使小腸消化吸收功能降低;另外，腸黏膜上皮細胞內的雙糖酶、氨基肽酶等活性降低或者缺乏，因而導致腸腔小分子物質得不到進一步分解、吸收，使腸腔內的膠體滲透壓升高，又因ATP酶活性降低或者缺乏，腸上皮細胞內鈉泵失活，晶體滲透壓也升高，從而引發(fā)仔豬滲透性腹瀉，嚴重時脫水甚至死亡。

在仔豬生長過程中發(fā)生腹瀉十分常見，導致仔豬腹瀉的病因較多，其中病毒感染是常見的原因，很多腸道病毒均可以導致仔豬腹瀉，而且其臨床及病理變化相似，導致傳統(tǒng)的臨床與病理診斷已經(jīng)無法滿足對病原精確診斷的要求。本次接診的案例中仔豬腹瀉是由PEDV和TGEV混合感染所致，PEDV和TGEV均可導致仔豬腹瀉，而且其發(fā)病癥狀一致，如果沒有豐富的臨床經(jīng)驗很容易誤診或漏診，延誤疫病的治療。本次研究通過分子診斷技術最終確定為PEDV和TGEV混合感染，對豬群進行緊急免疫接種疫苗及提高飼養(yǎng)管理水平后疫情得到有效控制。故而，當豬場發(fā)生疫情后，應及時將病料樣品送往專業(yè)檢測機構進行病原檢測，根據(jù)檢測結果實施相應的防控措施，以減少經(jīng)濟損失。

參考文獻

[1]張利衛(wèi)，曹貝貝，李炳曉，等.新發(fā)豬Delta冠狀病毒和豬流行性腹瀉病毒SYBR Green I雙重熒光RT—PCR檢測方法的建立及應用[J].中國獸醫(yī)學報，2018（4）：618-624.

[2]滑翔，胡中凱，黃小波，等.檢測豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒的cDNA芯片的構建[J].畜牧獸醫(yī)學報，2015（12）：2235-2242.

[3]陳志雄，王洪海，張峰.規(guī)模豬場哺乳仔豬混合感染PEDV和PDCoV暴發(fā)腹瀉的綜合防控[J].中國豬業(yè)，2019（5）：85-88.

[4]馬壽福.仔豬流行性腹瀉病的診斷與防治措施[J].國外畜牧學（豬與禽），2019（8）：19-20.