蘇小琴,左小博,涂云飛,刁春華,譚 蓉,孔俊豪,*,楊秀芳,*

(1.中華全國(guó)供銷合作總社杭州茶葉研究院,浙江杭州 310016;2.浙江省茶資源跨界應(yīng)用技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江杭州 310016)

茶作為世界三大飲料之一,具有多種營(yíng)養(yǎng)健康功效,深受消費(fèi)大眾的青睞。綠茶是我國(guó)優(yōu)勢(shì)茶葉品類,因其獨(dú)特的保健功效被聯(lián)合國(guó)衛(wèi)生組織推薦為六大健康飲品之首[1-3]。近年來(lái),我國(guó)綠茶出口和國(guó)內(nèi)消費(fèi)量均呈現(xiàn)增加趨勢(shì),在帶動(dòng)中國(guó)茶產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展中具有突出作用[4]。扁形綠茶是綠茶的主要品類,因其獨(dú)特的品質(zhì)特點(diǎn)深受消費(fèi)者喜愛(ài)。然而,綠茶貨架期較短,在貯藏、銷售、流通各個(gè)環(huán)節(jié)中,由于貯藏條件選擇不當(dāng)及環(huán)境因素的動(dòng)態(tài)變化,常使產(chǎn)品出現(xiàn)“色澤加深、滋味變淡、收斂性加強(qiáng)、香氣降低”等品質(zhì)劣變特征,降低其營(yíng)養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值[5-7]。據(jù)統(tǒng)計(jì)[8],每年由于茶葉產(chǎn)品的保鮮不當(dāng)造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)上億元,影響了茶產(chǎn)業(yè)的轉(zhuǎn)型升級(jí)和健康可持續(xù)發(fā)展,成為亟需解決的重要課題。

近年來(lái),多位研究者對(duì)綠茶貯藏過(guò)程中品質(zhì)劣變規(guī)律、影響因素等方面開(kāi)展了相關(guān)研究。研究表明,綠茶貯藏過(guò)程中茶多酚、兒茶素、氨基酸、葉綠素、維生素C等含量呈整體下降的趨勢(shì)[9-12]。水分、溫度、光照和氧氣被認(rèn)為是導(dǎo)致茶葉貯藏品質(zhì)陳化劣變的主要環(huán)境因子[13-16]。并針對(duì)控制綠茶品質(zhì)劣變方面,進(jìn)行了諸如水分控制、低溫冷藏、除氧充氮等保鮮技術(shù)的開(kāi)發(fā)研究[17-19]。但目前僅限于綠茶貯藏過(guò)程中主要品質(zhì)變化規(guī)律,而與其對(duì)應(yīng)的感官品質(zhì)變化及其相關(guān)性表征方面缺乏系統(tǒng)研究。另外,針對(duì)綠茶貯藏品質(zhì)變化提出保質(zhì)期預(yù)測(cè)方面研究鮮有報(bào)道。食品保質(zhì)期即食品貨架期,是指食品自出廠之日起,經(jīng)過(guò)各流通環(huán)節(jié)直至到消費(fèi)階段,它所能保持質(zhì)量不變的時(shí)間長(zhǎng)度[20]。通過(guò)對(duì)品質(zhì)劣變規(guī)律的研究,準(zhǔn)確預(yù)測(cè)食品貨架期是非常必要的。茶葉產(chǎn)品的保質(zhì)期預(yù)測(cè)一直是國(guó)內(nèi)茶葉市場(chǎng)被忽略的問(wèn)題,這對(duì)終端消費(fèi)引導(dǎo),茶葉產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定及茶葉出口等方面造成一定影響。食品加速貨架期試驗(yàn)法(Accelerated shelf-life testing,ASLT)是)是一種有效、快速的食品貨架期預(yù)測(cè)方法,其在食品品質(zhì)變化規(guī)律及保質(zhì)期中的研究較為廣泛[21-24]。

