汪艷平，楊慶華1,*

(1.南京林業(yè)大學(xué)生物環(huán)境學(xué)院，江蘇 南京 210037； 2. 上海辰山植物園，上海 201602)

豬籠草為豬籠草科(Nepenthaceae)豬籠草屬(Nepenthes)植物，豬籠草科僅1屬，全世界約有160種[1-6]。豬籠草絕大部分的品種分布在國(guó)外，我國(guó)只產(chǎn)一個(gè)種類(lèi)即豬籠草(Nepenthes.mirabilis)。豬籠草葉形奇特具有袋狀捕蟲(chóng)籠，且顏色鮮艷，觀賞性較強(qiáng)，還能誘捕昆蟲(chóng)，有極高的科普價(jià)值。該種類(lèi)還具有潤(rùn)肺止咳，清熱解毒等功效[7]。豬籠草是一類(lèi)集科普、觀賞及科研價(jià)值于一體的植物，人們對(duì)其的接受度高、吸引力強(qiáng)，市場(chǎng)熱度在不斷的提升。由于市場(chǎng)需求較大，導(dǎo)致其野生資源遭到嚴(yán)重的破壞，數(shù)量急劇減少，將面臨滅絕的威脅。因此，亟需加強(qiáng)豬籠草的研究和保護(hù)。豬籠草雌雄異株，不宜授粉，且種子不宜保存，因而扦插繁殖為最佳的繁殖方法。扦插屬于無(wú)性繁殖，其具有完全保存親本優(yōu)良的遺傳特性、繁殖速度快能有效縮短育種年限、在種子資源缺乏的情況下能夠形成植株的擴(kuò)繁等優(yōu)勢(shì)。通過(guò)試驗(yàn)篩選適宜豬籠草扦插繁殖的扦插溫度、扦插基質(zhì)，并研究不同濃度激素對(duì)豬籠草扦插生根的影響，以提高扦插成活率，為優(yōu)良豬籠草品種的繁育、推廣和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料

本研究所采用的實(shí)驗(yàn)品種材料為前期篩選所得[8]，相關(guān)數(shù)據(jù)如表1所示。3個(gè)品種的豬籠草分別選取當(dāng)年生半木質(zhì)化且生長(zhǎng)勢(shì)良好，健壯，無(wú)病枝為插穗。每個(gè)插穗的粗細(xì)及方向基本保持一致，插穗長(zhǎng)度控制在7～8 cm，保留一片上部葉片，葉片保留長(zhǎng)2～3 cm。插穗上口為斜口，斜口方向?yàn)檠可L(zhǎng)方向，下口為平口，上下切口均距芽點(diǎn)0.5 cm左右。扦插深度為3～4 cm。

表1 豬籠草扦插實(shí)驗(yàn)材料及習(xí)性

1.2 試驗(yàn)處理

1.2.1 不同溫度對(duì)豬籠草扦插生根的影響

試驗(yàn)共設(shè)3個(gè)不同梯度的扦插溫度(20℃、25℃、30℃)，以泥炭：赤玉：蘭石=1:1:1的混合基質(zhì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。選取15個(gè)插穗為一組，重復(fù)3次。從扦插開(kāi)始60 d后統(tǒng)計(jì)插穗的生根率、萌枝率、根數(shù)及根長(zhǎng)。

1.2.2 不同基質(zhì)對(duì)豬籠草扦插生根的影響

本實(shí)驗(yàn)共設(shè)3種不同扦插基質(zhì)，分別是：水苔、泥炭：赤玉土：蘭石混合物(按1:1:1的比例進(jìn)行混合)、純植金石。根據(jù)1.2.1溫度試驗(yàn)結(jié)果，紅瓶豬籠草與N.sibuyanensis×maxima扦插溫度為25℃，米蘭達(dá)豬籠草扦插溫度為30℃，分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。各試驗(yàn)以12個(gè)插穗為一組，重復(fù)3次。從扦插開(kāi)始60 d后統(tǒng)計(jì)插穗的生根率、發(fā)芽率、根數(shù)及根長(zhǎng)。

