尚喜雨 曲震理 劉尚書 劉慶春 王卿 未小明 張園園 薛士鵬

糖尿病是胰島素不足所致的代謝紊亂性疾病。糖尿病發(fā)病過程中會(huì)出現(xiàn)糖尿病腎病、糖尿病眼病、糖尿病心臟病等并發(fā)癥，影響患者生存質(zhì)量和生命安全?？刂蒲鞘茄泳彶l(fā)癥發(fā)生的關(guān)鍵，而選擇合適的藥物控制血糖是治療糖尿病的關(guān)鍵。隨著臨床對(duì)糖尿病研究的深入，中草藥在糖尿病血糖控制中有所應(yīng)用。艾葉為菊蒿屬多年生草本植物艾的干燥葉。從艾葉中分離的成分有萜類、黃酮、苯丙素、芳香酸（醛）、甾體及脂肪酸等?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究提示，艾葉具有抗菌抗病毒、降血糖、降血壓、免疫調(diào)節(jié)等作用[1]。本研究旨在探討艾葉提取物對(duì)2型糖尿病小鼠血糖水平的影響及相關(guān)機(jī)制，為臨床尋找降血糖藥物提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料選擇由華中科技大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供的健康清潔級(jí)昆明種雄性小鼠60只，重（15±4）g。實(shí)驗(yàn)前均給予小鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)過程中均給予高脂飼料（其中基礎(chǔ)飼料占78.8%、膽鹽占0.2%、膽固醇占1%、豬油占10%、蛋黃粉占10%）喂養(yǎng)。艾葉提取物購(gòu)自西安旭煌生物技術(shù)有限公司，規(guī)格50∶1 TLC，棕黃色粉末。四氧嘧啶購(gòu)自Sigma公司。鏈脲佐菌素購(gòu)自上海艾研生物科技有限公司。實(shí)驗(yàn)中測(cè)定抗氧化相關(guān)指標(biāo)所用試劑（超氧化物歧化酶、丙二醛）購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.2 方法所選60只小鼠隨機(jī)分為5 組，每組12只，分別為：對(duì)照組、模型組、高劑量組、中劑量組和低劑量組。對(duì)照組給予小鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，其余4 組小鼠均給予高脂飼料喂養(yǎng)4 周后，禁食不禁水12h，連續(xù)3 天給予鏈脲佐菌素腹腔注射，注射劑量為35mg/kg，繼續(xù)給予高脂飼料喂養(yǎng)7d，禁食24h后，測(cè)定空腹血糖，血糖測(cè)定值大于11.0mmol/L 則提示糖尿病小鼠模型建立成功，繼續(xù)采用高脂飼料喂養(yǎng)。對(duì)照組給予同體積生理鹽水灌胃，連續(xù)應(yīng)用4 周。模型組造模成功后給予同體積生理鹽水灌胃，連續(xù)應(yīng)用4 周。低劑量組、中劑量組、高劑量組在糖尿病模型造模成功后，分別給予艾葉提取物灌胃，劑量分別為0.56g/kg、1.12g/kg、2.24g/kg，連續(xù)應(yīng)用4 周。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 測(cè)定灌胃4 周后小鼠的空腹血糖、空腹胰島素及肝糖原水平 連續(xù)灌胃4 周后，最后一次給藥后對(duì)小鼠禁食12h，測(cè)定其空腹血糖、空腹胰島素和肝糖原水平。肝糖原水平測(cè)定采用蒽酮比色法?？崭挂葝u素水平測(cè)定采用放射免疫法測(cè)定。

1.3.2 測(cè)定各組小鼠超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平 超氧化物歧化酶測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法。丙二醛測(cè)定采用硫代巴比妥酸法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0 對(duì)本研究所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，各組不同均數(shù)比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠灌胃前后一般情況正常組小鼠灌胃前后無差異行為表現(xiàn)，模型組小鼠糖尿病造模成功后到灌胃實(shí)驗(yàn)結(jié)束，2只小鼠死亡，可能與長(zhǎng)時(shí)間高血糖水平有關(guān)。高劑量組1只小鼠死亡、中劑量組1只小鼠死亡、低劑量組2只小鼠死亡。