本文針對(duì)扁形綠茶貯藏中易發(fā)生陳化,研究環(huán)境因子中溫度、濕度和光照對(duì)扁形綠茶品質(zhì)成分以及感官品質(zhì)變化的影響,綜合分析其相關(guān)性,作為扁形綠茶陳化判別的依據(jù),根據(jù)ASLT試驗(yàn)和Q10模型對(duì)預(yù)包裝扁形綠茶的保質(zhì)期進(jìn)行預(yù)判,為精準(zhǔn)保障扁形綠茶貯藏品質(zhì)穩(wěn)定,科學(xué)指導(dǎo)消費(fèi)者辨識(shí)綠茶品質(zhì),以及為扁形綠茶貯藏過(guò)程中品質(zhì)特性的保鮮技術(shù)提供理論依據(jù)和實(shí)踐參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

龍井綠茶 加工時(shí)間:2018年4月,品種“龍井43”,等級(jí):一級(jí),購(gòu)自浙江省新昌縣誠(chéng)茂控股集團(tuán)有限公司;乙腈 色譜純,天津市康科德科技有限公司生產(chǎn);福林酚、碳酸鈉、甲醇 分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;其余試劑 均為國(guó)產(chǎn)分析純。

SHH-SDT綜合藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱 重慶永生儀器有限公司生產(chǎn);Waters1525 高效液相色譜儀 美國(guó)Waters科技(上海)生產(chǎn);5804R高速離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司生產(chǎn);DK-S24 電熱恒溫水浴鍋 上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司生產(chǎn);AL204 電子天平 梅特勒托利儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 貯藏環(huán)境因子試驗(yàn) 取龍井綠茶樣品適量平鋪于直徑15 cm表面皿中,使其形成厚度為10 mm的薄層,置于藥物穩(wěn)定箱中,參照《中國(guó)藥典》中原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則[25],按表1條件開(kāi)展短期貯藏試驗(yàn),分別于貯藏0、5、10 d取樣,用于理化指標(biāo)測(cè)定和感官審評(píng)。

表1 綠茶貯藏環(huán)境條件Table 1 Environmental factors of green tea on storage

1.2.2 加速貨架期測(cè)試法研究貯藏貨架期 以龍井為原料,依據(jù)T/CNFIA 001-2017《食品保質(zhì)期通用指南》[26],采用加速貨架期測(cè)試法(ASLT)研究綠茶貯藏過(guò)程品質(zhì)變化及貨架期,加速試驗(yàn)條件參照《中國(guó)藥典》中原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則[25],具體為:溫度(40±2) ℃,相對(duì)濕度60%±5%;溫度(30±2) ℃,相對(duì)濕度60%±5%,分別于第0、1、2、3、6月時(shí)取樣,用于理化指標(biāo)測(cè)定和感官審評(píng)。

1.2.3 理化指標(biāo)測(cè)定 水分含量測(cè)定參照GB 5009.3-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定》;茶多酚含量測(cè)定參照GB/T 8313-2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)》;兒茶素和咖啡堿含量測(cè)定參照GB/T 8313-2008《茶茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》。葉綠素含量測(cè)定參考Johan等[27]等方法進(jìn)行測(cè)定?？扇苄蕴呛繙y(cè)定參考劉海英等[28]的蒽酮比色法。

1.2.4 感官審評(píng)方法 感官審評(píng)參照GB/T 23776-2018《茶葉感官審評(píng)方法》,按照外形、香氣、湯色、滋味、葉底感官因子由專業(yè)審評(píng)人員密碼審評(píng)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均為3組平行試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差,采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行方差分析、相關(guān)性分析和PCA主成分分析,使用Duncan檢驗(yàn),P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶品質(zhì)特性的影響

