潘懿，玉耀賢，許光明，農(nóng)忠仁*

（1.百色市畜禽品種改良技術(shù)推廣站廣西百色 533000；2.靖西市畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣總站廣西百色 533800）

沙門氏菌屬（Salmonella）是由不同血清型感染各種動物而引起多種疾病的沙門氏菌的總稱。由沙門氏菌感染引起的疫病叫沙門氏菌?。ǜ眰?，主要包括家禽、家畜沙門氏菌病，水生生物攜帶沙門氏桿菌現(xiàn)象比較常見，但感染沙門氏桿菌病例少見。多重耐藥菌（MDR）是指對3 類以上抗菌藥物產(chǎn)生耐藥的細(xì)菌，被多重耐藥菌株感染病例不僅加大抗生素的使用量，增加機(jī)體的不良反應(yīng)風(fēng)險，且易發(fā)生交叉感染，醫(yī)治成本提高，難度加大，處理不當(dāng)影響到人類用藥安全，防止菌株出現(xiàn)多重耐藥，保護(hù)人類、動物用藥安全具有重大意義。

1 主述

2018 年11 月2 日廣西百色市市區(qū)農(nóng)某家里養(yǎng)殖的54 只1月齡石龜部分行動遲緩、少食，嚴(yán)重者停食并出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。經(jīng)臨床觀察病龜眼部發(fā)炎、眼結(jié)膜充血、腫大，分泌出白色絮狀物，嚴(yán)重的分泌物掩蓋眼睛無法睜開，12%石龜在發(fā)病初期還出現(xiàn)浮于水面，鼻孔吹大量泡泡。為查明原因于2018 年11 月4 日帶1 只石龜?shù)奖局行那笤\。

2 實驗方法

組織樣品經(jīng)涂片鏡檢、選擇性細(xì)菌培養(yǎng)分離選擇單個可疑菌S1，將菌株進(jìn)行生化、血清學(xué)、菌屬的鑒定及藥敏試驗[1,2,3]。藥敏試驗質(zhì)控菌株：傷寒沙門氏菌，編號：CMCC(B)50071，生產(chǎn)廠家：廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。

3 檢測結(jié)果

3.1 通過壓片鏡檢、菌落形態(tài)、生化特征

菌株生化實驗結(jié)果見表1，分離出的菌株S1 各種特性與沙門氏桿菌特征相符，表明本次引起小石龜發(fā)病的病原體為沙門氏桿菌。經(jīng)血清學(xué)菌屬診斷鑒定血清型為O4Hi[4,5]，結(jié)合生化鑒定結(jié)果認(rèn)定為鼠副傷寒沙門氏桿菌（s.typhimurium），菌株S1 血清學(xué)菌屬鑒定結(jié)果見表2。

3.2 藥敏試驗

藥敏試驗結(jié)果見表3。

表1 菌株生化試驗結(jié)果

表2 菌株S1血清學(xué)菌屬鑒定結(jié)果

表3 藥敏試驗結(jié)果

4 結(jié)論與討論

4.1 本病例的發(fā)生與水體衛(wèi)生條件不佳有密切關(guān)系

鼠副傷寒沙門氏桿菌（S.typhimurium）屬自然疫源菌株。鼠副傷寒沙門氏桿菌廣泛存在于自然環(huán)境中，家禽、家畜、鳥及冷血動物均可為自然宿主，常隨污染的水源或食物鏈感染機(jī)體引起發(fā)病。本次病例發(fā)生與水體衛(wèi)生條件不佳有密切關(guān)系。飼養(yǎng)者為了使小石龜能安全過冬，采取以下措施：①使用加熱棒加熱水，溫度保持在25℃左右；②減少換水頻率；③在飼養(yǎng)水中投放喂料。三方面共同作用致飼養(yǎng)水體衛(wèi)生條件不良，病原微生物得以大量繁殖最終導(dǎo)致石龜感染沙門氏菌。

4.2 致病菌株S1 具有多重耐藥（MDR）

使用9 類抗生素共24 種藥物開展體外藥敏試驗。結(jié)果S1 菌株對9 類抗生素中的23 種藥物產(chǎn)生高度耐藥（95.8%），對頭孢曲松鈉（CRO）中度敏感，無高度敏感藥品。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報道，沙門氏桿菌對氨基糖苷類及頭孢類藥物第一、二代頭孢類已經(jīng)產(chǎn)生高度耐藥，臨床上不宜再使用，本次藥敏試驗結(jié)果與報導(dǎo)一致。