2.2 各組小鼠空腹血糖、空腹胰島素、肝糖原水平比較模型組空腹血糖水平高于對(duì)照組，空腹胰島素水平與肝糖原水平均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高、中、低劑量組的空腹血糖水平分別低于模型組，空腹胰島素水平與肝糖原水平均分別高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高劑量組空腹血糖水平低于中劑量組，中劑量組空腹血糖水平低于低劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高劑量組空腹胰島素和肝糖原水平高于中劑量組，中劑量組空腹胰島素和肝糖原水平高于低劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組小鼠空腹血糖、空腹胰島素和肝糖原水平比較

2.2 各組小鼠超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比較模型組超氧化物歧化酶活性低于對(duì)照組，丙二醛水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高、中、低劑量組的超氧化物歧化酶活性分別高于模型組，丙二醛水平分別低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高劑量組超氧化物歧化酶活性高于中劑量組，中劑量組超氧化物歧化酶活性高于低劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高劑量組丙二醛水平低于中劑量組，中劑量組丙二醛水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組小鼠超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平比較

3 討論

糖尿病是胰島素缺乏所致的代謝紊亂性疾病，主要表現(xiàn)為三多一少癥狀（多飲、多食、多尿、消瘦）。胰島素不足或相對(duì)不足是導(dǎo)致糖尿病的根源[2]。糖尿病在其慢性發(fā)病過程中會(huì)產(chǎn)生相關(guān)并發(fā)癥，如糖尿病腎病、糖尿病眼病、糖尿病周圍神經(jīng)病變、糖尿病心臟病等，這些并發(fā)癥會(huì)加速機(jī)體衰退[3，4]。糖尿病的有效治療就是應(yīng)用相關(guān)藥物穩(wěn)定血糖水平，延緩并發(fā)癥的發(fā)生。目前糖尿病患者的血糖控制藥物較多，如西藥中的胰島素制劑、口服降糖藥物雙胍類、黃酰脲類等[5，6]。這些藥物作用機(jī)制明確，療效確切，但作用具有單一性，而且長(zhǎng)期服用可出現(xiàn)嚴(yán)重程度不一的不良反應(yīng)，影響患者繼續(xù)治療。隨著中草藥研究深入，中藥在糖尿病治療中有所應(yīng)用，并不斷加強(qiáng)。尋找改善糖尿病患者血糖水平的草藥是目前研究的重點(diǎn)之一。

艾葉為菊科蒿屬多年生草本植物艾的干燥葉，具有溫經(jīng)止血、散寒止痛的作用。現(xiàn)代藥學(xué)研究表明[7，8]，艾葉提取物中的成分復(fù)雜，包含萜類、黃酮、苯丙素、芳香酸（醛）、甾體及脂肪酸等化學(xué)成分。研究認(rèn)為，艾葉提取物具有鎮(zhèn)痛消炎、抗菌、抗病毒作用，還具有抗腫瘤、降血糖及降血壓等作用[9～11]。而在對(duì)艾葉提取物成分作用的研究中發(fā)現(xiàn)，艾葉中咖啡酸酯具有中度抗氧化活性[12～14]。艾葉總多糖、艾葉總黃酮也具有較好的抗氧化活性[15，16]。

本結(jié)果顯示，高、中、低劑量組的空腹血糖水平分別低于模型組，空腹胰島素與肝糖原水平均分別高于模型組。說明艾葉提取物有助于改善2型糖尿病小鼠的空腹血糖、空腹胰島素水平和肝糖原水平，提示艾葉提取物具有一定降血糖作用。高、中、低劑量組的超氧化物歧化酶活性分別高于模型組，丙二醛水平分別低于模型組。說明艾葉提取物能夠提高糖尿病小鼠超氧化物歧化酶活性，降低小鼠體內(nèi)丙二醛水平，提高糖尿病小鼠的抗氧化能力，有助于降低糖尿病小鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化水平，減輕氧化應(yīng)激對(duì)糖尿病小鼠造成的損傷。綜上所述，艾葉提取物能夠改善2型糖尿病小鼠血糖情況，這種改善血糖作用可能與其抗氧化應(yīng)激作用有關(guān)。