胡波濤，周國燕，彭艷伶，寧瑤，趙秋云

（1.涼山健牧動物科學研究所，四川 西昌 615000；2.四川省涼山州畜牧獸醫(yī)科學研究所，四川 西昌 615000；3.四川省西昌市動物疫病預防控制中心，四川 西昌 615000）

豬圓環(huán)病毒（PCV）是圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，為無囊膜單股環(huán)狀負鏈DNA 病毒［1］，分為PCV1、PCV2和PCV3共3種血清型［1］。PCV1為豬體內常在無致病性病原體［2］。PCV3為新發(fā)病原，在2016年從患有皮炎腎病綜合征（PDNS）和繁殖障礙的母豬及流產(chǎn)胎兒體內首次鑒定得出［3］。PCV2 感染與斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PRDC）、繁殖障礙（PRFD）和急性肺水腫（APE）等疾病的發(fā)生密切相關［1］，這類病稱為豬圓環(huán)病毒相關疾病（PCVAD），嚴重危害生豬健康。當前控制PCV2感染和流行的方法主要是應用滅活疫苗和基因工程疫苗進行免疫接種，而近幾年國內外研究發(fā)現(xiàn)，疫苗免疫后的豬場會大量出現(xiàn)并流行PCV2基因亞型毒株，這給由PCV2 誘發(fā)的豬傳染病的防控帶來新的挑戰(zhàn)。筆者于2019 年6～10 月在四川省西昌市進行了PCV2 感染情況調查，旨在為西昌市豬傳染病的防控提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調查對象 本次調查對象為西昌市年出欄育肥豬100 頭及以上的豬場，其中年出欄量超1 000頭的豬場8個，年出欄量在500～1 000頭的豬場16 個，年出欄量低于500 頭的豬場8 個。將出欄1 000 頭以上的豬場定為A 類豬場，出欄500～1 000頭的豬場定為B類豬場，出欄低于500頭的豬場定為C 類豬場。分別統(tǒng)計接種了PCV疫苗與未接種PCV 疫苗豬群的豬圓環(huán)病毒II 型的感染情況。

1.2 樣本采集 2019 年6～10 月，對西昌市10個鄉(xiāng)鎮(zhèn)32 家養(yǎng)豬場的800 頭豬通過前腔靜脈采血的方式采集抗凝血（5 mL/頭）。因養(yǎng)殖場具體情況差異較大，采集標本數(shù)略有差異。其中能繁母豬200 份，每個場采集10 份；育肥豬200 份，每個場采集5～20份；30日齡左右斷奶仔豬400份，每個場采集5～20份。所有樣本標記清楚采集時間和地點，置于2～8 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 檢測試劑盒 病毒基因組DNA 提取試劑盒和豬圓環(huán)病毒II型熒光PCR檢測試劑盒，均購自青島立見診斷技術發(fā)展中心。

1.4 方法 根據(jù)GB/T 21674-2008標準，參照試劑盒說明書進行樣品處理和核酸提取，將提取好的DNA 檢測合格后，置于-20 ℃保存?zhèn)溆谩８鶕?jù)豬圓環(huán)病毒II 型熒光PCR 檢測試劑盒說明書的方法配制熒光PCR 反應體系（吸取18 μL PCV2 qPCR Buffer 與PCV2 qPCR mix 進行復溶，然后加入2 μL 樣品DNA），同時按照豬圓環(huán)病毒II 型熒光PCR 檢測試劑盒的反應程序進行設置（94 ℃預變性3 min；94 ℃變性10 s，60 ℃退火30 s，共40 個循環(huán)；60 ℃收集FAM 熒光信號）。以上實驗委托成都納比微特檢測技術服務有限公司檢測。

2 結果與分析

2.1 不同規(guī)模養(yǎng)殖場的PCV2 感染狀況 本次檢測查明了西昌市各類豬場感染PCV2 的情況。結果見表1。

表1 各類養(yǎng)殖場PCV2核酸檢測結果 份

由表1 可知，西昌市小型養(yǎng)豬場均存在不同程度的PCV2 感染，不同規(guī)模場的帶毒狀況差異很大，A 類場感染率為42.17%，B 類場感染率為69.52%，C類場感染率達79.61%?？梢娫摬《镜母腥厩闆r與養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理和生物安全防控水平密切相關。本次檢測未發(fā)現(xiàn)PCV2陰性場，各飼養(yǎng)階段豬群的PCV2 感染率達61.5%～70.0%，表明各場的PCV2帶毒情況都比較嚴重。

2.2 接種PCV疫苗與未接種PCV疫苗豬群的抗原檢測結果 檢測發(fā)現(xiàn)，接種豬圓環(huán)疫苗與未接種豬圓環(huán)疫苗豬群的PCV2 感染率差異極大，詳見表2。

由表2可知，進行疫苗免疫的豬群感染PCV2的幾率大大降低，接種豬圓環(huán)疫苗的能繁母豬、仔豬和育肥豬的感染率為36.61%、31.00%、25.00%，而未接種豬圓環(huán)疫苗的能繁母豬、仔豬和育肥豬的感染率上升到82.94%、92.00%、89.28%，表明豬圓環(huán)疫苗能夠在一定程度上提高豬群的免疫力，降低豬群的感染率。本次調查還發(fā)現(xiàn)西昌市內小型豬場圓環(huán)病毒疫苗的保護率普遍偏低，可能是由于疫苗毒株本身的基因亞型與部分豬場PCV2 感染情況不完全相符，也有可能是與部分豬場的免疫程序實施不到位、未能確保免疫效果等原因有關，有待通過進一步的試驗查明。

表2 接種豬圓環(huán)疫苗與未接種豬圓環(huán)疫苗豬群的抗原檢測結果 份

3 結論

本次檢測表明，西昌市中小豬場的PCV2 帶毒嚴重，感染普遍。若不實施有效防控，極有可能導致豬圓環(huán)病毒病的廣泛流行。常態(tài)化做好豬場PCV2的定期檢測，查明其感染情況，據(jù)此實施PCV2 綜合防控十分必要。若有條件，可采用基因檢測進一步查明本地區(qū)流行毒株的基因類型，選擇相應疫苗進行免疫接種，達到有效防制本病的目的。

豬圓環(huán)病毒不僅可直接導致豬群發(fā)病，而且會導致豬群發(fā)生免疫抑制，降低其免疫抵抗力，引起豬群易發(fā)、多發(fā)其他疾病。豬場傳染病的混合感染常常同PCV2密切相關。豬圓環(huán)病毒病目前尚無特效治療藥物，因此做好豬圓環(huán)病毒病的免疫預防，加強養(yǎng)豬場的生物安全管理和飼養(yǎng)管理就顯得尤為重要。