1.2.3 不同激素對(duì)豬籠草扦插生根的影響

以水為對(duì)照，使用IBA、NAA兩種生長(zhǎng)素，濃度分別為100 mg/L、200 mg/L、300 mg/L。將3個(gè)品種的豬籠草分別在以上生長(zhǎng)素溶液中浸泡，靜置處理2 h后用于扦插。扦插基質(zhì)為泥炭∶赤玉土∶蘭石=1∶1∶1的混合基質(zhì)，溫度為25～30℃，以12個(gè)插穗為一組，重復(fù)3次。從扦插開(kāi)始60 d后統(tǒng)計(jì)插穗的生根率、發(fā)芽率、根數(shù)及根長(zhǎng)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 13.0對(duì)不同溫度、基質(zhì)和激素處理下豬籠草的生根和生長(zhǎng)響應(yīng)進(jìn)行單因素方差分析，并采用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度對(duì)豬籠草扦插生根的影響

通過(guò)比較不同扦插溫度對(duì)3個(gè)品種豬籠草生根的影響發(fā)現(xiàn)，對(duì)于同一品種來(lái)說(shuō)，溫度對(duì)N.sibuyanensis×maxima和紅瓶豬籠草的萌枝率、生根率和根長(zhǎng)均有顯著影響(p<0.05)(表2)；相同溫度條件下，25℃下對(duì)三個(gè)豬籠草品種的萌枝率、生根率、根數(shù)量和根長(zhǎng)度均有顯著影響(p<0.05)。

當(dāng)溫度是20℃時(shí)，米蘭達(dá)豬籠草和紅瓶豬籠草都沒(méi)有生根，僅產(chǎn)生一些萌枝，N.sibuyanensis×maxima有部分生根和萌枝；當(dāng)溫度是25℃和30℃，3個(gè)品種都有生根和萌枝，但生根率、根數(shù)等不同。N.sibuyanensis×maxima及紅瓶豬籠草的各項(xiàng)指標(biāo)在溫度為25℃時(shí)均為最高值，萌枝率分別為46.67%及86.67%、生根率均為60.00%、根長(zhǎng)分別為2.33 cm及3.40 cm，根數(shù)為0.78根及1.14根?？梢?jiàn)，這兩種豬籠草的適宜扦插溫度為25℃。在試驗(yàn)的所有溫度范圍內(nèi)，紅瓶豬籠草的萌枝和生根情況均優(yōu)于N.sibuyanensis×maxima，可推測(cè)紅瓶豬籠草更耐受高溫。米蘭達(dá)豬籠草的扦插萌枝率、生根率、根數(shù)、根長(zhǎng)是隨溫度的升高而增大，當(dāng)扦插溫度為30℃時(shí)米蘭達(dá)豬籠草的各項(xiàng)扦插指標(biāo)為最高值。因此，米蘭達(dá)豬籠草的適宜扦插溫度為30℃。

2.2 不同基質(zhì)對(duì)豬籠草扦插生根的影響

通過(guò)比較不同基質(zhì)對(duì)3個(gè)品種豬籠草生根的影響發(fā)現(xiàn)(表3)，對(duì)于同一品種來(lái)說(shuō)，除不同基質(zhì)對(duì)紅瓶豬籠草的根長(zhǎng)度產(chǎn)生顯著影響外，不同基質(zhì)對(duì)同一品種生根的影響差異不顯著；相同基質(zhì)條件下，水苔對(duì)豬籠草萌枝率、生根率和根數(shù)量，泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1對(duì)豬籠草生根率，植金石對(duì)生根率和根長(zhǎng)度均有顯著影響(p<0.05)。

紅瓶豬籠草的扦插基質(zhì)為泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1時(shí)，各項(xiàng)測(cè)量指標(biāo)均為最佳值，萌枝率為46.67%、生根率為40%、根數(shù)為0.6根，根長(zhǎng)為0.43 cm；米蘭達(dá)豬籠草的扦插基質(zhì)為泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1時(shí)，扦插生根率及生根根數(shù)最多，分別為20%及0.6根，萌枝率和根長(zhǎng)略低于植金石；N.sibuyanensis×maxima扦插生根情況在各個(gè)基質(zhì)中都比較好，水苔基質(zhì)最佳，萌枝率、生根率及生根根數(shù)分別為80%、53.33%、2.60根。綜合不同的品種在不同基質(zhì)的生根情況，認(rèn)為豬籠草品種的最佳扦插基質(zhì)為泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1，部分品種其他基質(zhì)也表現(xiàn)優(yōu)異，如N.sibuyanensis×maxima的最佳扦插基質(zhì)為水苔。