2.1.1 環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶主要品質(zhì)成分特性的影響 環(huán)境因子對(duì)綠茶理化成分的影響見(jiàn)表2、圖1。由表2可知,高溫、高濕或高光下貯藏5、10 d后,與第0 d相比,綠茶的水分含量呈顯著增加趨勢(shì)(P<0.05),尤其高濕條件增幅最顯著,由初始2.94%上升至11.09%和12.27%,分別增加2.7倍和3.2倍。茶多酚含量整體呈下降趨勢(shì)(P<0.05),但在高濕處理10 d時(shí),茶多酚含量出現(xiàn)回升達(dá)20.35%,與第0 d的20.14%含量基本持平,這可能由于在含水量增加的情況下,茶多酚氧化中間產(chǎn)物聚合的速度比氧化速度慢,使可溶性茶多酚含量呈回升趨勢(shì)[7]。高溫、高濕或高光下貯藏5、10 d后,與第0 d相比,氨基酸含量、葉綠素a、葉綠素b和葉綠素總量均顯著下降(P<0.05),其中高溫處理第5 d時(shí),葉綠素a和葉綠素b的轉(zhuǎn)化率分別為11.04%、42.23%,處理10 d時(shí),葉綠素a和葉綠素b的轉(zhuǎn)化率分別為17.36%、60.45%。這表明,綠茶貯藏過(guò)程中葉綠素b較葉綠素a更容易發(fā)生氧化降解。高濕或高光下貯藏5、10 d,與第0 d相比,酚氨比顯著增加?？扇苄蕴呛匡@著下降(P<0.05)?？Х葔A含量變化平緩。

表2 環(huán)境因子對(duì)綠茶主要品質(zhì)成分的影響Table 2 Effect of environmental factors on chemical components of flat green tea

兒茶素是構(gòu)成綠茶滋味的主要化學(xué)成分。由圖1可知,高溫、高濕或高光下貯藏5、10 d后,與第0 d比,EGC、EGCG、ECG和兒茶素總量均顯著下降(P<0.05),而EC、C含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。這與已有研究茶葉貯藏過(guò)程茶多酚,特別是兒茶素物質(zhì)的氧化、降解十分明顯結(jié)果類似[29]。

圖1 貯藏環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶兒茶素含量的影響Fig.1 Effect of environmental factorson content of catechin of flat green tea 注:“A、B、C”分別代表高溫、高濕、高光處理5 d；“D、E、F”分別代表高溫、高濕、高光處理10 d；相同指標(biāo)不同小寫字母代表差異顯著,P<0.05。

2.1.2 環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶感官品質(zhì)特性的影響 按照GB/T 23776-2018《茶葉感官審評(píng)方法》標(biāo)準(zhǔn),對(duì)高溫、高濕或高光下貯藏5、10 d扁形綠茶進(jìn)行感官審評(píng),結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖2可知,在高溫、高濕或高光下貯藏5、10 d后,綠茶外形、湯色、香氣、滋味和葉底感官品質(zhì)上均有不同程度下降。高溫貯藏5、10 d,感官評(píng)分分別為77.8和72.3分,比第0 d(87.5分)分別下降11.09%、17.37%。高濕貯藏5、10 d,感官評(píng)分分別為81.1和77.3分,比第0 d分別下降7.31%、11.66%。高光貯藏5、10 d,感官評(píng)分分別為84.1和82.8分,比第0 d分別下降3.89%、5.37%。整體上,外形干茶主要表現(xiàn)為色澤由黃綠轉(zhuǎn)為黃稍褐、稍暗,條索稍松,湯色上由黃綠明亮轉(zhuǎn)為黃、橙黃,滋味上由醇濃微苦轉(zhuǎn)為欠醇、苦顯、陳味,香氣上由嫩香轉(zhuǎn)為失風(fēng)、陳氣,葉底色澤由黃綠尚亮轉(zhuǎn)為黃尚亮。

圖2 環(huán)境因子對(duì)綠茶感官品質(zhì)的影響(分)Fig.2 Effect of environmental factorson sensory quality of flat green tea(score)注:A代表高溫條件,B代表高濕條件,C代表高光條件。