4.3 出現(xiàn)多重耐藥（MDR）菌株可能與飼養(yǎng)者用藥不當(dāng)致菌株產(chǎn)生主動外排膜泵和胞膜主動轉(zhuǎn)運改變相關(guān)

經(jīng)實地調(diào)查發(fā)現(xiàn)飼養(yǎng)者為石龜盈造良好的過冬環(huán)境，給水體加熱，減少換水?dāng)?shù)次，為控制微生物孳生而周期性向水體投放預(yù)防性用藥，同時還發(fā)現(xiàn)石龜所用顆粒料中添加有金霉素，長期使用低濃度藥物致菌株外排膜泵基因突變，主動外排膜泵增強(qiáng)增多，外膜滲透性改變，最終獲得性多重耐藥。

4.4 菌株產(chǎn)生多重耐現(xiàn)象越來越嚴(yán)重，應(yīng)引起社會高度重視

潘志明[6]等于1962—1998 年對325 株沙門氏菌藥敏試驗，上世紀(jì)60 年代還沒有發(fā)現(xiàn)多重耐藥菌株，80 年、90 年后才陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多重耐藥菌株，數(shù)量明顯增多。2012 年林居純等[7]從動物源分離的沙門氏菌出現(xiàn)多重耐藥菌株占比高達(dá)95.5%。2018 年鐘舒紅等[8]從廣西畜禽產(chǎn)品中分離的沙門氏菌耐藥性檢測78.7%菌株出現(xiàn)10～16 重耐藥。本次分離出沙門氏菌S1 為23 耐，表明了菌株產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象越來越嚴(yán)重，應(yīng)引起全社會高度重視，采取有效措施，降低菌株產(chǎn)生耐藥幾率。

4.5 規(guī)范獸用抗菌藥的使用，強(qiáng)化菌株耐藥性預(yù)警預(yù)報，減少菌株獲得性耐藥幾率

遵守獸用抗菌藥相關(guān)法律法規(guī)規(guī)定，嚴(yán)格執(zhí)行人藥不能獸用的原則?？茖W(xué)選擇藥物使用，注意用藥劑量、時間，利用藥物相互作用推廣聯(lián)合用藥，縮小耐藥性菌株產(chǎn)生的窗口；加強(qiáng)對多重耐藥菌監(jiān)控，將本區(qū)域分離常見細(xì)菌菌株及耐藥性、敏感性公開，做好菌株耐藥性預(yù)警預(yù)報，減少菌株獲得性耐藥幾率，保護(hù)人類和動物用藥安全。

4.6 強(qiáng)化獸用抗菌素監(jiān)管力度，合理使用藥物

嚴(yán)管獸用抗菌素作為飼料添加劑的審批，嚴(yán)格獸用抗菌素作為飼料添加劑使用的種類和添加濃度。全面落實獸用抗菌藥物分級管理，實行獸醫(yī)處方審核制度，特別是加強(qiáng)村級防疫員用藥的監(jiān)管，指導(dǎo)臨床合理使用藥物。

4.7 加大推廣生態(tài)養(yǎng)殖，建立生物安全屏障，減少獸藥使用數(shù)量，降低菌株獲得耐藥產(chǎn)生機(jī)會

加大對生態(tài)動物養(yǎng)殖場的政策、資金和技術(shù)扶持，利用微生態(tài)制劑建立友好型微生態(tài)動物飼養(yǎng)場。建立以有效生物安全屏障為主，動物免疫為骨，診斷治療為輔的生態(tài)養(yǎng)殖，減少獸藥使用數(shù)量，降低菌株獲得耐藥產(chǎn)生機(jī)會。

4.8 加大抗菌素替代品研發(fā)，減少獸藥品種和數(shù)量的使用

加大抗菌素替代品研發(fā)：一方面是充分利用我國傳統(tǒng)的中草藥制劑優(yōu)勢，研發(fā)抗菌素替代品；另一方面加大細(xì)菌病毒噬菌體研發(fā)力度，做好噬菌體分類，建立噬菌體庫，推廣噬菌體在實際臨床中的應(yīng)用，減少獸藥品種和數(shù)量的使用，降低超級菌株的形成風(fēng)險。