表2 不同溫度對(duì)三種豬籠草扦插生根影響

*小寫(xiě)字母表示同一溫度下不同品種間的差異顯著性檢驗(yàn)；大寫(xiě)字母表示同一品種不同溫度下差異顯著性檢驗(yàn)。具有相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。

表3 不同基質(zhì)對(duì)三種豬籠草扦插生根影響

*小寫(xiě)字母表示同一基質(zhì)不同品種間的差異顯著性檢驗(yàn)；大寫(xiě)字母表示同一品種不同基質(zhì)差異顯著性檢驗(yàn)。具有相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。

2.3 不同激素對(duì)豬籠草扦插生根影響

通過(guò)比較不同激素處理對(duì)3個(gè)品種豬籠草生根的影響發(fā)現(xiàn)(表4)，對(duì)于同一品種來(lái)說(shuō)，除不同激素對(duì)米蘭達(dá)豬籠草的萌枝率未產(chǎn)生顯著影響外，不同激素對(duì)其他兩種豬籠草生根的影響差異顯著(p<0.05)；相同激素條件下，除對(duì)紅瓶豬籠草的萌枝率影響較小外，NAA和IBA對(duì)米蘭達(dá)豬籠草及N.sibuyanensis×maxima的萌枝率、生根率、根數(shù)量和根長(zhǎng)度均有顯著影響(p<0.05)。

表4 不同濃度激素對(duì)豬籠草扦插生根影響

*小寫(xiě)字母表示同一激素不同品種間的差異顯著性檢驗(yàn)；大寫(xiě)字母表示同一品種不同激素間差異顯著性檢驗(yàn)。具有相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。

當(dāng)扦插激素為NAA 200 mg/L，米蘭達(dá)豬籠草的扦插生根率、根數(shù)、根長(zhǎng)均顯著高于對(duì)照，生根率為55.56%為對(duì)照的5倍，根數(shù)為3.22根為對(duì)照的10倍，根長(zhǎng)1.74 cm為對(duì)照的7倍。且NAA 200 mg/l為此種植物激素3種濃度配比中對(duì)米蘭達(dá)豬籠草扦插生根效果最佳。當(dāng)使用NAA及IBA兩種外源激素后N.sibuyanensis×maxima的生根率、根數(shù)及根長(zhǎng)具有明顯提高，促進(jìn)了根系的生長(zhǎng)。NAA 300 mg/L與IBA 100 mg/L生根率相同均為最高，兩者為最適于N.sibuyanensis×maxima扦插生根使用的外源激素。外源激素為NAA 300 mg/l，紅瓶豬籠草的扦插生根率最高，為77.78%，是對(duì)照的1.2倍；當(dāng)NAA為200 mg/L時(shí)，其根數(shù)及根長(zhǎng)均為最高，分別為3.96根及0.79 cm，是對(duì)照的1.6倍及1.7倍。

3 討論

研究3種不同溫度對(duì)豬籠草扦插的影響，篩選得最佳的生根溫度各不相同。N.sibuyanensis×maxima及紅瓶豬籠草這2個(gè)品種的豬籠草最適宜扦插生根的溫度為25℃，在此溫度下，根系的各項(xiàng)指標(biāo)均為最高值，與20℃相比生根率均顯著提高，其中N.sibuyanensis×maxima提高7倍，紅瓶豬籠草提高4倍；米蘭達(dá)豬籠草最佳的扦插溫度為30℃，生根率較20℃提高了4倍。各個(gè)品種的適宜溫度不同，推測(cè)與其原產(chǎn)地所適應(yīng)生長(zhǎng)的環(huán)境溫度有關(guān)[9]。N.sibuyanensis×maxima母本為N.sibuyanensis屬中地種，父本為N.maxima亦屬于中地種[10]，因而此雜交種具有中地種的特性，適宜的生長(zhǎng)溫度為13～29℃之間。紅瓶豬籠草的母本為N.ventricosa屬中地種，父本為N.alata屬低地種[10]，此種豬籠草被認(rèn)為遺傳父母本特性，適應(yīng)性更強(qiáng)，所適宜的生長(zhǎng)溫度為13～32℃。米蘭達(dá)豬籠草母本為N.maxima屬中地種，父本為N.northiana屬極低地種[10]，父母本適應(yīng)生長(zhǎng)的溫度差異較大，故認(rèn)為此種的適宜生長(zhǎng)溫度為13～35℃。