2.2 環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶品質(zhì)影響的相關(guān)性分析

采用SPSS相關(guān)性分析環(huán)境因子對(duì)綠茶品質(zhì)影響,結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知,扁形綠茶貯藏中感官評(píng)分與兒茶素總量、葉綠素b和葉綠素總量呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),與葉綠素a呈顯著正相關(guān)(P<0.05),說(shuō)明兒茶素總量、葉綠素總量和葉綠素b與龍井綠茶的感官品質(zhì)關(guān)系最為密切,其相關(guān)性分別為0.915、0.971、0.901(P<0.01)。采用SPSS進(jìn)一步做回歸分析,構(gòu)建一元線性方程,將感官評(píng)分定義為自變量Y,兒茶素總量、葉綠素b和葉綠素總量定義為因變量X,根據(jù)線性回歸分析得到方程:y=55.224+0.696x1+33.957x2+1.886x3(y為感官評(píng)分,x1為兒茶素總量,x2為葉綠素b,x3為葉綠素總量)。通過(guò)方程模型,可通過(guò)感官評(píng)分預(yù)測(cè)扁形綠茶貯藏中兒茶素總量、兒茶素總量b含量和葉綠素總量。

表3 環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶品質(zhì)影響的Pearson相關(guān)性分析Table 3 Pearson correlation analysis of effect of environmental factors on flat green tea quality

2.3 不同環(huán)境條件處理的扁形綠茶各指標(biāo)PCA分析

采用SPSS進(jìn)行主成分分析,共提取3個(gè)主成分,因前2個(gè)主成分可解釋環(huán)境因子對(duì)綠茶品質(zhì)成分總變異的83.115%,繪制分布圖(圖3)和載荷圖(圖4)。由圖3可知,高濕處理(5、10 d)和高溫處理(10 d)聚集在第1象限,高光處理(5、10 d)和原樣聚集在第2象限。結(jié)合主成分載荷圖可知(圖4),第1象限主要為含量較高的水分、茶多酚、酚氨比,咖啡堿,對(duì)應(yīng)為高濕(5、10 d)和高溫處理(10 d)。第2象限主要為含量較高的EGCG、ECG、兒茶素總量、葉綠素a、葉綠素b、葉綠素總量和可溶性糖含量,對(duì)應(yīng)為高光處理(5、10 d)和對(duì)照,說(shuō)明高光處理樣品組別的品質(zhì)成分保留量較好。

圖3 環(huán)境因子對(duì)扁形綠茶品質(zhì)影響的主成分分析Fig.3 Principal component analysis of effect ofenvironmental factors on flat green tea quality

圖4 環(huán)境因子影響的扁形綠茶品質(zhì)化學(xué)成分載荷矩陣圖Fig.4 Load diagram analysis of effect ofenvironmental factors on flat green tea quality

2.4 加速試驗(yàn)對(duì)扁形綠茶品質(zhì)特性影響及貨架期預(yù)測(cè)

2.4.1 加速試驗(yàn)對(duì)扁形綠茶理化品質(zhì)特性影響 采用熱圖(Heatmap)對(duì)加速條件處理扁形綠茶品質(zhì)變化進(jìn)行分析,結(jié)果見(jiàn)圖5。由圖5可知,30、40 ℃加速處理扁形綠茶3月、6月各聚為一類,其余聚為一類,其中30、40 ℃加速處理扁形綠茶1月聚為一類。30和40 ℃貯藏前期(0、1、2月)葉綠素a、葉綠素b、葉綠素總量和可溶性糖含量呈一定下降趨勢(shì),水分含量呈增加趨勢(shì),茶多酚、兒茶素等變化較小。3月后,葉綠素a、葉綠素b、葉綠素總量、氨基酸、茶多酚含量顯著下降,但兒茶素總量、可溶性糖含量增加。6月后,除水分含量增加,其余理化指標(biāo)均分解。

圖5 加速條件處理扁形綠茶熱圖分析Fig.5 The heatmap analysis of effect of acceleratedshelf life test on flat green tea quality