通過(guò)基質(zhì)實(shí)驗(yàn)所得結(jié)論為，泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1的混合基質(zhì)，為紅瓶豬籠草和米蘭達(dá)豬籠草最佳扦插基質(zhì)。N.sibuyanensis×maxima最佳扦插基質(zhì)為水苔，然而當(dāng)扦插基質(zhì)為泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1時(shí)其扦插生根的各項(xiàng)指標(biāo)依然高于米蘭達(dá)豬籠草，因而認(rèn)為此種混合基質(zhì)同樣也適合N.sibuyanensis×maxima的扦插生根，故泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1可以成為豬籠草扦插的常用基質(zhì)。葛亞英等發(fā)現(xiàn)，豬籠草下部枝條的插穗在純苔蘚中生根最好[11]，伍紹建等則認(rèn)為扦插基質(zhì)應(yīng)選擇體積比為3∶1的進(jìn)口泥炭：珍珠巖[12]。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果與上述報(bào)道有些許出入，但總的來(lái)說(shuō)，透氣性好的扦插基質(zhì)更利于豬籠草的扦插生根。

幾種常見(jiàn)栽培基質(zhì)特性如表5所示。水苔具有較強(qiáng)的保水保肥性，因而為3種配比的基質(zhì)中含水量最高濕度最大的一種，而N.sibuyanensis×maxima在此基質(zhì)中生根率最高，故此種豬籠草喜濕，需高濕環(huán)境以助于其扦插生根。純植金石顆粒大，故排水性好，但蓄水能力較差，通過(guò)實(shí)驗(yàn)可知此種基質(zhì)對(duì)豬籠草扦插生根后根系的生長(zhǎng)有利，在此種基質(zhì)下的根系長(zhǎng)度普遍較長(zhǎng)。泥炭∶赤玉∶蘭石=1∶1∶1為三種基質(zhì)的混合，互補(bǔ)了各自所缺的部分，因而此種基質(zhì)既具有保水保肥性，又具有透氣性。

表5 幾種常見(jiàn)栽培基質(zhì)的特性

對(duì)于外源激素的選擇，楊和生等發(fā)現(xiàn)當(dāng)實(shí)驗(yàn)材料為N.hybrida時(shí)，NAA 50～100 mg/L為最佳扦插激素，但所選激素濃度最高為100 mg/L[13]，該濃度選擇范圍較?。粎氢毜鹊难芯恳嗾J(rèn)為，N.mirabilis在50～100 mg/L的IBA溶液預(yù)處理最有利于豬籠草扦插生根，NAA 50～100 mg/L對(duì)豬籠草扦插亦具有較好的促進(jìn)作用[14]。這與本研究中得出的不同品種的豬籠草所適宜的外源激素品種及濃度各不相同，且IBA在使用后具有不穩(wěn)定性的結(jié)論相一致。本研究發(fā)現(xiàn)，激素浸泡時(shí)間為2 h，而吳鈿及楊和生的研究中報(bào)道的激素浸泡時(shí)間分別為5 h和24 h，因而當(dāng)激素為NAA時(shí)，米蘭達(dá)豬籠草最佳濃度為NAA 200 mg/L，N.sibuyanensis×maxima最佳為NAA 300 mg/L，紅瓶豬籠草為NAA 300 mg/L，均比NAA 50～100 mg/L的濃度高，故認(rèn)為當(dāng)激素處理時(shí)間為2 h時(shí)，NAA 200～300 mg/L作為植物激素最適宜于豬籠草扦插生根。