2.4.2 加速試驗(yàn)對(duì)扁形綠茶感官品質(zhì)特性影響 經(jīng)感官審評(píng),結(jié)果見(jiàn)圖6。由圖6可知,30和40 ℃加速條件下貯藏扁形綠茶,在外形、湯色、香氣、滋味、葉底五項(xiàng)感官因子評(píng)分均呈下降趨勢(shì)。30 ℃貯藏1、2、3、6月,感官總分分別為84.3、81.8、76.5、74.3分。與第0月比,感官總分分別下降3.66%、6.51%、12.57%、15.09%。40 ℃貯藏1、2、3、6月,感官總分分別為81.5、78.6、72.8、67.7分。與第0月比,感官總分分別下降6.86%、10.17%、16.80%、22.63%。30 ℃貯藏3月和40 ℃貯藏2月后,扁形綠茶陳化變質(zhì),主要為外形由黃綠轉(zhuǎn)為綠黃灰,湯色綠黃略深,香氣油膩味顯,有陳氣,滋味苦澀,葉底綠黃稍暗。

圖6 加速條件對(duì)扁炒青綠茶感官品質(zhì)的影響Fig.6 Effect of accelerated shelf life teston sensory quality of flat green tea注:a代表溫度30 ℃;相對(duì)濕度60%±5%;b代表溫度40 ℃;相對(duì)濕度60%±5%。

2.4.3 Q10 模型預(yù)測(cè)扁形綠茶貨架期 結(jié)合理化和感官在加速條件下的變化,推測(cè)扁形綠茶30 ℃試驗(yàn)貨架期約為4個(gè)月,40 ℃試驗(yàn)貨架期約為2個(gè)月,根據(jù)ASLT 法預(yù)測(cè)扁形綠茶綠茶貨架期,將40 ℃及30 ℃下所得貨架期代入公式(1),可得Q10 為:

則4 ℃下扁形綠茶綠茶貨架期為:

Qs(4 ℃)=Qs(T0)× Q10(T0-T)/10=2月×12=24月

則10 ℃下扁形綠茶綠茶貨架期為:

Qs(10 ℃)=Qs(T0)× Q10(T0-T)/10=2月×8=16月

20 ℃下扁形綠茶綠茶貨架期為:

Qs(20 ℃)=Qs(T0)× Q10(T0-T)/10=2月×4=8月

即4 ℃貯藏條件下,扁形綠茶綠茶理論貨架期為24個(gè)月,10 ℃貯藏條件下,扁形綠茶綠茶理論貨架期為16個(gè)月,20 ℃下扁形綠茶綠茶理論貨架期為8個(gè)月。

3 結(jié)論

本研究針對(duì)環(huán)境因子中溫度、濕度和光照對(duì)扁形綠茶貯藏品質(zhì)特性的影響,以及采用ASLT試驗(yàn)預(yù)測(cè)其預(yù)包裝保質(zhì)期,以期為扁形綠茶貯藏條件的優(yōu)化和科學(xué)指導(dǎo)消費(fèi)者辨認(rèn)綠茶品質(zhì)提供理論依據(jù)和準(zhǔn)則。結(jié)果表明環(huán)境因子扁形綠茶的貯藏品質(zhì)保持具有差異性,其影響順序?yàn)?溫度>濕度>光照。通過(guò)Person相關(guān)性和線性回歸方程獲得扁形綠茶貯藏品質(zhì)方程模型為y=55.224+0.696x1+33.957x2+1.886x3(y為感官評(píng)分,x1為兒茶素總量,x2為葉綠素b,x3為葉綠素總量)。ASLT試驗(yàn)表明,隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),扁形綠茶理化指標(biāo)的含量和感官品質(zhì)呈下降趨勢(shì),水分含量呈增加趨勢(shì),4 ℃貯藏條件下,扁形綠茶綠茶理論貨架期為24個(gè)月。今后,采用電子鼻、電子舌手段將感官評(píng)價(jià)數(shù)字化,結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)分析手段與內(nèi)含成分建立預(yù)測(cè)模型,把控茶葉品質(zhì)劣變風(fēng)險(xiǎn)關(guān)鍵點(diǎn),實(shí)現(xiàn)茶葉保質(zhì)期的精準(zhǔn)預(yù)測(cè)。